Open Access

Marek Christoph Humpich

• Das Lupus-Antikoagulans ist mit einem deutlich erhöhten Risiko für arterielle und venöse Thrombosen assoziiert, so dass ihr Nachweis im Labor von großer klinischer Relevanz ist. Bei den meisten bisher verfügbaren Testsystemen sind Sensitivität und Präzision häufig unbefriedigend, und es kann zu falsch positiven Testergebnissen durch Heparin oder orale Antikoagulantien kommen. Ziel dieser Arbeit war es daher, einen präzisen, sensitiven und spezifischen Test zum optimierten Nachweis des Lupus-Antikoagulans zu entwickeln. Hierzu wurde ein auf der aPTT basierendes vollautomatisches Testprinzip entwickelt, bei dem Mischungen eines lupussensitiven und eines lupusinsensitiven aPTT-Reagenzes mit Patientenplasma oder Normalplasma hergestellt wurden. Die Ergebnisangabe erfolgte in Form einer Ratio, bei der jeweils die beiden Ratios des Patienten– und Normalplasmas nochmals in Relation gesetzt werden. Es wurden 99 Blutspender, 10 Patienten unter einer intravenösen, therapeutischen Behandlung mit unfraktioniertem Heparin, 19 oral antikoagulierte Patienten, sowie 5 Patienten mit Hämophilie A und 15 Patienten mit Antiphospholipid-Syndrom mit dem neuen Testsystem untersucht. Für die Präzision innerhalb einer Messreihe und von Tag zu Tag ergaben sich Varianzkoeffizienten von 1,5 – 1,9%. Der Mittelwert + 2SD der Ratio lag für die 99 Blutspender bei 1,07 und diente als Cutoff. Ein negatives Testergebnis zeigten alle mit Heparin oder oralen Antikoagulantien behandelten Patienten (Spezifität: 100%), 1/5 Patienten mit Hämophilie A reagierte positiv (80%), dieser hatte jedoch eine Faktor VIII Hemmkörper entwickelt. Von den 15 Patienten mit einem definitiven Antiphospholipid-Syndrom wiesen 13 eine erhöhte Ratio auf (Sensitivität: 87%). Somit ermöglicht dieses neu entwickelte Testsystem vollautomatisch einen präzisen, sensitiven und spezifischen Nachweis des Lupus-Antikoagulans.
• Lupus anticoagulant is associated with an increased risk of thrombosis and laboratory detection is of major importance. Multiple tests are available for screening and confirmation, but they differ in sensitivity and specificity, frequently lacking the ability to discriminate between the presence of lupus anticoagulant, heparin and oral anticoagulants. The main purpose of this work was to develop an automated, sensitive APTT-based assay, using mixtures of a lupussensitive and a lupusinsensitive APTT-reagent with normal plasma for detection of lupus anticoagulant. In all patients two APTTs were performed, one with each reagent, on mixtures of test plasma and normal plasma. The ratio between the two clotting times was divided by the corresponding ratio for the normal plasma. 99 healthy volunteers, 10 patients treated with unfractionated heparin intravenously, 19 patients on stable oral anticoagulation, 5 patients with haemophilia A and 15 patients with antiphospholipid-antibody-syndrome (APS) were investigated. The within-series imprecision and the between-series imprecision were excellent with coefficients of variation between 1.5 and 1.9%. The mean + 2 SD of the LR of the 99 healthy volunteers was 1.07 and was used as upper reference limit. All patients treated either with heparin or oral anticoagulants remained negative in the MIXCON-LA-assay (specificity: 100%), while 1/5 patients with haemophilia A, who had solely developed a factor VIII-inhibitor, showed a false positive result. In 13/15 patients with APS an increased ratio was observed (sensitivity: 87%). Thus this assay system allows precise, specific and sensitive detection of lupus anticoagulants.