TY  - THES
A1  - Galovic, Magda
T1  - Interplay between N-WASP and CK2 optimizes clathrin-mediated endocytosis of EGFR
N2  - Clathrin-mediated endocytosis (CME) involves spatially and temporally restricted molecular dynamics.
Although protein kinases and the actin cytoskeleton contribute to the process, whether and how
functions of kinases and actin are integrated remains unknown. Here, we demonstrate that neural
Wiskott-Aldrich syndrome protein (N-WASP) and protein kinase CK2 form a complex and localize on
clathrin-coated vesicles (CCVs). N-WASP binds to and is phosphorylated by CK2, thereby reducing the
kinase activity of CK2. By contrast, N-WASP-promoted actin polymerization is decreased upon both
phosphorylation and binding of CK2. Knockdown of N-WASP and CK2, alone or in combination, results
in impaired endocytosis of epidermal growth factor (EGF) and increased cell-surface levels of EGF
receptor (EGFR). In order to rescue the phenotype of N-WASP-CK2 knockdown cells, both N-WASP and
CK2 activities and abilities to assemble in a complex are required. In summary, this study shows that the
N-WASP-CK2 complex integrates in a single circuit different activities contributing to CME of EGFR and
that the interplay between the two proteins optimizes this process.
N2  - Endozytose beschreibt die Bildung neuer interner Membranen aus der Plasmamembran. Sie ist einer
der wichtigsten zellulären Prozesse und an der Nährstoffaufnahme, zellulären Signaltransduktion,
Herunterregulation von Rezeptoren, Zellwachstum und -differenzierung, und am Eintritt von
Pathogenen in Zellen beteiligt ist [1]. Jeder endozytische Vorgang wird mit der Bildung einer
eingestülpten Struktur aus der Plasmamembran eingeleitet. Diese Einstülpungen, die mit einem
Clathrin-Mantel ausgekleidet sind, kennzeichnen den Prozess der Clathrin-vermittelten Endozytose
(CME – clathrin-mediated endocytosis). Die wichtigsten Schritte der Clathrin-vermittelten Endozytose in
Säugetierzellen sind Rekrutierung und Akkumulation der Cargo-Proteine an den Clathrin-ummantelten
Strukturen und die selektive Aufnahme der Nährstoffe und der Signalmolekülen aus dem
extrazellulären Kompartiment [2]. Zusammen mit Adapter- und Hilfsproteinen bildet Clathrin einen
Clathrin-Mantel, der die Größe und Form von Clathrin-ummantelten Gruben (CCP – clathrin-coated pit)
kontrolliert [3; 4]. Die dynamische Regulation des Clathrin-Mantels ist von essentieller Bedeutung für die
nachfolgenden Schritte des endozytischen Prozesses, deren Endresultat die Fission und die Bildung von
Clathrin-ummantelten Vesikeln (CCVs – clathrin-coated vesicles) ist [5]. Die Clathrin-Mantel-assoziierten
Proteine modifizieren die funktionellen und strukturellen Eigenschaften des Mantels und generieren die
treibende Kraft während der CCV-Biogenese. Aktindynamik [6; 7] und reversible Phosphorylierung von
endozytischen Proteinen [2; 5; 8] gelten als wichtig für die korrekte Ausführung der Clathrinvermittelten
Endozytose. Es wird vermutet, dass Aktindynamik in mindestens drei unabhängigen
Schritten der Clathrin-vermittelten Endozytose eine wichtige Rolle ausübt: Aktin bildet das Gerüst für
die Rekrutierung der endozytischen Maschinerie während der Bildung von CCVs. Aktinpolymerisierung
kann die Kraft für Verengung und/oder Fission von CCVs bereitstellen. Aktin kann die neu
abgeschnürten Vesikel von der Plasmamembran abstoßen [9]....
Y1  - 2011
UR  - http://publikationen.ub.uni-frankfurt.de/frontdoor/index/index/docId/24801
UR  - https://nbn-resolving.org/urn:nbn:de:hebis:30:3-248011
N1  - Diese Dissertation steht außerhalb der Universitätsbibliothek leider (aus urheberrechtlichen Gründen) nicht im Volltext zur Verfügung, die CD-ROM kann (auch über Fernleihe) bei der UB Frankfurt am Main ausgeliehen werden.
ER  -