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The β-barrel assembly machinery (BAM) mediates the folding and insertion of the majority of outer membrane proteins (OMPs) in gram-negative bacteria. BAM is a penta-heterooligomeric complex consisting of the central β-barrel BamA and four interacting lipoproteins BamB, C, D, and E. The conformational switching of BamA between inward-open (IO) and lateral-open (LO) conformations is required for substrate recognition and folding. However, the mechanism for the lateral gating or how the structural details observed in vitro correspond with the cellular environment remains elusive. In this study, we addressed these questions by characterizing the conformational heterogeneity of BamAB, BamACDE, and BamABCDE complexes in detergent micelles and/or Escherichia coli using pulsed dipolar electron spin resonance spectroscopy (PDS). We show that the binding of BamB does not induce any visible changes in BamA, and the BamAB complex exists in the IO conformation. The BamCDE complex induces an IO to LO transition through a coordinated movement along the BamA barrel. However, the extracellular loop 6 (L6) is unaffected by the presence of lipoproteins and exhibits large segmental dynamics extending to the exit pore. PDS experiments with the BamABCDE complex in intact E. coli confirmed the dynamic behavior of both the lateral gate and the L6 in the native environment. Our results demonstrate that the BamCDE complex plays a key role in the function by regulating lateral gating in BamA.
Lipopolysaccharides (LPS) confer resistance against harsh conditions, including antibiotics, in Gram-negative bacteria. The lipopolysaccharide transport (Lpt) complex, consisting of seven proteins (A-G), exports LPS across the cellular envelope. LptB2FG forms an ATP-binding cassette transporter that transfers LPS to LptC. How LptB2FG couples ATP binding and hydrolysis with LPS transport to LptC remains unclear. We observed the conformational heterogeneity of LptB2FG and LptB2FGC in micelles and/or proteoliposomes using pulsed dipolar electron spin resonance spectroscopy. Additionally, we monitored LPS binding and release using laser-induced liquid bead ion desorption mass spectrometry. The β-jellyroll domain of LptF stably interacts with the LptG and LptC β-jellyrolls in both the apo and vanadate-trapped states. ATP binding at the cytoplasmic side is allosterically coupled to the selective opening of the periplasmic LptF β-jellyroll domain. In LptB2FG, ATP binding closes the nucleotide binding domains, causing a collapse of the first lateral gate as observed in structures. However, the second lateral gate, which forms the putative entry site for LPS, exhibits a heterogeneous conformation. LptC binding limits the flexibility of this gate to two conformations, likely representing the helix of LptC as either released from or inserted into the transmembrane domains. Our results reveal the regulation of the LPS entry gate through the dynamic behavior of the LptC transmembrane helix, while its β-jellyroll domain is anchored in the periplasm. This, combined with long-range ATP-dependent allosteric gating of the LptF β-jellyroll domain, may ensure efficient and unidirectional transport of LPS across the periplasm.
What characterises children's publishing in France at this time of a uniform worldwide culture imposed in a positive fashion by the 1989 Declaration of Children's Rights and, more dubiously, by globalization and electronic reproduction? Can we speak of the influence on it of a new multinational republic of children through the increasing number of translations from other countries or does French children's literature rest only on a few successful classics such as Jean de Brunhoff's Babar or Charles Perrault's tales, among which Little Red Riding Hood is a world's bestseller? The purpose of this paper is to point out the contemporary literary trends evincing a new awareness of our writers, artist creators and publishing houses expressing the sensibility of our reading public.
Collaboration between the International Association for the Improvement of Mother Tongue Education (IAIMTE) and the Education Department of the University of Toulouse II has existed for several years now. Such collaboration has resulted in a desire for face to face contact: the IAIMTE was intent on increasing its French audience,while the French team was able to grasp the opportunity to exchange their French-speaking studies in a broad international context. Thus, the IAIMTE requested the team from Toulouse organise the fifth conference in France (Albi) in 2005. For this conference, we invited specialists from French-speaking countries to present their research and reflections on the role of literature both inside and outside school. This issue presents the corresponding papers.
Highlights
• Retrograde dye perfusion facilitates functional analysis of aortic valve competency.
• Retrograde dye perfusion visualizes vasa vasorum of the aorta and pulmonary artery.
• Vasa vasorum of the pulmonary artery derive from conal coronary branches in humans.
Abstract
Introduction: Multiple cardiovascular conditions can lead to unexpected fatality, which is defined as sudden cardiac death. One of these potentially underlying conditions is aortic regurgitation, which can be caused by discrete changes of the geometry of the proximal aorta. To analyze aortic valve competency and furthermore to elucidate underlying pathological alterations of the coronary arteries and the vasa vasorum a perfusion method to simulate a diastolic state was designed.
Material and methods: A postmortem approach with retrograde perfusion of the ascending aorta with methylene blue was applied to three bodies. The procedure comprised cannulation of the brachiocephalic trunk, clamping of the aortic arch between brachiocephalic trunk and left carotid artery, infusion of 250 ml of methylene blue, and optical clearing of the superficial tissue layers after perfusion. Organs were examined directly following perfusion and after optical clearing.
Results: Assessment and visualization of aortic valve competency and the vasa vasorum were possible in all three instances. Visualization of the coronary perfusion was impaired by postmortem thrombus formation. Optical clearing did not provide additional information.
Discussion: The method presented here is a time- and cost-efficient way of visualizing aortic valve competency and the vasa vasorum. The visualization of the vasa vasorum highlights the potential of this method in basic research on diseases of the great arteries and coronaries. However, for a time-efficient functional analysis of the coronaries, other methods must be applied.
Einleitung: Funde von Knochen(fragmenten) können von Interesse für Strafverfolgungs- oder Denkmalbehörden sein. Die forensisch-osteologische Begutachtung kann zur Einordnung der Bedeutung des Fundes beitragen. Ziel der Studie war, durch eine Auswertung von am Institut für Rechtsmedizin Gießen begutachteten Knochenfunden einen Überblick über Umstände und Art der Funde sowie Umfang und Ergebnisse der Begutachtungen zu erhalten.
Material und Methoden: Für den Zeitraum von 2005 bis 2019 wurden im Institut archivierte osteologische Gutachten analysiert und Daten zu Fundort, -umständen, Humanspezifität, postmortalem Intervall, Spuren von Gewalteinwirkungen und die Ergebnisse weiterführender Untersuchungen ausgewertet.
Ergebnisse: Von 172 begutachteten Knochenfunden wurden 40 % in Wald- und Wiesengebieten aufgefunden. In 58 % enthielten die Funde menschliche Knochen, davon wurde in 32 % eine forensisch relevante Liegezeit nicht ausgeschlossen. Zeichen perimortaler Gewalteinwirkung fanden sich in 6 % menschlicher Knochenfunde. Ergänzende DNA-Untersuchungen wurden in 20 % aller Funde durchgeführt; davon verlief in 62 % die Typisierung humaner STR erfolgreich, und in 41 % gelang die Zuordnung zu einem antemortalen Profil. Bei den zur Begutachtung übersandten nichtmenschlichen Knochen handelte es sich am häufigsten um Knochen von Hirsch bzw. Reh (32 %), Schwein (29 %) und Rind (14 %).
Diskussion: Die Begutachtung von Knochenfunden soll Behörden ermöglichen, die (straf-)rechtliche Relevanz eines Fundes einzuordnen. Die makroskopische Untersuchung ist dafür von großer Bedeutung. Für die Identifizierung menschlicher Knochen besitzen DNA-Vergleichsuntersuchungen einen großen Stellenwert. Sie waren für 81 % der erfolgreichen Identifizierungen der Fälle mit menschlichen Knochen verantwortlich.
Im Rahmen der Obduktion des Leichnams einer angeblich im 7. Monat Schwangeren wurde ein toter Fetus geborgen. Dieser war durch Fäulnis und Madenfraß stark verändert und wog 405 g, wobei in Anbetracht des zu Verlust gegangenen Gewebes von einem Gewicht zum Zeitpunkt des Todes über 500 g auszugehen war. Die übrigen erhobenen Maße sprachen wenigstens für ein Erreichen der 26. Schwangerschaftswoche. Dennoch wurde aufgrund des Gewichts eine Einordnung als Fehlgeburt vorgenommen. Gemäß dem später, am 01.11.2018, geänderten § 31 PStV wäre eine Klassifikation als Totgeburt möglich geworden.
Hintergrund: Nach dem Grundgesetz der Bundesrepublik Deutschland (GG) liegt die Gesetzgebungsbefugnis für Todesfeststellung und Leichenschau bei den Ländern, während das Personenstandswesen in die Bundesgesetzgebungsbefugnis fällt. Das Personenstandsrecht ist im Personenstandsgesetz (PStG) und der Personenstandsverordnung (PStV) geregelt.
Ziel der Arbeit: Untersucht werden sollten evtl. Auswirkungen der Änderung des § 31 PStV vom 01.11.2018 auf die ärztliche Leichenschau. Konkret ging es um die Abgrenzung der Tot- von der Fehlgeburt und damit der Pflicht zur ärztlichen Leichenschau unter Berücksichtigung der Bundes- und Landesgesetzgebung.
Methodik: Die „Bestattungsgesetze“ der 16 Bundesländer sowie dazugehörige Verordnungen und das PStG und die PStV wurden systematisch analysiert.
Ergebnisse: In 12 der 16 Ländergesetze wird das Totgeborene bzw. tot geborene Kind – in Abgrenzung zur Fehlgeburt (Fehlgeborenes) – über das Geburtsgewicht von mindestens 500 g definiert. In Hessen, Bremen und im Saarland wird zusätzlich als alternatives Kriterium die 24. Schwangerschaftswoche (SSW) genannt. Das Kriterium „Erreichen der 24. SSW“ kam im bremischen und saarländischen Bestattungsrecht nach der Änderung des § 31 PStV hinzu. Im hessischen Friedhofs- und Bestattungsgesetz ist alternativ „nach der 24. SSW geboren“ verwendet.
Diskussion: Unabhängig von der nicht abschließend geklärten Frage, ob es sich bei einer Totgeburt um einen personenstandsrechtlichen „Sterbefall“ handelt, lässt sich eine von den „Bestattungsgesetzen“ der Länder unabhängige Leichenschaupflicht ableiten: bei der Annahme eines Sterbefalls unmittelbar aus § 38 Nr. 4 PStV, bei Ablehnung mittelbar aus § 33 S. 3 PStV i. V. m. § 5 PStV. Für diese Leichenschaupflicht müssten bezüglich der Leichendefinition die Kriterien des Personenstandsrechts gelten. Demnach wäre in allen Bundesländern – unabhängig von den Kriterien in den jeweiligen „Bestattungsgesetzen“ – zur Differenzierung zwischen Totgeburt und Fehlgeburt das alternative Merkmal „Erreichen der 24. Schwangerschaftswoche“ zu überprüfen, falls die tote Leibesfrucht, die keine Zeichen des Gelebthabens außerhalb des Mutterleibs aufweist, unter 500 g wiegt.
Bones found by chance can be of great criminal or historical interest. The nature of their appraisal depends on the individual case, the locally effective legislation and the available resources. To assess whether a find is relevant with respect to criminal investigation, the circumstances of the find and the results of the forensic examination carried out by trained personnel must be considered. The aim of this study was to obtain an overview of the circumstances and nature of the finds as well as the results of the subsequent expert opinions by evaluating bone finds from the federal state of Hesse, Germany. For this purpose, over a 10-year period from 2011 to 2020, all bone finds examined at the Institutes of Legal Medicine in Gießen and Frankfurt am Main, Germany, were evaluated retrospectively with regard to the locations and circumstances of the finds, their nature (human or non-human), the postmortem interval, possible traces of violent impact and the results of further examinations. Of the 288 bone finds evaluated, 38.2% were found in forests, meadows and parks. In 50.7%, the finds contained human bones, of which 37.0% had a forensically relevant postmortem interval of 50 years or less. Evidence of trauma was described in 77.4% of the human bone cases: postmortem damage in 78.8%, peri-mortem injury in 9.7% and ante-mortem injury in 11.5%. DNA examinations were performed in 40.4% of the human bone finds. They yielded STR profiles in 81.3%, leading to a definite identification in 35.4%. Among the non-human bones sent in, the most common were bones from pigs (23.4%), deer (18.1%), cattle (16.4%), roe deer (11.7%) and sheep (11.7%). The macroscopic examination is the first step of the forensic-osteological evaluation and sets the course for further examinations or investigations. DNA examinations are of great importance for the reliable identification of human bones. They were responsible for 70.8% of successful identifications.
We report the measurements of proton-deuteron (p-d) and deuteron-deuteron (d-d) correlation functions in Au+Au collisions at sNN−−−√ = 3 GeV using fixed-target mode with the STAR experiment at the Relativistic Heavy-Ion Collider (RHIC). For the first time, the source size (RG), scattering length (f0), and effective range (d0) are extracted from the measured correlation functions with a simultaneous fit. The spin-averaged f0 for p-d and d-d interactions are determined to be -5.28 ± 0.11(stat.) ± 0.82(syst.) fm and -2.62 ± 0.02(stat.) ± 0.24(syst.) fm, respectively. The measured p-d interaction is consistent with theoretical calculations and low-energy scattering experiment results, demonstrating the feasibility of extracting interaction parameters using the femtoscopy technique. The reasonable agreement between the experimental data and the calculations from the transport model indicates that deuteron production in these collisions is primarily governed by nucleon coalescence.