TY  - THES
A1  - Prokein, Maren
T1  - Generierung von dendritischen Zellen aus Monozyten des peripheren Blutes
N2  - In dieser Arbeit werden Monozyten mit Hilfe der Ficoll-Trennung und Positivanreicherung durch das MACS-Magnetsystem gewonnen und durch die Zytokine GM-CSF und Interleukin 4 stimuliert. Nach zwei Tagen weisen die Zellen eine veränderte Morphologie auf, adhärieren zum Teil an Plastik und zeigen sowohl in der adhärenten als auch der nonadhärenten Fraktion charakteristische Merkmale dendritischer Zellen: In der Mikroskopie längliche, fädige Zytoplasmaausläufer sowie in der Durchflusszytometrie das Erscheinen der Oberflächenmarker CD1a und CD40. Die Zellen sind zu diesem Zeitpunkt zu ca. 90% unreife dendritische Zellen, wie die fehlende Ausprägung des Reifemarkers CD83 zeigt. Als unreife dendritische Zellen sind sie somit geeignet für die Antigenaufnahme; zur weiteren Ausreifung ist die Zugabe anderer Zytokine, z.B TNF α, notwendig. Als Mediengrundlage eignen sich sowohl RPMI+FCS als auch X-Vivo 15 und X-Vivo 20, wobei X-Vivo 15 und X-Vivo 20 aufgrund ihrer immunologischen Vorteile RPMI vorzuziehen sind. Ausblick Insgesamt sind schon vielversprechende Wege aufgezeigt worden, dendritische Zellen für die Immuntherapie zu gewinnen, und zwar sowohl aus CD34+ Stammzellen als auch aus CD14+ Monozyten. Wichtig wäre an dieser Stelle ein genauer Vergleich zwischen aus Monozyten und aus CD34+ Vorläuferzellen generierten Zellen in der Laborpraxis. Zum einen sollte hier untersucht werden, aus welcher Ausgangszelle sich größere Mengen an dendritischen Zellen generieren lassen. Die genaue Ermittlung der Zellzahl an jedem Kulturtag wäre hier von Bedeutung. Zum anderen sollte auch die Funktionalität der jeweiligen Zellen, etwa in der mixed-lymphocte-reaction, analysiert und miteinander verglichen werden, und zwar vor und nach zusätzlicher Gabe von TNF alpha. Die Mediengrundlagen X-Vivo 15 und X-Vivo 20 haben sich als gute Alternativen zu dem herkömmlich verwendeten RPMI 1640 gezeigt. An dieser Stelle wäre noch eine vergleichende Analyse der beiden Medien wichtig, und zwar im Hinblick auf die oben genannte Fragestellung der Zellzahl, Ausprägung der Oberflächenmarker und Funktionalität .
N2  - In this study, dendritic cell progenitors from peripheral blood mononuclear cells are enriched by immunomagnetic sorting and cultured for 14 days in serum-containing RPMI 1640 as well as in serum-free X-Vivo 15 and X-Vivo 20 media with added granulocyte-macrophage colony-stimulating factor (GM-CSF) and Interleukin 4 (IL 4). At day 2, cultures contain both adherent and nonadherent cells that display typical phenotypic and morphologic characteristics of DC, with long thin membrane projections and the surface expression of CD1a and CD40. In addition, most of the DC are in an immature status at this point, lacking the surface marker CD83. RPMI 1640 as well as X-Vivo 15 and X-Vivo 20 are shown to be potent mediasupplements for the generation of DC. For clinical purpose, X-Vivo 15 and X-Vivo 20 show several advantages that can be due to the avoid of serum.
Y1  - 2006
UR  - http://publikationen.ub.uni-frankfurt.de/frontdoor/index/index/docId/713
UR  - https://nbn-resolving.org/urn:nbn:de:hebis:30-47271
N1  - Diese Dissertation steht leider (aus urheberrechtlichen Gründen) nicht im Volltext im WWW zur Verfügung, die CD-ROM kann (auch über Fernleihe) bei der UB Frankfurt am Main ausgeliehen werden.
SP  - 1
CY  - Frankfurt am Main
ER  -