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Lothar Thomas

• Der Basismechanismus immunchemischer Reaktionen ist die Antigen-Antikörper-Reaktion. Die nachzuweisenden Substanzen haben in der Bestimmungsreaktion Antigen-Funktion. Die zur Bestimmung der Substanz im Test eingesetzten Antikörper können polyklonalen oder monoklonalen Ursprungs sein. Polyklonal gebildete Antikörper werden technisch gewonnen durch die Reinigung der Immunglobulinfraktion immunisierter Tiere. Trotz mehrerer Reinigungsschritte wird vielfach nicht ein spezifischer Antikörper gewonnen, sondern eine heterogene Antikörperfraktion, die neben dem spezifischen Antikörper weitere Antikörper mit unterschiedlicher Affinität Avidität und Spezifität gegen die immunchemisch zu analysierende Substanz enthält. Die technische Gewinnung monoklonaler Antikörper verläuft im ersten Schritt ähnlich der auf polyklonalem Wege; ein Tier wird immunisiert mit dem immundiagnostisch zu bestimmenden Antigen. Es wird jedoch nachfolgend nicht Blut des immunisierten Tieres zur Antikörpergewinnung entnommen, sondern die MHz. In vitro werden im nächsten Schritt Antigen-sensibilisierte B-Lymphozyten aus der Milz mit Myelomzellen der Maus unter Bildung von Hybridzellen fusioniert. Die Hybridzellen werden selektioniert und diejenigen cloniert, die den gewünschten spezifischen Antikörper bilden. Auf diesem Wege können Antikörper einheitlicher Affinität, Avidität und Spezifität in größeren Mengen gewonnen werden. Die Vor- und Nachteile poly- und monoklonal gebildeter Antikörper für immunchemische Tests werden dargestellt.
• The antigen-antibody-reaction is the basic mechanism in immunoassays. In the immunoassay the substance of interest has antigen function. The corresponding antibody is manufactured either as polyclonal antiserum or äs a monoclonal antibody. Polyclonal antisera are manufactured by the removal ofantibodies with unwanted characteristics from the antibody fraction ofanimals immun ized with the antigen ofinterest. Even high purification will not rule out the production ofan antiserum fraction which contains antibodies of different affinity, avidity and specificity directed ägainst the antigen and highly immunogenic contaminants. Monoclonal antibody generation Starts with the same procedure äs polyclonal manufactering: an animal is immun ized-wtth the antigen ofinterest. Butafter the immun ization the spieen ofthe animal is removed rather than blood. The antigen-sensitised B-cells ofthe spieen are fused with myeloma cells. The resulting antibody producing hybridomas are selected and hybridomas which produce antibodies with the characteristics of interest are cloned. By this way a homogenous antibody with definable affinity, avidity and specificity can be produced. The advantages for immunodiagnostics resulting from the monoclonal technology and some shortcomings are discussed.