Refine
Year of publication
- 2004 (1712) (remove)
Document Type
- Article (640)
- Doctoral Thesis (277)
- Part of a Book (150)
- Part of Periodical (142)
- Working Paper (114)
- Review (110)
- Book (60)
- Preprint (55)
- Conference Proceeding (48)
- Report (46)
Language
- German (1195)
- English (475)
- French (17)
- Multiple languages (6)
- Portuguese (5)
- Spanish (5)
- mis (4)
- Italian (2)
- Turkish (2)
Is part of the Bibliography
- no (1712) (remove)
Keywords
- Deutsch (34)
- Johann Wolfgang von Goethe (32)
- Frankfurt <Main> / Universität (29)
- Deutschland (27)
- Syntax (27)
- Rezension (24)
- Generative Transformationsgrammatik (23)
- Anton Ulrich <Braunschweig-Wolfenbüttel (19)
- Herzog> / Octavia (19)
- Wortstellung (19)
- Literatur (16)
- Goethe, Johann Wolfgang von (15)
- Vormärz (15)
- Aufsatzsammlung (14)
- Optimalitätstheorie (12)
- Phonologie (12)
- Kongress (11)
- Frankfurt <Main> (10)
- Ästhetik (10)
- Englisch (8)
- Formale Semantik (8)
- Geschichte (8)
- Informationsstruktur (8)
- Rezeption (8)
- Thema-Rhema-Gliederung (8)
- Topikalisierung (8)
- Dialektologie (7)
- Frankfurt (7)
- Intonation <Linguistik> (7)
- Relativsatz (7)
- Schätzung (7)
- Semantik (7)
- Spracherwerb (7)
- Theorie (7)
- Extraposition (6)
- Geldpolitik (6)
- Hofmannsthal, Hugo von (6)
- Interpretation (6)
- Kulturwissenschaften (6)
- Malagassi-Sprache (6)
- Namenkunde (6)
- Nationalsozialismus (6)
- Oberflächenstruktur <Linguistik> (6)
- Poetik (6)
- Pragmatik (6)
- Tiefenstruktur (6)
- USA (6)
- Weimar (6)
- Übersetzung (6)
- Brief (5)
- Grammatische Kategorie (5)
- Kafka, Franz (5)
- Lexikologie (5)
- Literaturwissenschaft (5)
- Morphologie (5)
- Musik (5)
- Neue Medien (5)
- Roman (5)
- Russisch (5)
- Schweizerdeutsch (5)
- Ungarisch (5)
- Venture Capital (5)
- Austronesische Sprachen (4)
- Bibliografie (4)
- Burkina Faso (4)
- Computerlinguistik (4)
- Corporate Governance (4)
- Erzähltheorie (4)
- Europa (4)
- Europäische Union (4)
- Forschung (4)
- Genus verbi (4)
- Globalisierung (4)
- Heine, Heinrich (4)
- Herder (4)
- Interdisziplinarität (4)
- Japanisch (4)
- Johann Carl (4)
- Klitisierung (4)
- Kontrastive Grammatik (4)
- Kultur (4)
- Linguistik (4)
- Medien (4)
- Morphonologie (4)
- Pronomen (4)
- Risikokapital (4)
- Sprachtypologie (4)
- Theater (4)
- Thematische Relation (4)
- Verb (4)
- Wezel (4)
- Aspekt <Linguistik> (3)
- Aufklärung (3)
- Austria (3)
- Bank (3)
- Bestandserhaltung (3)
- Bulgarisch (3)
- Chewa-Sprache (3)
- Christian Fürchtegott (3)
- Christoph Martin (3)
- Coleoptera (3)
- Comic (3)
- Demokratie (3)
- Derivat, Wertpapier (3)
- Drama (3)
- Ethik (3)
- Evaluation (3)
- Frankfurt / Universität (3)
- Frankreich (3)
- Französisch (3)
- Frau (3)
- Friedrich (3)
- Funktionale Kategorie (3)
- Germanistik (3)
- Going Public (3)
- Hessen (3)
- Interrogativsatz (3)
- Italien (3)
- Japan (3)
- Jena (3)
- Johann Gottfried von (3)
- Judenvernichtung (3)
- Kapitalertrag (3)
- Karl Philipp (3)
- Kasus (3)
- Klein- und Mittelbetrieb (3)
- Kontrastive Phonologie (3)
- Kontrastive Syntax (3)
- Kultursponsoring (3)
- Landschaft (3)
- Liebe (3)
- Literaturtheorie (3)
- Ludwig (3)
- Matching (3)
- Metapher (3)
- Monetary Policy (3)
- Moritz (3)
- Novalis (3)
- Oper (3)
- Physik (3)
- Physiker (3)
- Politik (3)
- Private Equity (3)
- Satzanalyse (3)
- Schiller (3)
- Schriftlichkeit (3)
- Student (3)
- Tagalog (3)
- Tagebuch (3)
- Technik (3)
- Textanalyse ; Linguistische Datenverarbeitung; Computerlinguistik (3)
- Türkisch (3)
- Volatilität (3)
- Walser, Martin (3)
- Wieland (3)
- Wissenschaftliche Bibliothek (3)
- Zeitschrift (3)
- prosody (3)
- species (3)
- syntaxonomy (3)
- Übersetzungswissenschaft (3)
- Adorno (2)
- Adverb (2)
- Adverbiale (2)
- Akteur (2)
- Aktienbörse (2)
- Aktienmarkt (2)
- Arbeiterbewegung (2)
- Arbeitsbeschaffungsmaßnahme (2)
- Arbeitsbeschaffungsmaßnahmen (2)
- Arbeitsplatz (2)
- Archäologie (2)
- Ausstellung (2)
- Authentizität (2)
- Balde (2)
- Basler Eigenkapitalvereinbarung , 2001 (2)
- Bildung (2)
- Biodiversität (2)
- Biographie (2)
- Biomarker (2)
- Bodensee (2)
- Brentano (2)
- Börsenkurs (2)
- Capital-Asset-Pricing-Modell (2)
- Codierung (2)
- Computer (2)
- Cryptorhynchinae (2)
- Curculionidae (2)
- Deutschunterricht (2)
- Discretization Error (2)
- Diskontinuität (2)
- Eichendorff (2)
- Enzymaktivität (2)
- Epik (2)
- Ergativ (2)
- Erzählung (2)
- Essay (2)
- Europe (2)
- Experiment (2)
- Fabel (2)
- Feminismus (2)
- Fontane, Theodor (2)
- Fouqué (2)
- Frage (2)
- Frankfurt <Main, 2003> (2)
- Frankfurt <Main, 2004> (2)
- Frankfurt <Main> / Institut für Kernphysik (2)
- Frankfurt <Main> / Universität / Poelzig-Bau (2)
- Frankfurt am Main (2)
- Franzobel (2)
- Frauenliteratur (2)
- Fremdfinanzierung (2)
- Friedrich von (2)
- Gellert (2)
- Gender (2)
- Geschlechterbeziehung (2)
- Geschlechterforschung (2)
- Gibson, Mel (2)
- Goethe, Johann Wolfgang von / Faust (2)
- Gotthold Ephraim (2)
- Grimm, Jacob (2)
- Grimm, Wilhelm (2)
- Großbritannien (2)
- Habitat (2)
- Handschrift (2)
- Hedging (2)
- Herausstellung (2)
- Herrschaft (2)
- Hochschullehrer (2)
- Hoffmann (2)
- Hoftheater (2)
- Hypertext (2)
- Hämodynamik (2)
- Hölderlin, Friedrich (2)
- Immunologie (2)
- Indogermanische Sprachen (2)
- Initial Public Offerings (2)
- Integration (2)
- Interaktion (2)
- Intermedialität (2)
- Italienisch (2)
- Jacob (2)
- Joseph von (2)
- Jurist (2)
- Kanzler (2)
- Kapitalkosten (2)
- Kinderliteratur (2)
- Kleist, Heinrich von (2)
- Kollektives Gedächtnis (2)
- Koloniales Bildarchiv (Frankfurt, Main) (2)
- Koreanisch (2)
- Kreditrisiko (2)
- Kreditwürdigkeit (2)
- Kriminalgeschichte (2)
- Kulturanthropologie (2)
- Kulturgeschichte (2)
- Kulturwissenschaft (2)
- Kunst (2)
- Körper (2)
- Landwirtschaft (2)
- Lenz (2)
- Lessing (2)
- Liebesbrief (2)
- Long-Run Performance (2)
- Lyrik (2)
- Mann, Thomas (2)
- Markiertheit (2)
- Meistersang (2)
- Metternich, Klemens Wenzel Nepomuk Lothar von (2)
- Mittelhochdeutsch (2)
- Mobbing (2)
- Mode (2)
- Model Error (2)
- Modellierung (2)
- Morphosyntax (2)
- Mozart (2)
- Mythos (2)
- NMDA-Rezeptor (2)
- Nachruf (2)
- Natur (2)
- Negation (2)
- Netto-Effekte (2)
- Neuer Markt (2)
- Nominalzins (2)
- Online-Publikation (2)
- Otto (2)
- Paiwan (2)
- Palatalisierung (2)
- Paul (2)
- Performanz <Linguistik> (2)
- Peter (2)
- Philosophie (2)
- Phonetik (2)
- Polnisch (2)
- Pop-Kultur (2)
- Pro-Form (2)
- Prognose (2)
- Prosa (2)
- Prosodie (2)
- Pseudoscorpiones (2)
- Regenerative Energie / Wasserstoff / Halbmetall / Dezentrale Energieversorgung (2)
- Relativistic heavy-ion collisions (2)
- Rentenmarkt (2)
- Revolution <1848> (2)
- Rezeptionsästhetik (2)
- Rilke, Rainer Maria (2)
- Romantik (2)
- Rumänien (2)
- Satz (2)
- Satzglied (2)
- Schrift (2)
- Schwerionenphysik (2)
- Silbe (2)
- Skopus (2)
- Soninké (2)
- Sozialer Konflikt (2)
- Sozialgeschichte (2)
- Sprachstatistik (2)
- Sprachwandel (2)
- Statistischer Test (2)
- Stochastic Volatility (2)
- Tandem-Massenspektrometrie (2)
- Telekommunikation (2)
- Teufel <Motiv> (2)
- Tibetobirmanische Sprachen (2)
- Tieck (2)
- Tod <Motiv> (2)
- Tod eines Kritikers (2)
- Transitivität (2)
- Umgangssprache (2)
- Underpricing (2)
- Universität (2)
- Unternehmen (2)
- Vanadium (2)
- Varnhagen, Rahel (2)
- Vergleichende Literaturwissenschaft (2)
- Verlag (2)
- Verschlusslaut (2)
- Volatility Risk Premium (2)
- Walser, Martin: Tod eines Kritikers (2)
- Wasserstoffperoxid (2)
- Weiblichkeit (2)
- Weimarer Republik (2)
- Weltliteratur (2)
- Wertpapiermarkt (2)
- West Africa (2)
- Westafrika (2)
- Wirtschaftsgeschichte (2)
- Wirtschaftswissenschaftler (2)
- Wissenschaft (2)
- Wolfgang Amadeus (2)
- Zerobond (2)
- Zitat (2)
- bullying (2)
- classification (2)
- conservation (2)
- corporate governance (2)
- diary study (2)
- diversification (2)
- duration models (2)
- dynamics (2)
- ecology (2)
- environment (2)
- exchange rates (2)
- financial systems (2)
- financial transaction data (2)
- information structure (2)
- lender coordination (2)
- liquidity trap (2)
- mobbing (2)
- multiple bank financing (2)
- neophytes (2)
- relationship lending (2)
- septic shock (2)
- social conflict (2)
- species composition (2)
- structure (2)
- syntax (2)
- time series models (2)
- workplace (2)
- 'Musarion' (1)
- (anthropogene) Klimabeeinflussung (1)
- 2004 (1)
- 2004> (1)
- 5-Aminolävulinsäure (5-ALA) (1)
- 5-aminolevulinic acid (5-ALA) (1)
- :g Frankfurt <Main (1)
- ADAMTS-13 (1)
- ADAR (1)
- APM (1)
- APS (1)
- ATM-ATR (1)
- Abar- movement (1)
- Abgrenzung (1)
- Abnehmer (1)
- Acenocoumarol (1)
- Acetylsalicylsäure (1)
- Achim von (1)
- Adamaua-Ost-Sprachen (1)
- Adoptive Immuntherapie (1)
- Adorno, Theodor W. (1)
- Adventivart (1)
- Affix (1)
- Affrikata (1)
- African élites (1)
- Afrikanische Eliten (1)
- Agency Theory (1)
- Agglomeration <Wirtschaft> (1)
- Agrargeschichte (1)
- Agrilus auricollis (1)
- Akademisches Schreiben (1)
- Aktienanalyse (1)
- Aktienbewertung (1)
- Aktienkurs (1)
- Aktienrückkauf (1)
- Aktive Zone (1)
- Akustische Phonetik (1)
- Akustische Spektrographie (1)
- Akute Leukämie (1)
- Albaner See (1)
- Albert (1)
- Alemannisch (1)
- Alles, alles Liebe! (1)
- Allgemeine Literatur-Zeitung (1)
- Allgemeine Literatur-Zeitung <Halle, Saale> (1)
- Allocation (1)
- Allomorph (1)
- Alltag (1)
- Almanach (1)
- Alps (1)
- Altenberg (1)
- Altenheim (1)
- Alter (1)
- Altern (1)
- Aluminium (1)
- Alzheimer (1)
- Alzheimer-Krankheit (1)
- Ambulante Pflege (1)
- Amerika (1)
- Amerikabild (1)
- Amiodaron (1)
- Amsterdam-Kriterien (1)
- Amyloid <beta-> (1)
- An Longus (1)
- Analoge Signalverarbeitung (1)
- Anapher <Syntax> (1)
- Angiogenesis (1)
- Animation (1)
- Ankündigungseffekt (1)
- Anreizvertrag (1)
- Anthropologe (1)
- Anthropologie (1)
- Anti-Cardiolipin-Antikörper (1)
- Anti-Phospholipid-Syndrom (1)
- Antike <Motiv> (1)
- Antisemitismus (1)
- Antisense-Oligonukleotide (1)
- Antiteilchen (1)
- Apolipoprotein E (1)
- Apoptosis (1)
- Arachnida (1)
- Arbeitslosenversicherung (1)
- Arbeitslosigkeit (1)
- Arbeitsmarkt (1)
- Arbeitsmarktforschung (1)
- Arbeitsmarktpolitik (1)
- Arbeitsmarktpolitik / Weiterbildung / Bildungsinvestition / Berufsbildungspolitik / Wirtschaftspolitische Wirkungsanalyse / Arbeitslosigkeit (1)
- Arbeitsmarktpolitik / Weiterbildung / Wirtschaftspolitische Wirkungsanalyse / Mikroökonometrie / Schätzung / Neue Bundesländer (1)
- Arbeitsmobilität / Erwerbsverlauf / Lohn / Schätzung / Deutschland (1)
- Arbeitsstrategien (1)
- Arboran-/Fernanderivate (1)
- Archaismus (1)
- Architektur (1)
- Architekturwettbewerb (1)
- Archäobotanik (1)
- Argatroban (1)
- Arnim (1)
- Arnim, Achim von (1)
- Artemisia annua (1)
- Artenarmut (1)
- Artenliste (1)
- Arterielle Thrombose (1)
- Artikel (1)
- Artusepik (1)
- Arzneimittel (1)
- Arzneimittelentwicklung (1)
- Arzneimittelforschung (1)
- Ascidien (1)
- Asset Pricing (1)
- Asset Securitisation (1)
- Asymmetrie (1)
- Asymmetries (1)
- Asymmetrische Information (1)
- Atemwege (1)
- Atom (1)
- Atomphysiker (1)
- Atomwaffen (1)
- Attraktion (1)
- Auctions (1)
- Aufforderungssatz (1)
- Aurora kinases (1)
- Auskunftei (1)
- Auslandsgermanistik (1)
- Ausländer (1)
- Ausrufesatz (1)
- Außenpolitik (1)
- Avantgardeliteratur (1)
- Averroes (1)
- BDNF (1)
- BRCAl (1)
- Bach, Johann Sebastian / Messe BWV 232 (1)
- Bachmann, Ingeborg (1)
- Baculovirussystem (1)
- Baden-Württemberg (1)
- Balkan (1)
- Baltic island of Rügen (1)
- Baltoslawische Sprachen (1)
- Bambiland (1)
- Banking Regulation (1)
- Bankkredit (1)
- Bankrecht (1)
- Bantusprachen (1)
- Barbier, Auguste (1)
- Bargaining Power (1)
- Barock (1)
- Barthes, Roland (1)
- Basel (1)
- Basel II Accord (1)
- Basel-Stadt (1)
- Basketball ; Jugendtraining (1)
- Basle 2 (1)
- Basle Committee (1)
- Bassoon (1)
- Baudelaire, Charles (1)
- Baudrillard, Jean (1)
- Bauforschung (1)
- Beethoven, Ludwig van (1)
- Befragung (1)
- Befristeter Arbeitsvertrag (1)
- Begleitfauna (1)
- Behinderter (1)
- Belyj, Andrej (1)
- Benedictus de (1)
- Benjamin (1)
- Benjamin, Walter (1)
- Benthos (1)
- Beobachtung (1)
- Berbersprachen (1)
- Berlin <2002> (1)
- Bernd (1)
- Bernhard, Thomas / Elisabeth die Zweite (1)
- Bertolucci, Bernardo (1)
- Bertuch (1)
- Beruf (1)
- Berufsakademie (1)
- Berufswechsel (1)
- Berylliumhydrid (1)
- Beschaffungsmarketing (1)
- Beschreibungskomplexität (1)
- Bestandt (1)
- Bestimmter Artikel (1)
- Betafaktor (1)
- Beteiligungsfinanzierung (1)
- Bethe (1)
- Betreutes Wohnen (1)
- Betriebliche Kennzahl (1)
- Bewusstseinsspaltung (1)
- Beziehungsmanagement (1)
- Bibel (1)
- Bibliographie (1)
- Bibliographie 1945-2000 (1)
- Bibliography (1)
- Bibliothekssystem (1)
- Bibliotheksverbund (1)
- Biedermeier (1)
- Bild (1)
- Bildverstehen (1)
- Bindungseigenschaften (1)
- Bindungskraft (1)
- Bindungstheorie <Linguistik> (1)
- Bioassay-guided fractionation (1)
- Biochemische Analyse (1)
- Biografie (1)
- Biomembran (1)
- Biotopkartierung (1)
- Biotoptyp (1)
- Biozönose (1)
- Biozönosen (1)
- Bismarck, Otto von (1)
- Bitoptypen (1)
- Blitzmädchen (1)
- Bloch, Ernst (1)
- Bluetooth-Standard (1)
- Blumenberg (1)
- Blumenberg, Hans (1)
- Blutgerinnungshemmung (1)
- Bodenbewertung (1)
- Bodensee-Gebiet (1)
- Bodenvegetation (1)
- Bohemia (1)
- Bolivarianische Revolution (1)
- Bootstrap (1)
- Borchardt (1)
- Born (1)
- Box-Cox quantile regression (1)
- Branchenkrise (1)
- Brasilien (1)
- Braun, Volker (1)
- Braun, Volker (Schriftsteller) (1)
- Brecht, Bertolt (1)
- Bremen (1)
- Brief <Motiv> (1)
- Briefroman (1)
- Briefsammlung (1)
- Briefsammlung 1910-1929 (1)
- Brinkmann (1)
- Brinkmann, Rolf Dieter (1)
- Brinkmann, Rolf Dieter / Rom, Blicke (1)
- Broncho-alveoläre Lavage (1)
- Brownsche Bewegung (1)
- Brucit (1)
- Brustkrebs ; Klinische Medizin ; Kontrollierte klinische Studie (1)
- Bräker, Ulrich: Tagebuch des armen Mannes im Tockenburg (1)
- Buchdruck (1)
- Buchproduktion (1)
- Buddha (1)
- Bukowina (1)
- Bulgakov, Michail (1)
- Burmeister, Brigitte (1)
- Burrichter, Ernst (Botaniker) (07.06.1921-09.11.2003) (1)
- Business Network (1)
- Butler, Judith (1)
- Butylmethylether <tertiär-> (1)
- Böhmen <Motiv> (1)
- Böll, Heinrich (1)
- Börne, Ludwig (1)
- Börsenzulassung (1)
- Büchner (1)
- Büchner, Georg (1)
- Bürger (1)
- Bürgerbeteiligung (1)
- CAPM (1)
- CD62 (1)
- CENP-E (1)
- CERN (1)
- CES-Funktion (1)
- COPD (1)
- Cabet, Étienne (1)
- Cabezon (1)
- Caché (1)
- Cadherine ; Proteine ; Struktur-Aktivitäts-Beziehung (1)
- Caged Verbindungen (1)
- Calacalles droueti (1)
- Calcium activated potassium channels (1)
- Calcium-aktivierte (1)
- Calycotome villosa (Poiret) Link Subsp. Intermedia (1)
- Camillo, Giulio (1)
- Campion, Jane (1)
- Camus (1)
- Capital-labor substitution (1)
- Carbendazim (1)
- Cardiac fibroblast (1)
- Cardiolipin (1)
- Carl Friedrich von Weizsäcker (1)
- Caroline de La Motte- (1)
- Carpathian birch (1)
- Caspasen (1)
- Cdc6; Cdc25; Cdc27-Cdc20/CdhI (1)
- Celan, Paul (1)
- Cell cycle (1)
- Central Europe (1)
- Cerebral ischemia (1)
- Char, René (1)
- Charge fluctuations (1)
- Chatten <Kommunikation> (1)
- Chemical equilibration (1)
- Chemical synthesis (1)
- Chemische Gleichgewichtherstellung (1)
- Chemische Ökologie (1)
- Chenopodion rubri (1)
- Chichewa name (1)
- Chinon (1)
- Chlorolestes elegans (1)
- Chomsky (1)
- Christian Dietrich (1)
- Christoph Martin Wieland (1)
- Chromosomale Translokation (1)
- Chronic obstructive pulmonary disease (1)
- Chthoniidae (1)
- Ciclosporin (1)
- Cixous, Hélène (1)
- Clemens (1)
- Clemens von (1)
- Climate Change (1)
- Clopidogrel (1)
- Cloud forests (1)
- Clubiona marmorata (1)
- Cluster <Wirtschaft> (1)
- Cnidion dubii (1)
- Cnidium dubium (1)
- Colitis Ulcerosa (1)
- Colonial History (1)
- Colonkrebs (1)
- Comparing Financial Systems (1)
- Compensation (1)
- Complementarity (1)
- Computerphilologie (1)
- Computersicherheit (1)
- Contracting (1)
- Cooperation (1)
- Cordaiten (1)
- Cordichin (1)
- Corporate Governance / Informationsökonomik / Informationsverbreitung / Finanzintermediär / Theorie (1)
- Corporate Governance / Selbstverpflichtung / Rechtsdurchsetzung / Börsenkurs / Finanzmarkt / Deutschland (1)
- Correa de Arauxo (1)
- Cotta, Johann Friedrich von (1)
- Covenants (1)
- Crack (1)
- Credit derivatives (1)
- Credit rating agencies (1)
- Credit risk (1)
- Credit spreads (1)
- Critical Theory (1)
- Cronenberg, David (1)
- Curculionoidea (1)
- Cyberspace <Motiv> (1)
- Cytochrom c (1)
- Cytochrom-bc1-Komplex (1)
- DDR-Literatur (1)
- DIN EN ISO 9001:2000 (1)
- DNA- Spaltung (1)
- DNA-Analytik (1)
- DNS analytics (1)
- DNS-Synthese (1)
- Darmerkrankung (1)
- Darreichungsform (1)
- Das Böse (1)
- Das Groteske (1)
- Datenschutz (1)
- Datenverarbeitung (1)
- Dauer (1)
- David, Jacques Louis (1)
- Debt and equity financing (1)
- Deciduous forests (1)
- Decimus Iunius (1)
- Defibrillation (1)
- Deflation (1)
- Dendritic cell (1)
- Dendritic cell population (1)
- Denkmal (1)
- Depression (1)
- Der Untergang <Film> (1)
- Desmoulins, Camille (1)
- Dessins d'enfants (1)
- Determination (1)
- Deutschdidaktik (1)
- Deutschland (DDR) (1)
- Deutschland / Fallpauschalengesetz (1)
- Deutschland <Östliche Länder> (1)
- Development finance (1)
- Devisenbörse (1)
- Diadenosinpolyphosphate (1)
- Diagnose (1)
- Diagnosenschlüssel (1)
- Diagnostik von MLL Translokationen (1)
- Dichte (1)
- Dichtefunktionalformalismus (1)
- Dickdarmkrebs (1)
- Die Ermittlung (1)
- Die Germanomanie (1)
- Die Harzreise (1)
- Die Leiden des jungen Werthers (1)
- Die kluge Bauerntochter (1)
- Dienstverpflichtung (1)
- Dimmeler (1)
- Dipoena torva (1)
- Direktinvestition / Internationale Finanzierung / Kapitalstruktur / Auslandsniederlassung / Steuerbelastung / Deutschland (1)
- Discretion (1)
- Disjunktion <Logik> (1)
- Diskontierungsfaktor (1)
- Diskursanalyse (1)
- Diskursrepräsentationstheorie (1)
- Distribution (1)
- Disziplin <Wissenschaft> (1)
- Disziplinarverfahren (1)
- Dittmar, Louise (1)
- Diversification (1)
- Diébougou (1)
- Dobler, Franz (1)
- Doderer, Heimito von (1)
- Doktor Faustus (1)
- Dokumentarfilm (1)
- Dominanzspektrum (1)
- Domäne <Kristallographie> (1)
- Dosiskonzepte (1)
- Dostoevskij, Fëdor Michajlovič (1)
- Drama, Motiv (1)
- Dramaturgie (1)
- Dreseden (1)
- Dritter (1)
- Drittes Reich (1)
- Drogenszene (1)
- Droste-Hülshoff, Annette von (1)
- Droughts (1)
- Drug Delivery Systeme (1)
- Dual projection (1)
- Duality (1)
- Dumpingsystem (1)
- Dämonie (1)
- E-Learning (1)
- EML (1)
- EU-Staaten (1)
- Ecbasis cuiusdam captivi per tropologiam (1)
- Echinodera (1)
- Economics of information (1)
- Efficient Frontier (1)
- Ehrlich (1)
- Eigenkapital (1)
- Eigenname (1)
- Ein Landarzt (1)
- Einfall (1)
- Einflussnahme (1)
- Einkommensumverteilung (1)
- Einschleppung (1)
- Einstellung (1)
- Einweihung (1)
- Einzelmolekülanalyse (1)
- Eisenzeit (1)
- Ekel <Motiv> (1)
- Elbe (1)
- Elektrische Ladung (1)
- Elektron (1)
- Elektronensprayionisations-Massenspektrometrie (1)
- Elfriede Jelinek (1)
- Ellipse <Linguistik> (1)
- Emblem (1)
- Emblemliteratur (1)
- Emissionskurs (1)
- Enchytraeidae (1)
- Enchytraeidae-Artengemeinschaft (1)
- Endothelium (1)
- Endsteinzeit (1)
- England (1)
- Entrepreneurial Finance (1)
- Entwicklungsfinanzierung (1)
- Enzensberger, Hans Magnus (1)
- Enzym (1)
- Enzyme-linked immunosorbent assay (1)
- Epenthese (1)
- Epistemisch-heuristisches Schreiben (1)
- Equisetaceae (1)
- Equisetum hybrids (1)
- Equisetum palustre var. fallax (1)
- Equisetum xfont-queri (1)
- Erblichkeit (1)
- Erfassung (1)
- Erico-Pinetea (1)
- Erico-Pinetum (1)
- Erinnerung <Motiv> (1)
- Ernst T. A. (1)
- Erwartung (1)
- Erweiterung (1)
- Erwin (1)
- Erythematodes (1)
- Erzähltechnik (1)
- Estado de direito e esfera pública (1)
- Ethenoxidation (1)
- Ethnizität (1)
- Ethnobotanik (1)
- Ethnologe (1)
- Ethnologie / Historische Anthropologie (1)
- Ethnoökologie (1)
- Euphorbia atropurpurea (1)
- Euphorbia balsamifera (1)
- Euro Area (1)
- Europabild (1)
- Europäische Integration (1)
- Europäische Union / Europäisches Parlament (1)
- Europäische Wirtschafts- und Währungsunion (1)
- Evaluation of active labor market policy in East Germany (1)
- Evaluierung (1)
- Event Study (1)
- Ewerbeck, Hermann August (1)
- Exilliteratur (1)
- Existentialismus (1)
- Exotik (1)
- Exotismus (1)
- Expedition Brochure (1)
- Expeditionsbericht (1)
- Extrakorporaler Kreislauf (1)
- Extraktion (1)
- Extraktor (1)
- Extremereignisse (1)
- Eyck, Jan van (1)
- FGF-2 KO (1)
- FT-IR-Spektroskopie (1)
- FTIR-Differenzspektroskopie (1)
- Fagetalia sylvaticae (1)
- Fagus (1)
- Fagus sylvatica (1)
- Faktorsubstitution (1)
- Familie (1)
- Familienanamnese (1)
- Familienname (1)
- Fanon (1)
- Farbenlehre (1)
- Farnsamer (1)
- Fauna (1)
- Fauna-Flora-Habitat-Richtlinie (1)
- Faustdichtung (1)
- Feministin (1)
- Ferdinand (1)
- Fernmeldegeheimnis (1)
- Fernsehfilm (1)
- Festphasenmikroextraktion (1)
- Festschrift (1)
- Festuco-Brometea (1)
- Feuchtestufe (1)
- Fichtenaufforstungen (1)
- Figurengedicht (1)
- Figurenkonstellation (1)
- Fiktion (1)
- Film (1)
- Financial Crises (1)
- Financial Market Linkages (1)
- Finanzanalyse (1)
- Finanzderivat / Hedging / Strategie / Volatilität / Stochastischer Prozess / Theorie (1)
- Finanzierung (1)
- Finanzierungsstruktur (1)
- Finite Verbform (1)
- Finnisch (1)
- Firmenkundengeschäft (1)
- Fiscal Multiplier (1)
- Fischer, Caroline Auguste (1)
- Fischinger (1)
- Flexible Altersgrenze (1)
- Flexur (1)
- Floods (1)
- Flora (1)
- Flowzytometrie (1)
- Fluch (1)
- Fluorwasserstoff (1)
- Flüssigkeitsbeatmung (1)
- Forschung und Entwicklung (1)
- Forschungsprojekt (1)
- Forster, Georg (1)
- Forster, Johann Georg (1)
- Fortschritt (1)
- Fossile Säugetiere (1)
- Foucault, Michel (1)
- Fragment (1)
- Francisco (1)
- Frankfurt / Beaux & Belles Square Dance Club Frankfurt am Main (1)
- Frankfurt / Institut für Anthropologie und Humangenetik (1)
- Frankfurt / Institut für Archäologische Wissenschaften (1)
- Frankfurt / Institut für Kernphysik (1)
- Frankfurt / Institut für Theoretische Physik (1)
- Frankfurt / Otto Hahn Zentrum (1)
- Frankfurt <Main> / Archäologisches Institut (1)
- Frankfurt <Main> / Paul-Ehrlich-Institut (1)
- Frankfurt <Main> / Universität / Fachbereich Erziehungswissenschaften (1)
- Frankfurt <Main> / Universität / Fachbereich Evangelische Theologie (1)
- Frankfurt <Main> / Universität / Fachbereich Humanmedizin (1)
- Frankfurt <Main> / Universität / Fachbereich Wirtschaftswissenschaften (1)
- Frankfurt <Main> / Universität / Stiftungsgastdozentur Poetik (1)
- Frankfurter Universitäts-Zeitung (1)
- Frantz (1)
- Franzobel: Shooting Star (1)
- Französische Revolution (1)
- Französische Schweiz (1)
- Frau <Motiv> (1)
- Frau, Motiv (1)
- Frauen (1)
- Frauenbild (1)
- Freier Relativsatz (1)
- Freilandstudie (1)
- Fremdheit <Motiv> (1)
- Fremdkapital (1)
- Fremdkapital / Kredit / Bank / Finanzierung / Lieferanten-Kunden-Beziehung / Theorie (1)
- French Colonial Army (1)
- Freud, Sigmund (1)
- Friedenssicherung (1)
- Friedrich <Preußen, König, II.> (1)
- Friedrich Gottlieb (1)
- Friedrich Heinrich (1)
- Friedrich II., Preußen, König (1)
- Friedrich Justin (1)
- Friedrich Maximilian von (1)
- Friedrich Wilhelm Joseph von (1)
- Friedrich de La Motte- (1)
- Frühe Neuzeit (1)
- Frühneuhochdeutsch (1)
- Frühsozialismus (1)
- Fulani (1)
- Fulbe (1)
- Fund (1)
- Funds (1)
- Fusion (1)
- Futur (1)
- Fußball (1)
- Förderpreis für Deutsche Wissenschaftler im G. W. Leibniz-Programm (1)
- Führerprinzip (1)
- Füllungswerkstoff (1)
- G207 (1)
- Gabon (1)
- Gabun (1)
- Galio harcynici-Culto-Piceetum (1)
- Galloitalienisch (1)
- Gans, Eduard (1)
- Garscha (1)
- Gaskrieg (1)
- Gastdozent (1)
- Gedankenlyrik (1)
- Gedächtnis (1)
- Gefühl <Motiv> (1)
- Geheimbund (1)
- Gehölzfrüchte (1)
- Geister (1)
- Geistige Behinderung (1)
- Geistliche Literatur (1)
- Gelenkersatz (1)
- Gellerts (1)
- Gemination (1)
- Gene Transfer (1)
- Gene expression (1)
- Generally Accepted Accounting Principles (1)
- Generative Grammatik (1)
- Genexpression (1)
- Genie (1)
- Genregulation (1)
- Genremalerei (1)
- Genus (1)
- Georg (1)
- Georg Christoph (1)
- Geriatrie (1)
- Gerlach (1)
- German (1)
- Germane (1)
- Germanisch (1)
- Germanomanie (1)
- Germanophilie (1)
- Germany (1)
- Germoxane (1)
- Gerz (1)
- Geschichte 1450-1650 (1)
- Geschichte 1500-1850 (1)
- Geschichte 1768-1899 (1)
- Geschichte 1787-1832 (1)
- Geschichte 1800-1989 (1)
- Geschichte 1800-2003 (1)
- Geschichte 1815-1914 (1)
- Geschichte 1918-1933 (1)
- Geschichte 1945-1989 (1)
- Geschichte 1953-1998 (1)
- Geschichte 1954-2004 (1)
- Geschichte 1965-1979 (1)
- Geschichte 1971-2003 (1)
- Geschichte 1975-1997 (1)
- Geschichte 1989-1999 (1)
- Geschichte 1990-1999 (1)
- Geschichte 1990-2004 (1)
- Geschichte 1999-2002 (1)
- Geschichte 2000-2002 (1)
- Geschichte der Frankfurter Studenten (1)
- Geschlecht (1)
- Gesellschaft für Semantik (1)
- Gesetz <Motiv> (1)
- Gespenst (1)
- Gesundheitspolitik (1)
- Gesundheitswesen (1)
- Gewalt (1)
- Gewinn (1)
- Gibbaranea ullrichi (1)
- Gibson, William (1)
- Gibson, William: Johnny Mnemonic (1)
- Girdlestone (1)
- Gisela (1)
- Gleichgewichtstheorie (1)
- Gleitlaut (1)
- Glioblastom (1)
- Global City (1)
- Global change (1)
- Globaler Wandel (1)
- Glottalisierung (1)
- Glückwunsch (1)
- Goethe, Johann Wolgang von (1)
- Goethe-Universität 1933-45 (1)
- Goldschmidt (1)
- Goldschmidt <Familie> (1)
- Gorefilm (1)
- Gottfried August (1)
- Government Spending (1)
- Grabbe (1)
- Gral (1)
- Gram-positive Bakterien ; Linezolid ; Arzneimittelresistenz (1)
- Gram-positive Bakterien ; Moxifloxacin ; Arzneimittelresistenz (1)
- Grammaires d’Arbres Adjoints (1)
- Grammatikalisation (1)
- Grammatikalität (1)
- Grammatiktheorie (1)
- Graubünden ; Spätglazial ; Geomorphogenese ; Grat ; Schutt ; Steinschlag (1)
- Greece (1)
- Grenzüberschreitung (1)
- Griechenland (Altertum) (1)
- Grimm (1)
- Grimmelshausen, Hans Jakob Christoffel von (1)
- Grimmelshausen, Hans Jakob Christoffel von / Continuatio des abentheurlichen Simplicissimi oder der Schluß desselben (1)
- Grimmelshausen, Hans Jakob Christoffel von : Continuatio des abentheurlichen Simplicissimi oder der Schluß desselben (1)
- Grimmelshausen, Hans Jakob Christoffel von : Simplizissimus (1)
- Gross, Hans (Jurist) (1)
- Gross, Otto (Psychologe) (1)
- Großstadt (1)
- Grundwasserverschmutzung (1)
- Gruppendynamik (1)
- Grünbein, Durs (1)
- Gründung (1)
- Guaraní-Sprache (1)
- Gudrun (1)
- Gumbel distribution (1)
- Gumbel-Verteilung (1)
- Gutzkow, Karl (1)
- Gutzkow, Karl: Blasedow und seine Söhne (1)
- Gutzkow, Karl: Die Söhne Pestalozzis (1)
- Gyromagnetic Moment (1)
- Göbel, Angilbert Wunibald (1)
- Gündisch, Karin: Geschichten über Astrid (1)
- Günter (1)
- HCMV (1)
- HEBIS (1)
- HER2/neu (1)
- HES (1)
- HPLC-MS (1)
- HSV-1 (1)
- Habermas (1)
- Habichtskraut (1)
- Hahn (1)
- Halbleitersilicium-Oberflächen (1)
- Hallberg, Emilie Emma von (1)
- Hamburg / Harburger Mahnmal gegen Faschismus (1)
- Handel und Gewerbe (1)
- Handke, Peter (1)
- Handlung (1)
- Hans (1)
- Hans Albrecht (1)
- Hans Georg (1)
- Hartmann, Moritz (1)
- Harz Mountains (1)
- Hauff, Wilhelm (1)
- Hebel, Johann Peter (1)
- Hebräisch (1)
- Hedging / Strategie / Volatilität / Stochastischer Prozess / Theorie (1)
- Hegel, Georg Wilhelm Friedrich (1)
- Heidegger (1)
- Heilige Allianz (1)
- Heilige Familie (1)
- Heine, Heinnrich (1)
- Heinrich <der Teichner> (1)
- Heinrich <von Morungen> (1)
- Heinrich von (1)
- Held (1)
- Herausgeber (1)
- Hermeneutik (1)
- Hernando de (1)
- Herrscher (1)
- Herschaftssystem (1)
- Herzoglich-Sächsisch Privilegiertes Landes-Industrie-Comptoir (1)
- Herztransplantation (1)
- Hesse, Hermann (1)
- Heterogene Katalyse (1)
- Heterogeneit (1)
- Heterogeneity (1)
- Heuristik (1)
- Hiecke, Robert Heinrich (1)
- High pressure (1)
- High-Frequency Data (1)
- Himmel <Motiv> (1)
- Hippocampus (1)
- Hirnforschung (1)
- Hirntumor (1)
- Hirschkäfer (1)
- Historische Grundwissenschaften / Hilfswissenschaften (1)
- Historische Persönlichkeit (1)
- Hitler, Adolf (1)
- Hochschulbau (1)
- Hochschuldidaktik (1)
- Hoffmann's Buchhandlung (1)
- Hoffmann, E. T. A. (1)
- Hoffmann, E. T. A. : Prinzessin Brambilla (1)
- Hofmannsthal (1)
- Hofmannsthal, Christiane von (1)
- Hofmannsthal, Gerty von (1)
- Hofzeremoniell (1)
- Holbein, Hans (1)
- Holbein, Hans / Die Madonna des Basler Bürgermeisters Jacob Meyer zum Hasen (1)
- Holocaust (1)
- Holy alliance (1)
- Hominidae (1)
- Honduras (1)
- Honigmann, Barbara (1)
- Horovitz (1)
- Horrorfilm (1)
- Householder reflection (1)
- Huber, Therese (1)
- Hugo von (1)
- Hydrology (1)
- Hydrolyse (1)
- Hydropower (1)
- Hygienestandards (1)
- Hyperhidrosis axillaris (1)
- Hyperinflation (1)
- Höfische Kultur (1)
- Höfische Kunst (1)
- Hölderlin (1)
- Hölle <Motiv> (1)
- Hüfte (1)
- ICD (1)
- IDT (1)
- IMS Learning Design (1)
- Icarische Gemeinschaft (1)
- Idealisierung (1)
- Ideen - Das Buch Le Grand (1)
- Identifikation (1)
- Identität <Motiv> (1)
- Identitätsfindung <Motiv> (1)
- Imagologie (1)
- Immunhyperthyreose (1)
- Immunomagnetische Antikörper (1)
- Impfstoff (1)
- In der Strafkolonie (1)
- In vitro (1)
- Incomplete markets (1)
- Indeterminacy (1)
- India (1)
- Indianerklub (1)
- Individualität (1)
- Industriegebiet (1)
- Industriegeschichte (1)
- Industrieregion (1)
- Infix (1)
- Informatiker (1)
- Information (1)
- Informationstechnik (1)
- Informationsverhalten (1)
- Informeller Finanzsektor (1)
- Infrarot (1)
- Inhibitoren (1)
- Initial public offerings (1)
- Inkorporation <Linguistik> (1)
- Innere Stimme (1)
- Inspiration (1)
- Insulaner (1)
- Insurance (1)
- InterSystems (1)
- Interbankenabkommen (1)
- Interferenz (1)
- Interjektion (1)
- Interkulturalität (1)
- Intermetallische Phasen (1)
- International Financial Reporting Standards (1)
- Internationale Arbeitsorganisation (1)
- Internationale Arbeitsstandards (1)
- Internationaler Kreditmarkt (1)
- Internationaler Vergleich (1)
- Internet (1)
- Internetliteratur (1)
- Interpersonale Kommunikation (1)
- Interpretierer (1)
- Interview (1)
- Iodine (1)
- Ionenbeschleuniger (1)
- Ionenfokussierung (1)
- Ionenoptik (1)
- Ionenquelle (1)
- Ionenstrahl (1)
- Ionentemperatur (1)
- Ionentransport (1)
- Ionisation (1)
- Irakkrieg (1)
- Irokesen <Motiv> (1)
- Iron Age (1)
- Ironie (1)
- Irregularität (1)
- Irsee <2003> (1)
- Ischämie (1)
- Islam (1)
- Iteration (1)
- Iuvenalis (1)
- Jaan <Volk> (1)
- Jacobi (1)
- Jacobus (1)
- Jahrestagung (1)
- Jakob Michael Reinhold (1)
- Japanese (1)
- Jean (1)
- Jean Paul (1)
- Jelinek, Elfriede (1)
- Jelinek, Elfriede: Irm sagt (1)
- Jelinek, Elfriede: Margit sagt (1)
- Jiddisch (1)
- Job Creation Schemes (1)
- Jochen / Ex (1)
- Johann Gottfried (1)
- Johann Martin (Schriftsteller) (1)
- Johanniskraut (1)
- Johnny Mnemonic (1)
- Josef (1)
- Joyce, James (1)
- Juden (1)
- Juden <Motiv> (1)
- Judenbild (1)
- Judenverfolgung (1)
- Judenvernichtung <Motiv> (1)
- Jugend (1)
- Jugendliteratur (1)
- Jugendverband (1)
- Jugendverein (1)
- Juristin (1)
- Jüdisches Recht (1)
- Jürgen / Theorie des kommunikativen Handelns (1)
- Jürgen Habermas (1)
- KATP-Kanal Blocker (1)
- KCNQ4 (1)
- Kabarett (1)
- Kalium Kanäle (1)
- Kaltwasserkorallenriff (1)
- Kanada (1)
- Kanon (1)
- Kanonische Unterdrückung (1)
- Kapitalflussrechnung (1)
- Kapitalmarkt (1)
- Kapitalstruktur (1)
- Kapuziner (1)
- Kardiologe (1)
- Karneval (1)
- Karsten (1)
- Kassel (1)
- Kassner, Rudolf (1)
- Katalase (1)
- Katalysator (1)
- Katze ; Sehrinde ; Reizverarbeitung (1)
- Kauf (1)
- Kausalanalyse (1)
- Kavitätenpräparation (1)
- Keyserling, Eduard von (1)
- Khoisan (1)
- Kierkegaard, Søren (1)
- Kindersprache (1)
- Kindspech (1)
- Kinästhesie (1)
- Kirchhoff, Bodo (1)
- Kirchhoff, Bodo: Schundroman (1)
- Kirsten, Wulf (1)
- Klassenlektüre (1)
- Klassifikation (1)
- Klassik (1)
- Klaus (1)
- Kleidung (1)
- Klein- und Mittelunternehmen (1)
- Kleist (1)
- Klimastufen (1)
- Klimawandel (1)
- Klinger (1)
- Klopstock (1)
- Koartikulation (1)
- Kochen-Specker theorem (1)
- Kodieralgorithmus (1)
- Kognitive Semantik (1)
- Kohlenstoffisotopie (1)
- Kollision (1)
- Kolonialarmee (1)
- Kolonialgeschichte (1)
- Kolonialismus (1)
- Kolonialismus <Motiv> (1)
- Kolonkarzinom (1)
- Kommunikation (1)
- Kommunikation / Sprache (1)
- Kommunikationsforschung (1)
- Komplexbildnerstabilität (1)
- Komposit (1)
- Komödie (1)
- Konfiguration <Linguistik> (1)
- Kongressbericht (1)
- Kongreß (1)
- Koniferen (1)
- Konsekutivsatz (1)
- Konsonant (1)
- Konstanz (1)
- Kontamination (1)
- Kontext (1)
- Kontrastive Linguistik (1)
- Kontrastive Linguistik , Vergleichende Sprachwissenschaft (1)
- Kontrastive Phonetik (1)
- Kontrollierte klinische Studie (1)
- Konversation (1)
- Kopie (1)
- Korallenbiozönose (1)
- Korean (1)
- Koronarfluss (1)
- Kosmologie (1)
- Kramer (1)
- Kreativität (1)
- Krebsfamiliensyndrom (1)
- Kredit (1)
- Kreditderivat (1)
- Kreditgenossenschaft (1)
- Kreditgeschäft (1)
- Kreditgeschäft / Unternehmenskooperation / Vertrag / Bank / Kreditrisiko / Rentabilität / Theorie (1)
- Kreditmarkt (1)
- Kriegsveteranen (1)
- Kriminalroman (1)
- Krisenmanagement (1)
- Kritik (1)
- Kultivierung (1)
- Kulturelle Entwicklung (1)
- Kulturelle Identität (1)
- Kulturgeschichte und -wissenschaft (1)
- Kulturkritik (1)
- Kulturphilosophie (1)
- Kultursoziologie (1)
- Kulturtheorie (1)
- Kulturverein (1)
- Kunstausstellung (1)
- Kunsterziehung (1)
- Kunstmärchen (1)
- Kunstproduktion (1)
- Kunsttheorie (1)
- Kunstwissenschaft (1)
- Kurzgeschichte (1)
- Körper <Motiv> (1)
- Körperbild (1)
- Körpermodifikation (1)
- Künste (1)
- Künstler <Motiv> (1)
- Künstlergesellschaft "Die Glocke" (1)
- Künstlervereinigung (1)
- Künstliche Intelligenz (1)
- L'ultimo tango a Parigi (1)
- LCMV (1)
- LHC-II (1)
- LLL-reduction (1)
- La Roche (1)
- Labormedizin (1)
- Lachmann, Karl (1)
- Laetoli (1)
- Lambda-Hyperon (1)
- Lanckoroński, Karl (1)
- Landkreis Konstanz (1)
- Langendorff-Herz (1)
- Langer (1)
- Larinioides sclopetarius (1)
- Laser (1)
- Later Stone Age (1)
- Latvia (1)
- Laue (1)
- Law and Finance (1)
- Le tour du monde en quatre-vingts jours (1)
- Lead-lag relationship (1)
- Learning (1)
- Lebensgefühl (1)
- Lebenslanges Lernen (1)
- Lehre (1)
- Lehrerbildung (1)
- Leib-Seele-Problem (1)
- Leiblichkeit (1)
- Leiopus nebulosus (1)
- Leistungsbewertung (1)
- Leistungsmessung (1)
- Leitbegriff (1)
- Lender of Last Resort (1)
- Lender of Last Resort / Finanzmarkt / Wirtschaftspolitische Wirkungsanalyse (1)
- Lennep ; Geschichte ; Quelle (1)
- Lernet-Holenia, Alexander (1)
- Lernverhalten (1)
- Leserforschung (1)
- Letters of resignation (1)
- Lettland (1)
- Letzte Worte (1)
- Leukozytenfiltration (1)
- Lewald, Fanny (1)
- Lewis, Herschell Gordon (1)
- Lexikographie (1)
- Libretto (1)
- Lichtenberg (1)
- Lichtsammelkomplexe (1)
- Lied (1)
- Lieferanten-Kunden-Beziehung (1)
- Lieferung (1)
- Limited Partnership (1)
- Linguist (1)
- Lipidperoxidation (1)
- Liposomen (1)
- Litauisch (1)
- Lite (1)
- Literarische Form (1)
- Literarische Gesellschaft (1)
- Literarische Gestalt (1)
- Literarische Übersetzung (1)
- Literarischer Salon (1)
- Literarisches Zentralblatt für Deutschland (1)
- Literary Studies (1)
- Literaturanalyse (1)
- Literaturgeschichtsschreibung (1)
- Literaturkanon (1)
- Literaturkritik (1)
- Literatursemiotik (1)
- Literatursoziologie (1)
- Lithium (1)
- Local politics (1)
- Logische Form <Linguistik> (1)
- Lohneffekt (1)
- Lokales Bibliothekssystem (1)
- Lokalisationssystem (1)
- Lokalpolitik (1)
- Longo, Robert (1)
- Ludwig, Klaus-Dieter (1)
- Luzulo-Fagetum (1)
- Lymphozytenantigen (1)
- Lymphozytäre Choriomeningitis (1)
- Lynch-Syndrom (1)
- Ländername (1)
- Lügen (1)
- MALDI-TOF-Massenspektrometrie (1)
- MLV (1)
- MRSA (1)
- MTBE (1)
- Macht (1)
- Machtkampf (1)
- Macroeconomic News Announcements (1)
- Madelung (1)
- Magie (1)
- Main Stress (1)
- Makroreste (1)
- Makuyuni (1)
- Malerei (1)
- Manteltiere (1)
- Marcuse (1)
- Market Concentration (1)
- Market Microstructure (1)
- Marlowe, Christopher / Doctor Faustus (1)
- Maron (1)
- Martin (1)
- Maschinelle Übersetzung (1)
- Masochismus <Motiv> (1)
- Massenkultur (1)
- Massenmedien (1)
- Massenspektrometrie (1)
- Master i Margarita (1)
- Materialität (1)
- Materie (1)
- Mauthner, Fritz (1)
- Max (1)
- Max von (1)
- Maxwell–Chern–Simons (1)
- Medialität (1)
- Medienkonsum (1)
- Medienkulturwissenschaft (1)
- Medienkunst (1)
- Medienpädagogik (1)
- Medientechnik (1)
- Medizinische Versorgung (1)
- Mediävistik (1)
- Meersburger Droste-Preis für Dichterinnen (1)
- Meinungsbildung (1)
- Meistersinger (1)
- Mekoniumaspiration (1)
- Melancholie (1)
- Meningeom (1)
- Mensch-Umwelt-System (1)
- Mephisto (1)
- Mergers and Acquisitions (1)
- Meson production (1)
- Messianismus (1)
- Metamorphose (1)
- Metamorphose <Motiv> (1)
- Metaphysik (1)
- Metatonie (1)
- Methicillin-resistant Staphylococcus aureus (1)
- Methicillin-resistenter Staphylococcus aureus (1)
- Metonymie (1)
- Metternich’sches System (1)
- Mexiko (1)
- Meyrink, Gustav (1)
- Meysenbug, Malwida von (1)
- Micaria dives (1)
- Microbubbles (1)
- Migration (1)
- Mikroelektronik-Technologie (1)
- Mikrofinanzierung (1)
- Mikroreaktor (1)
- Mikroökonometrie (1)
- Militär (1)
- Miller (1)
- Milton, John / Paradise lost (1)
- Minder, Robert (1)
- Minimal Residual Disease (MRD) (1)
- Mittelalter (1)
- Mittelenglisch (1)
- Mittelsperson (1)
- MixCon (1)
- MixCon-LA (1)
- Mobile Telekommunikation / Electronic Commerce (1)
- Mockel (1)
- Modalität (1)
- Moderne (1)
- Modernisierung (1)
- Modernismus <Literatur> (1)
- Modified nucleosides (1)
- Modifizierung (1)
- Moganit (1)
- Molekulare Maschinerien (1)
- Molekulare Therapie (1)
- Molekulare Virologie (1)
- Molekül (1)
- Molmassenverteilung (1)
- Monarchie (1)
- Monarchy (1)
- Monetary Policy Instruments of the ECB (1)
- Monika (1)
- Monitoring (1)
- Morbus Basedow (1)
- Morbus Crohn (1)
- Mord (1)
- Moschcowitz-Syndrom (1)
- Motiv (1)
- Mulitvariate Statistik (1)
- Multicomponent Tree Adjoining Grammar (1)
- Multikatalytische Proteasen (1)
- Multinationales Unternehmen (1)
- Multiple Equilibria (1)
- Multiple Spell-Out (1)
- Multiple Treatment (1)
- Multispezies-Testsysteme (1)
- Murine leukemia virus (1)
- Musik / Volkskunde (1)
- Musik <Motiv> (1)
- Musikalische Aufführungspraxis (1)
- Musikerlebnis (1)
- Musikhören (1)
- Musiklehrer (1)
- Musikverarbeitung (1)
- Musikwahrnehmung (1)
- Mycophenolate mofetil (1)
- Mystik (1)
- Mythologie (1)
- Märchen (1)
- Mögliche Welt (1)
- Mörike, Eduard (1)
- Mörike, Eduard : An Longus (1)
- Müller-Alsfeld (1)
- München (1)
- Mündliche Überlieferung (1)
- Mündlichkeit (1)
- Münzgewinn (1)
- N-myc (1)
- NCAM (1)
- NF023 (1)
- NF279 (1)
- NK-Zellen (1)
- NK-cells (1)
- NO (1)
- NS-Hochschulgruppe (1)
- Nanopartikel (1)
- Narcissus radiiflorus-community (1)
- Narrow Focus (1)
- Nash equilibrium (1)
- Nationalismus (1)
- Nationalliteratur (1)
- Nationalsozialismus / Drittes Reich (1)
- Nationalsozialistischer Deutscher Studentenbund (1)
- Nationaltheater (1)
- Natur <Motiv> (1)
- Natura 2000 (1)
- Natura2000 (1)
- Natural born killers (1)
- Naturgeschichte (1)
- Naturschutzgesetz (1)
- Naturstoffanalytik (1)
- Naturwissenschaften (1)
- Nałkowska, Zofia (1)
- Nekrose (1)
- Nelson-Siegel curve (1)
- Neophyten <Botanik> (1)
- Neosexualitäten (1)
- Neozoen (1)
- Nepogomphoides stuhlmanni (1)
- Neue Rheinische Zeitung (1)
- Neugriechisch (1)
- Neuhebräisch (1)
- Neurohypophyse (1)
- Neurowissenschaft (1)
- Neuzeit (1)
- New Keynesian (1)
- New York (1)
- Niederenergetischer Strahltransport (1)
- Niederlande (1)
- Niederländisches Genre (1)
- Nietzsche (1)
- Niob (1)
- Nitric Oxide Synthase (1)
- Nitrid (1)
- Nitritreduktase (Cytochrom) (1)
- Niue-Sprache (1)
- Noam (1)
- Nobelpreisträgerin (1)
- Nomen (1)
- Non-Hodgkin Lymphoma (1)
- Non-Hodgkin-Lymphom (1)
- Noncommutativity (1)
- Nordeuropa (1)
- Normative theory (1)
- Norway spruce (1)
- Novalis : Die Lehrlinge zu Sais (1)
- Nozizeption (1)
- Nucleotide (1)
- Nuklearmedizin (1)
- Nuklid (1)
- Numerale (1)
- Nungisch (1)
- Nährkraftstufe (1)
- Oberes Pliozän (1)
- Oberfläche (1)
- Oberflächengewässer (1)
- Offenheit <Motiv> (1)
- Oligodendrogliom (1)
- Oligodesoxynucleotide (1)
- Olmütz (1)
- Onlinejournalismus (1)
- Open Source (1)
- Operationale Semantik (1)
- Optimal Industrial Policies (1)
- Optimal Monetary Policy (1)
- Optionspreistheorie (1)
- Optionspreistheorie / Hedging / Stochastischer Prozess / Theorie (1)
- Oreocnemis phoenix (1)
- Organische Synthese (1)
- Orient <Motiv> (1)
- Orientalist (1)
- Original (1)
- Ortspezifische Mutagenese (1)
- Oskar ; Malerei ; f Werkverzeichnis (1)
- Osteuropa (1)
- Osttimor (1)
- Otto Hahn (1)
- Otto-Hahn-Preis (1)
- Otto-Peters, Louise (1)
- Oudalan ; Eisenzeit ; Keramik ; Funde ; Chronologie (1)
- Oxidativer Stress (1)
- P-content in topsoil (1)
- PICA <Bibliotheksinformationssystem> (1)
- PLA (1)
- PPADS (1)
- Packing density (1)
- Palatal (1)
- Palaung (1)
- Paläoklimatologie (1)
- Panel (1)
- Panel Analysis of Bidding Behavior (1)
- Panel Data (1)
- Pannonian region (1)
- Pannwitz, Rudolf (1)
- Parallelgesellschaft (1)
- Parametrisierung (1)
- Parasitic gap (1)
- Parietal cortex (1)
- Particle and resonance production (1)
- Partitur (1)
- Paul, Jean / Leben Fibels, des Verfassers der Bienrodischen Fibel (1)
- Pazifischer Ozean (1)
- Peltzer, Ulrich (1)
- Pensions (1)
- Peptides (1)
- Peptidomics (1)
- Performance (1)
- Performanz (1)
- Periphere arterielle Verschlusskrankheit (1)
- Perlhirse (1)
- Personalität (1)
- Personenbezogene Daten (1)
- Perspektive (1)
- Persönlichkeit (1)
- Peters, Jan (1)
- Pflanzen ; Katalase ; Heterologe Genexpression (1)
- Pflanzensoziologie (1)
- Phantastische Literatur (1)
- Pharmakokinethik (1)
- Pharmazie (1)
- Phenprocoumon (1)
- Phospholipide (1)
- Photodynamische Therapie (PDT) (1)
- Photographie (1)
- Photosynthese (1)
- Phrasenstrukturgrammatik (1)
- Phraseologie (1)
- Physiologe (1)
- Phytotherapie (1)
- Piaroa ; Völkerkunde ; Tanzmaske ; Kommerzialisierung ; Kultmaske ; Heiliger Gegenstand (1)
- Pichia pastoris (1)
- Piercing (1)
- Pinus sylvestris (1)
- Planning Processes (1)
- Planungsprozesse (1)
- Pluralismus (1)
- Plättchen-Leukozyten-Aggregate (1)
- Poe, Edgar Allan (1)
- Poelzig-Bau, Frankfurt am Main (1)
- Poesie (1)
- Poetic meter (1)
- Polemik (1)
- Polen (1)
- Polenbild (1)
- Political system (1)
- Politikgeschichte (1)
- Politische Kultur (1)
- Politisches Engagement <Motiv> (1)
- Politisches System (1)
- Politisches Verhalten (1)
- Politisierung (1)
- Popmusik (1)
- Porin (1)
- Portfolio (1)
- Portfoliomanagement (1)
- Portugal (1)
- Postulat (1)
- Prag (1)
- Prag <Motiv> (1)
- Predigt (1)
- Preis <Auszeichnung> (1)
- Preisstarrheit (1)
- Preseniline (1)
- Preußisch (1)
- Principal Agent (1)
- Privatautonomie (1)
- Privater Verbrauch (1)
- Produktion von pentaquark (1)
- Profession (1)
- Professor (1)
- Prognosemarkt (1)
- Prognoseverfahren (1)
- Proliferation (1)
- Proprialisierungsgrad (1)
- Proprialitätsmarkierung (1)
- Prosodic Phrasing (1)
- Prostatakrankheit (1)
- Prostatakrebs (1)
- Protease activity (1)
- Protein kinase (1)
- Protein purify derivative (1)
- Protein-Tyrosin-Kinase (1)
- Proteindegradation (1)
- Proteine (1)
- Proteinelektrochemie (1)
- Proteolyse (1)
- Proteomanalyse (1)
- Proteomics (1)
- Protonentransfer (1)
- Protsch von Zieten (1)
- Prädikation (1)
- Präkonditionierung (1)
- Psychologie (1)
- Pteridophyta (1)
- Public Private Partnership (1)
- Public-Private Partnership (1)
- Publizitätspflicht (1)
- Pädagogik (1)
- Q cycle (1)
- QCD (1)
- QGP (1)
- Qiang-Sprache (1)
- Qo site (1)
- Quanteninformation (1)
- Quantor (1)
- Quantum Zeno Effect (1)
- Quantum Zeno dynamics (1)
- Quark Gluon Plasma (1)
- Quark gluon plasma (1)
- Quarz <alpha-> (1)
- Quercetalia pubescentis petraeae (1)
- Quercion roboris (1)
- Querco-Fagetea (1)
- Quercus (1)
- R&D (1)
- RDF (1)
- RNA editing (1)
- RNA interference (1)
- RNS-Edierung (1)
- Radiojodtherapie (1)
- Ramsey planner (1)
- Range-based estimation (1)
- Rapid Thermal Processing (1)
- Rapoport effect (1)
- Ratingagentur (1)
- Rational Expectations (1)
- Rationalität (1)
- Raveaux, Franz (1)
- Reaction Function (1)
- Reaktionsfunktion (1)
- Reaktionskinetik (1)
- Rechtsvergleich <Fach> (1)
- Rede (1)
- Reduktion (1)
- Reduplikation (1)
- Reform (1)
- Regional- und Landesgeschichte (1)
- Regionalforschung (1)
- Regression / Schätztheorie / Theorie (1)
- Reiner (1)
- Reinheit (1)
- Reinigung (1)
- Reiseliteratur (1)
- Rektor (1)
- Religion (1)
- Repression <Genetik> (1)
- Reproduktion (1)
- Reputation (1)
- Resultativ (1)
- Retirement and Retirement Policies (1)
- Return (1)
- Return Risk (1)
- Revision (1)
- Rezensent <Motiv> (1)
- Rezession (1)
- Rezidivprophylaxe (1)
- Rheinland-Pfalz (1)
- Rhythm (1)
- Richard (1)
- Riga (1)
- Risikoprämie (1)
- Risk (1)
- Robert (1)
- Rokoko (1)
- Rolf Dieter (1)
- Romanisierung (1)
- Romanist (1)
- Romanistik (1)
- Romanzero (1)
- Romulus <Druckschrift> (1)
- Ronge, Bertha (1)
- Ropohl (1)
- Rose <Motiv> (1)
- Rosenkranz, Moses (1)
- Rudolf (1)
- Rule-of-Thumb Consumers (1)
- Rumäniendeutsche (1)
- Russische SFSR (1)
- Russland (1)
- Rätsel (1)
- Röntgenkristallographie (1)
- Rückenmark (1)
- Rütten, Raimund (1)
- SAGE (1)
- SB9 (1)
- SIRS (1)
- SLLL-reduction (1)
- SNARE (1)
- SYNtax-based Reference Annotation (1)
- Saarbrücken / Zweitausendeinhundertsechsundvierzig Steine - Mahnmal gegen Rassismus (1)
- Sade, Marquis de (1)
- Sadismus <Motiv> (1)
- Sakralisierung (1)
- Salinas (1)
- Salpingus planirostris (1)
- Sansibar (1)
- Saphir (1)
- Satzadverb (1)
- Satzsemantik (1)
- Satztyp (1)
- Schattenwirtschaft (1)
- Schelling (1)
- Schichten (1)
- Schimpfwort (1)
- Schindler's list (1)
- Schlagwort <Parole> (1)
- Schlegel, August Wilhelm von (1)
- Schleier (1)
- Schleimpilze (1)
- Schmidt, Kathrin (1)
- Schmitt, Carl <Jurist> / Theorie des Partisanen (1)
- Schnaase, Carl (1)
- Schnee (1)
- Schopenhauer (1)
- Schreibdidaktik (1)
- Schreiben <Motiv> (1)
- Schreiben nach Auschwitz (1)
- Schreibverhalten (1)
- Schrift <Motiv> (1)
- Schule (1)
- Schulze, Ingo (1)
- Schwäbischen Alb (1)
- Schätztheorie (1)
- Schönheit (1)
- Science-Fiction (1)
- Scorsese, Martin (1)
- Scots pine (1)
- Scrambling (1)
- Seamounts (1)
- Seele (1)
- Seelenklau (1)
- Seesediment (1)
- Segalen, Victor (1)
- Seiberg–Witten map (1)
- Sein (1)
- Sekundärmetabolite (1)
- Selbstbeteiligung (1)
- Selbstdarstellung (1)
- Selbstkompartimentierung (1)
- Selbstreflexion (1)
- Selbstverortung (1)
- Selbständigkeit (1)
- Selektivität (1)
- Self-dual (1)
- Self-regulation (1)
- Semantic Web (1)
- Service (1)
- Sexualmedizin (1)
- Sexuelle Revolution (1)
- Shoah (1)
- Short story (1)
- Show (1)
- Sicherheitspolitik (1)
- Siddhartha (1)
- Siegmund Heinrich (Verleger) (1)
- Signaturenlehre (1)
- Silber (1)
- Silicium (1)
- Silicium-Reinigungschemie (1)
- Sinfonie (1)
- Singspiel (1)
- Sinn und Bedeutung (1)
- Sinnkonstitution (1)
- Sinotibetische Sprachen (1)
- Sisymbrion (1)
- Skripturale Kunst (1)
- Slawische Sprachen (1)
- Slawist (1)
- Social Security and Public Pensions (1)
- Sodium (1)
- Soil Evaluation (1)
- Soil Protection (1)
- Solling (1)
- Sonant (1)
- Sophie von (1)
- Sotalol (1)
- Southwest Europe (1)
- Soziale Integration (1)
- Sozialismus (1)
- Sozialkompetenz (1)
- Sozialpolitik (1)
- Sozialraum (1)
- Sozialverhalten (1)
- Soziolekt (1)
- Sparkasse (1)
- Spears, Britney (1)
- Speicherung (1)
- Spezifität (1)
- Spiel, Hilde (1)
- Spieltisch (1)
- Spinoza (1)
- Splenic dendritic cell (1)
- Sport (1)
- Sprache (1)
- Sprachgemeinschaft (1)
- Sprachgeschichte (1)
- Sprachinsel (1)
- Sprachlogik (1)
- Sprachphilosophie (1)
- Sprachspiel (1)
- Sprachsynthese (1)
- Sprachtheorie (1)
- Sprachverfall (1)
- Sprachwissenschaft (1)
- Sprechakttheorie (1)
- Sprichwort (1)
- Spunda, Franz (1)
- Spurtheorie (1)
- Spätaufklärung (1)
- Square dance (1)
- Staat (1)
- Stabilität (1)
- Stadt- und Metropolengeschichte (1)
- Stagnation (1)
- Stammzelltransplantation (1)
- Standortseigenschaften (1)
- Star trek (1)
- Stefanie (1)
- Sterben (1)
- Stern (1)
- Stern der Ungeborenen <Werk> (1)
- Stochastic jumps (1)
- Stochastic volatility (1)
- Stochastik (1)
- Stochastischer Prozess (1)
- Stonesches Spektrum (1)
- Strahlextraktion (1)
- Strauss (1)
- Stress Assignment (1)
- Stricker, Der / Der Pfaffe Amis (1)
- Strukturelle Grammatik (1)
- Strukturwandel der Sexualität (1)
- Studentenbewegung (1)
- Studentenhaus (1)
- Studiengang (1)
- Stückkosten (1)
- Subjekt <Philosophie> (1)
- Subjektivität (1)
- Subsaharisches Afrika (1)
- Substitutionselastizität (1)
- Substratstufe (1)
- Sufismus (1)
- Suhrkamp (1)
- Suhrkamp-Verlag (1)
- Superkomplex (1)
- Superoxiddismutase (1)
- Supersilyl (1)
- Suramin (1)
- Surfactantlavage (1)
- Survey Data (1)
- Swahili <Volk> (1)
- Swap (1)
- Symbolik (1)
- Synaptische Vesikelproteine (1)
- Synaptisches Protein (1)
- Syndication (1)
- Synthesis of oligodeoxynucleotides (1)
- System of Objectives (1)
- Systemgrößenabhängigkeit (1)
- Systemischer Erythematodes (1)
- Szymborska, Wislawa (1)
- T-Zell-Depletion (1)
- T-cell-depletion (1)
- TCP/IP (1)
- TEP (1)
- THR (1)
- Taarab (1)
- Tacrolimus (1)
- Taiwan-Austronesisch (1)
- Taiwanesisch (1)
- Taphonomie (1)
- Tattoo (1)
- Taylor Rules (1)
- Teaser (1)
- Technische Aktienanalyse (1)
- Technischer Fortschritt (1)
- Technologie <Motiv> (1)
- Telekommunikationsüberwachung (1)
- Teleologie (1)
- Temperatur (1)
- Teoria Crítica (1)
- Teoria normativa (1)
- Termersetzungssystem (1)
- Testkonstruktion (1)
- Tetanustoxin (1)
- Textphilologie (1)
- Textproduktion (1)
- The age of innocence (1)
- The darkened room (1)
- Theater, Motiv (1)
- Theatergeschichte (1)
- Theaterstück (1)
- Theodor W. ; Sprachtheorie (1)
- Theologe (1)
- Theoretische Physik (1)
- Theorie der Sexualität (1)
- Theridion conigerum (1)
- Thermowaage (1)
- Thomas Bernhard (1)
- Thrombin (1)
- Thrombose (1)
- Thrombotic thrombocytopenic purpura (1)
- Tiefenpsychologie (1)
- Tiermodell (1)
- Tierökologie (1)
- Tilio-Acerion (1)
- Tillus elongatus (1)
- Tilomann (1)
- Time-Consistency (1)
- Tod (1)
- Tokio (Motiv) (1)
- Tongaisch (1)
- Tonhöhe (1)
- Totalreflexions-Röntgenfluoreszenz-Spektrometrie (1)
- Tourismus (1)
- Tradition (1)
- Traditionale Kultur (1)
- Traditionalismus (1)
- Trakl, Georg (1)
- Traktat (1)
- Transdisziplinarität (1)
- Transnationalisierung (1)
- Transplantatabstoßung (1)
- Traum (1)
- Traum <Motiv> (1)
- Treibhausgase (1)
- Trinkwasser (1)
- Trittbrettfahrerverhalten (1)
- Trocholepczy (1)
- Tropus (1)
- Trotter's product formula (1)
- Tschechisch (1)
- Tubastrin (1)
- Tukangbesi (1)
- Tumor-Nekrose-Faktor <alpha> (1)
- Turkey (1)
- Twombly, Cy (1)
- Typ-In-Algebra (1)
- Türken (1)
- Ubihydrochinon-Cytochrom-c-Reductase (1)
- Ulme (1)
- Ulrich / Alle oder keiner (1)
- Ulrich / Bryant Park (1)
- Ultrasound (1)
- Umfrage (1)
- Umweltgeschichte (1)
- Umweltrecht (1)
- Umweltwahrnehmung (1)
- Uniform(ität) (1)
- United States (1)
- Unter dem Namen Norma (1)
- Unternehmenskooperation (1)
- Ut pictura poesis (1)
- Utopie <Sciencefiction> (1)
- VA-mycorrhiza (1)
- Valence (1)
- Valenz <Linguistik> (1)
- Validation (1)
- Vater (1)
- Vedisch (1)
- Venetisch (1)
- Venezuela (1)
- Venöse Thrombose (1)
- Verallgemeinerte Zeitreihenanalyse (1)
- Verantwortung der Wissenschaftler (1)
- Verbandsorganisation (1)
- Verbindungsdaten (1)
- Verbreitung (1)
- Verdrängung (1)
- Verein (1)
- Vereinigte Staaten (1)
- Vergangenheitsbewältigung (1)
- Vergleich (1)
- Vergleichende Rechtsgeschichte (1)
- Verhalten <Motiv> (1)
- Verhaltenscodices multinationaler Unternehmen (1)
- Verkehrsdaten (1)
- Verlagsgemeinschaft Ernst Klett, J.-G.-Cotta'sche Buchhandlung Nachfolger (1)
- Verlagsprogramm (1)
- Verleugnung <Motiv> (1)
- Verne, Jules (1)
- Versicherungsbetriebslehre (1)
- Vertikale Transmission (1)
- Verzeichnis (1)
- Vesper, Bernward / Die Reise (1)
- Vibrio succinogenes (1)
- Video (1)
- Videoclip (1)
- Virologie (1)
- Virtuelle Börse (1)
- Virtuelle Hochschule (1)
- Visuelle Poesie (1)
- Vokal (1)
- Volatilität / Risikoprämie / Statistischer Test / Optionspreistheorie / Stochastischer Prozess / Theorie (1)
- Von Willebrand Faktor (1)
- Von Willebrand factor (1)
- Vorhofflimmern (1)
- Vorlesung (1)
- Vorratsdatenspeicherung (1)
- Vorratsspeicherung (1)
- Vorsorgender Bodenschutz (1)
- Völkerwanderung (1)
- W*-dynamical system (1)
- Wagner, Richard (1)
- Wald-Lebensräumen (1)
- Waldbodenvegetation (1)
- Waldschäden (1)
- Walter (1)
- Walther (1)
- Warzen (1)
- Wasser <Motiv> (1)
- Wasserqualität (1)
- Wasserstoffbrückenbindung (1)
- Wasservögel (1)
- Water resources (1)
- Water stress (1)
- Weber, Carl Maria von (1)
- Websprache (1)
- Weerth, Georg (1)
- Weibull distribution (1)
- Weibull-Verteilung (1)
- Weimarer Klassik (1)
- Weisgerber, Leo (1)
- Weiss, Peter (1)
- Weltbild (1)
- Werdandibund (1)
- Werfel, Franz (1)
- Werner (1)
- Wertanalyse / Shareholder Value / Erfolgsrechnung / Ökonomischer Anreiz / Betriebliche Kennzahl / Theorie / performance measurement (1)
- Wertpapieranalyse (1)
- Wertpapierbörse (1)
- Wertpapieremission (1)
- Wertpapierhandel (1)
- Wettervorhersage (1)
- Weyer, Johann (1)
- Widerstandsgruppe (1)
- Widmung (1)
- Wiederfund (1)
- Wiederkauf (1)
- Wiener, Oswald (1)
- Wilhelm (1)
- Wilhelm Meisters Wanderjahre (1)
- Winckelmann, Johann Joachim (1)
- Winner’s Curse (1)
- Wirklichkeit (1)
- Wirtschaftsentwicklung (1)
- Wirtschaftspolitik (1)
- Wissenschaftler (1)
- Wissenschaftliche Literatur (1)
- Wissenschaftsgeschichte (1)
- Wissenschaftspolitik (1)
- Wissensvermittlung (1)
- Wolf, Christa (1)
- Wolfhagen, Friederike (1)
- Wolfram <von Eschenbach> / Parzival (1)
- Word Order (1)
- Wortart (1)
- Wortbildung (1)
- Württemberg (1)
- X-Ray Structure Analysis (1)
- X-Y model (1)
- X-ray crystal structure determination (1)
- Xhosa (1)
- Zeichen (1)
- Zeidler, Hans (Botaniker) (1915-2003) (1)
- Zeit (1)
- Zeitbewusstsein <Motiv> (1)
- Zeitgeschichte <Motiv> (1)
- Zeitreihe (1)
- Zeitroman (1)
- Zeitung (1)
- Zellularer Automat (1)
- Zentrale Sensibilisierung (1)
- Zentralnervensystem (1)
- Zenz (1)
- Zersetzungsreaktion (1)
- Zerstörung (1)
- Ziegler (1)
- Zielsystem des vorsorgenden Bodenschutzes (1)
- Zinsertragskurve (1)
- Zinspolitik (1)
- Zitz, Kathinka (1)
- Zucht (1)
- Zwangsvorstellung ; Gedanke ; Wiederholung ; Alltag (1)
- Zweierbeziehung (1)
- Zweiter Weltkrieg (1)
- Zwilling <Kristallographie> (1)
- Zürich <1998> (1)
- Zürich <2002> (1)
- abandonment (1)
- absence of arbitrage (1)
- acceptability (1)
- accrual accounting (1)
- acenocoumarol (1)
- acidophytic oak forests (1)
- adenine (1)
- adhäsive Restauration (1)
- adoptive immunotherapy (1)
- adverbial quantification (1)
- aging (1)
- alder-ash forest (1)
- alkaloids (1)
- allemand (1)
- alliance (1)
- also (1)
- ambulant care (1)
- amphibians (1)
- analytische Philosophie (1)
- animal (1)
- anthropological culture concept (1)
- anti-Zeno effect (1)
- antibaryon (1)
- antibody Fv fragment (1)
- antikaon (1)
- antiparticles (1)
- antiphospholipid syndrome (1)
- antiproliferative activity (1)
- apoptosis (1)
- approamixture models (1)
- archaeobotany (1)
- area (1)
- area survey (1)
- argatroban (1)
- arthroplasty (1)
- aspirin (1)
- asset pricing (1)
- asthma (1)
- asymmetric information (1)
- atom (1)
- atomic volume (1)
- auditory system (1)
- automation (1)
- azooxanthellate (1)
- azooxanthellaten (1)
- backpacking (1)
- bank capital (1)
- bank competition (1)
- bank mergers (1)
- baryon (1)
- base pairing (1)
- bc1-Komplex (1)
- beech forest (1)
- benthic (1)
- binaryfission (1)
- binding force (1)
- biochemical pathways (1)
- biological invasion (1)
- biological pump (1)
- biologische Pumpe (1)
- birch-oak forest (1)
- borates (1)
- box-cox transformation (1)
- breeding (1)
- brouillage d’arguments (1)
- cGMP (1)
- calcareous/siliceous communities (1)
- canonical suppression (1)
- carcinoma (1)
- career concerns (1)
- centrosome (1)
- characteristic species (1)
- charm (1)
- check list (1)
- chemical bonding (1)
- chiral (1)
- chiral phase (1)
- cisplatin (1)
- cleavage of DNS (1)
- cochlea (1)
- cohlear implant (1)
- cold-water coral reefs (1)
- collective flow (1)
- collision (1)
- colon (1)
- colonial (1)
- commitment (1)
- compact Riemann surfaces (1)
- complementarity (1)
- complexing agent stability (1)
- conditional difference-in-differences (1)
- constelação (1)
- constellation (1)
- cooperation (1)
- coral environment (1)
- corporate finance (1)
- correlation (1)
- coréen (1)
- coupled differential equations (1)
- covariance (1)
- covert variables (1)
- credit rationing (1)
- cultivation (1)
- cultural and social transformation of sexuality (1)
- cultural globalization (1)
- cyanides (1)
- cyclic succession (1)
- cyclicity (1)
- de-territorialisation (1)
- death <motive> (1)
- deciduous forest (1)
- deciduous forests (1)
- deciduous hardwood forest (1)
- decomposition reaction (1)
- definition of unemployment (1)
- degenerate semigroup (1)
- dementia (1)
- density perturbations (1)
- descendens (1)
- deutsch-amerikanische Perspektive (1)
- dft (1)
- dialectics (1)
- dialética (1)
- differential equations (1)
- differentiating species (1)
- direct thrombininhibitor (1)
- direkter Thrombinhemmer (1)
- discourse structure (1)
- discrete trading (1)
- diversity (1)
- diversity gradient (1)
- diversity of names (1)
- dna (1)
- domain restriction (1)
- domains (1)
- drinking water (1)
- drug-drug interaction (1)
- dry forest (1)
- dry grasslands (1)
- dual labour market (1)
- duration analysis (1)
- eBay (1)
- economics of organization (1)
- electric and acustic stymulation (1)
- electron (1)
- electronic database (1)
- elm-ash forest (1)
- emancipation (1)
- emancipação (1)
- employment dynamics (1)
- endemic (1)
- enlightenment (1)
- environmental perception (1)
- epiphytic lichens (1)
- equity betas (1)
- error bounds (1)
- esclarecimento (1)
- ethnobotany (1)
- ethnoecology (1)
- ethnographic research (1)
- eutrophication (1)
- exotic plants (1)
- extremes (1)
- factor model (1)
- factor shares (1)
- false scorpions (1)
- familiäre Tumorhäufung (1)
- fascism (1)
- fascismo (1)
- financial derivatives (1)
- financial distress (1)
- financial risk und project risk (1)
- financial structure (1)
- first record (1)
- fixed-term contract (1)
- flexure (1)
- floating point errors (1)
- floodplain meadows (1)
- focus intonation (1)
- focus movement (1)
- foreign direct investment (1)
- forest nature reserves (1)
- forestry (1)
- fragmentation (1)
- free-riding problem (1)
- freedom (1)
- functional traits (1)
- gender (1)
- genealogy (1)
- generalized time series decomposition (1)
- genetic algorithm (1)
- german (1)
- girdlestone (1)
- globalisation (1)
- globalisation tourism (1)
- globalisation winners (1)
- globality (1)
- gradience grammar (1)
- grammaticality (1)
- grasshopper communities (1)
- grassland (1)
- grid maps (1)
- groundwater (1)
- guinea pig (1)
- gyromagnetic moment (1)
- hadron (1)
- hadronic (1)
- hadronic matter (1)
- hadronization (1)
- haemodynamic (1)
- head and neck neoplasms (1)
- heavy Hagedorn states (1)
- heavy ion (1)
- hedging (1)
- hedging error (1)
- hedonic (1)
- helix (snails) (1)
- herpetofauna (1)
- hierarchical mean-field limit (1)
- high pressure (1)
- hip (1)
- homes for the eldery (1)
- human papilloma virus (HPV) (1)
- human rhabdomyosarcoma (1)
- humanes Papillomvirus (HPV) (1)
- hydro-thermal circulation (1)
- hydrothermale Zirkulation (1)
- hygiene management (1)
- hyperhidosis axillaris (1)
- icam-1 (1)
- identification (1)
- identity production (1)
- immunology (1)
- immunomagnetic antibodies (1)
- imperfect competition (1)
- incentives (1)
- incomplete markets (1)
- index construction (1)
- individual-bank lending (1)
- inflation (1)
- information production (1)
- institution building (1)
- insurance (1)
- integro-differential equation (1)
- intense field (1)
- internal ratings based approach (1)
- intra-arterial chemotherapy (1)
- ionization (1)
- iterative estimator (1)
- jewish law (1)
- kaon (1)
- kollektive strom (1)
- kulturelle Vielfalt (1)
- land snails (1)
- land use (1)
- land use intensity (1)
- laser (1)
- length defect (1)
- liberdade (1)
- life forms (1)
- light harvesting complexes (1)
- limes norrlandicus (1)
- literature (1)
- local LLLreduction (1)
- long memory (1)
- long wh-movement (1)
- lupus anticoagulant (1)
- macroecology (1)
- macroremains (1)
- market micros (1)
- market microstructure (1)
- market prices of risk (1)
- mass spectrometry (1)
- masse (1)
- measurement (1)
- meconium aspiration (1)
- membrane protein (1)
- mice (1)
- microeconometrics (1)
- migration (1)
- minimal length (1)
- minimale Länge (1)
- minimum description length (1)
- mixed deciduous forest with lime (1)
- mixture models (1)
- mobility (1)
- model mis-specification (1)
- model misspecification (1)
- model parameter adaption (1)
- modernity (1)
- modified oligodeoxynucleotides (1)
- modular automorphism group (1)
- molar mass distribution (1)
- molecule (1)
- monetary policy rules (1)
- monitoring (1)
- mosses (1)
- multicluster fission (1)
- multilevel branching (1)
- multiple-bank lending (1)
- muon (1)
- native Peptide (1)
- negative Ionen (1)
- negative Wasserstoffionen (1)
- neoadjuvant treatment (1)
- neosexual revolution (1)
- neosexualities (1)
- networks (1)
- nitrogen dioxide (1)
- nomenclature (1)
- nominal rigidities (1)
- nonlinear optimal policy (1)
- nonparametric matching (1)
- normalized CES function (1)
- novel (1)
- nuclear (1)
- nuclear cold fission (1)
- nucleic acids (1)
- nucleon (1)
- nutrient budget scale (1)
- observable Funktion (1)
- onlinejournalism (1)
- open source software (1)
- operative Therapie (1)
- operator algebra (1)
- operator movement (1)
- oral cancer (1)
- order (1)
- ordination (1)
- ordre des mots (1)
- overfitting (1)
- oxidative (1)
- oxidative phosphorylation (1)
- p-selectin (1)
- p73 (1)
- packing density (1)
- parallel society (1)
- parameter estimation (1)
- parasocial (1)
- partial liquid ventilation (1)
- pearl millet (1)
- perfluorcarbone lavage (1)
- performance measurement (1)
- phase (1)
- phenology (1)
- phenprocoumon (1)
- phonology (1)
- photodynamic therapy (PDT) (1)
- photooxidativer Stress (1)
- photosynthesis (1)
- phytosociology (1)
- pine forests (1)
- policies (1)
- politische Debatte (1)
- política (1)
- popular music (1)
- postrelational database (1)
- postrelationale Datenbank (1)
- prediction (1)
- prediction market (1)
- production of pentaquark (1)
- proximities (1)
- public-private-policy-mix (1)
- purchase (1)
- quadratic variation and covariation (1)
- quantificational variability (1)
- quantum spin systems (1)
- quark (1)
- quark gluon plasma (1)
- quartz (1)
- question formation (1)
- rat (1)
- rational expectations (1)
- reaction-diffusion systems (1)
- real estate investments (1)
- realized volatility (1)
- reptiles (1)
- rescattering (1)
- residual income (1)
- return to equilibrium (1)
- ribonucleotide reductase (1)
- risk factors for MRSA colonisation (1)
- risk management (1)
- risk-based capital (1)
- risk-taking (1)
- rna (1)
- robust hedging (1)
- saddle point shapes (1)
- schwere Hagedorn Zustände (1)
- scrambling (1)
- seasonality (1)
- segments (1)
- seigniorage (1)
- semantic web (1)
- semantics annual meeting (1)
- semi-dry grassland (1)
- sequentiell (1)
- sexual revolution (1)
- siRNA (1)
- signalling (1)
- silicon cleaning chemistry (1)
- simulation (1)
- site conditions (1)
- site types (1)
- snow (1)
- social capital (1)
- soil properties (1)
- species decline (1)
- species diversity (1)
- species groups (1)
- species list (1)
- species richness (1)
- spectroscopy (1)
- stabile kalte Kerne (1)
- stability of equilibria (1)
- stable cold nuclear matter (1)
- statistical model (1)
- statistical modelling (1)
- stem cell transplantation (1)
- stepping stones (1)
- sticky prices (1)
- stochastic interest rates (1)
- stochastic jumps (1)
- stochastic volatility (1)
- storage (1)
- stress patterns (1)
- strong transience (1)
- structural habitat types (1)
- studentisches Leben (1)
- subgroup growth (1)
- subsaharan Africa (1)
- succession (1)
- sulfur dioxide (1)
- summer flooding (1)
- superhedging (1)
- supply-side system (1)
- surface water (1)
- surfactant lavage (1)
- surgical therapy (1)
- synchorology (1)
- syntaxonomical classification (1)
- system (1)
- system size dependence (1)
- systematic stability (1)
- taxation (1)
- teaser (1)
- technological change (1)
- temperature (1)
- term structure (1)
- tetrahydroisoquinoline (1)
- the rule of law and the public sphere (1)
- theory of sexuality (1)
- tobacco smoke (1)
- tolerance (1)
- tombolombo (1)
- tones (1)
- topicalization (1)
- tourism (1)
- tractable hedging (1)
- traditional magagement (1)
- trans-nationalisation (1)
- transnational networks (1)
- transversum (1)
- tree crops (1)
- trkB (1)
- true ternary fission (1)
- tumor dissemination (1)
- underpricing (1)
- unemployment insurance (1)
- urban ecology (1)
- uridine (1)
- value based management (1)
- vegetation dynamics (1)
- vegetation geography (1)
- vegetation monitoring (1)
- vegetation survey (1)
- vegetation synopsis (1)
- venture capital (1)
- venture capital and bank financing (1)
- veterans (1)
- virology (1)
- virtual stock market (1)
- volatility (1)
- volume-visualization (1)
- von Neumann algebras (1)
- von Neumann-Algebra (1)
- warts (1)
- wassergefiltertes Infrarot A (wIRA) (1)
- waterfiltered infrared A (wIRA) (1)
- westdeutsche Männer (1)
- wh-question (1)
- wh-scope (1)
- when-issued trading (1)
- winner’s curse (1)
- wooded meadow (1)
- word order (1)
- word order variation (1)
- yield curve (1)
- youths (1)
- zero interest rate bound (1)
- zero-interest-rate bound (1)
- zoogeography (1)
- Ätzen (1)
- Öffentliche Ausgaben (1)
- Öffentlichkeit (1)
- Ökolgie (1)
- Ökonometrie (1)
- Ökotopgruppe (1)
- Österreich (1)
- Übergangsverwaltung der Vereinten Nationen für Osttimor (1)
- Übungsfirma (1)
- “Return Home” Syndrome ; Jihad (1)
Institute
- Medizin (143)
- Physik (107)
- Extern (89)
- Biochemie und Chemie (69)
- Wirtschaftswissenschaften (57)
- Rechtswissenschaft (51)
- Biowissenschaften (38)
- Erziehungswissenschaften (31)
- Universitätsbibliothek (31)
- Center for Financial Studies (CFS) (30)
In der präoperativen Diagnostik fokaler maligner Leberläsionen nimmt die MRT mit Resovist® einen zunehmend höheren Stellenwert ein.
T2 gewichtete TSE- und FS-Sequenzen der Resovist® unterstützten MRT sind dabei sensitiver als die in der präoperativen Diagnostik etablierte CTAP mit Ultravist® 370, einem nichtionischen jodhaltigen Kontrastmittel.
Die visuelle Differenzierung und Charakterisierung fokaler maligner Leberläsionen und deren Abgrenzung vom Leberparenchym in der Resovist® unterstützten MRT kann durch die Analyse der Signalintensitätskurven optimiert werden. Eine effektivere Charakterisierung der fokalen Leberläsionen wirkt sich damit positiv auf die Sensitivität und Spezifität der SPIO verstärkten MRT aus.
Es bleibt daher offen, die Signalintensitäten der primären und sekundären Leberläsionen der hier nicht untersuchten Gewebearten in weiteren Studien zu analysieren.
Desweiteren könnten nachfolgende Untersuchungen das Ziel haben, die Sensitivität und Spezifität der Resovist® unterstützten MRT durch eine Verminderung der Schichtdicke zu verbessern, womit sich die Detektion von Läsionen < 1 cm effektiver gestalten würde.
Partial melting of crustal and mantle rocks under pressure from impedance spectroscopy measurements
(2004)
The purpose of this work is to achieve a better understanding of the physical properties of rocks during partial melting processes. The electrical conductivity of some crustal and upper mantle rocks was measured prior and above the melting under pressure. The variations of the electrical conductivity were compared with the distribution of melt in partially molten rock samples. The electrical conductivity was estimated from the impedance spectroscopy at temperatures between 800 and 1450˚C and at pressures between 0.3 and 2 GPa. These measurements were performed in a piston cylinder apparatus. At temperatures above the melting, samples were equilibrated during a long time and subsequently quenched. Thin sections were prepared and topology, volume fraction and chemical composition of melt was analyzed by using a microprobe. Above the solidus temperature, the electrical conductivity increases for about 1 to 2 orders of magnitude in comparison with non-melted rocks. The "melt effect" seems to reflect the formation of an interconnected network of melt. When a complete melt connectivity is established, the charge transport follows the network of the formed melt films at grain boundaries. Usually, it takes a long time in order to reach a steady state of the electrical resistance in partially molten rocks. Only when a steady state of the electrical resistance is achieved, the bulk conductivity of a sample can be measured properly. The time-independent electrical conductivity were found only after 200 h of annealing time at a desired temperature.
Usually, the measurements of a dihedral angle on grain-liquid interfaces in rocks show that the wetting of grain faces start to develop at temperatures slightly above the solidus temperature. The development of these faces should lead to a continuous melt network even at small melt fractions of few wt.%. This result is not confirmed by our electrical conductivity measurements. The complete interconnection of the melt phase, which was mark by an increase of the electrical conductivity, corresponds to a temperature significantly above the solidus temperature, for at least 30-50˚C. The development of these faces stimulate a significant increase of the electrical conductivity, and corresponds to the occurence of at least 5 wt.% of a melt fraction. This result could be explained by deviations from the textural equilibrium of a melt phase topology in partially molten samples due to heterogeneous grain size distribution, misorientation of grains and anisotropy of the superficial energy of adjacent grain boundaries.
Some mixing models that allow to calculate the electrical conductivity of a composite as a function of a melt fraction were examined and the results of these calculations are discussed.
The experimental results were compared to the conductivity data obtained from magnetotelluric and electromagnetic measurements in the Northern part of mid-Atlantic ridge where a series of magma chambers are presumably located. There is a good agreement between our conductivity values for a melt fraction of 10-13 the conductivity estimated in the Reykjanes ridge zone.
Die künstliche elektrische Stimulation bietet oftmals die einzige Möglichkeit, nicht vorhandene bzw. verloren gegangene motorische sowie sensorische Aktivitäten in gewissem Umfang wieder herzustellen. Im Falle von tauben Patienten wird zur Erlangung von Hörempfindungen die elektrische Stimulation des peripheren auditorischen Systems mit Hilfe von Cochlea- oder Hirnstammimplantaten standardmäßig eingesetzt. Es ist dabei notwendig, natürliche neuronale Entladungsmuster durch die elektrisch evozierten Entladungsmuster nachzubilden. Bei einkanaligen Systemen kann nur die Zeitstruktur des Signals dargeboten werden. Mehrkanalige Systeme bieten hier noch zusätzlich die Möglichkeit auch örtlich selektiv bestimmte Nervenfasergruppen zu stimulieren und damit die Ortsstruktur in den Entladungsmustern zu repräsentieren. So hat es sich gezeigt, dass die Sprachverständlichkeit durch Verwendung von Mehrkanal-Elektroden verbessert werden kann. Grundvoraussetzung hierfür ist die Optimierung der Kanalseparation durch Kleinst-Vielkanalelektroden und der Wahl einer optimalen Codierstrategie des Signals.
Die Codierstrategie ist abhängig von dem jeweiligen spezifischen Einsatzbereich. So gaben z.B. schon Clopton und Spelman (1995) zu bedenken, dass die als selektiv berechnete tripolare (S3) Konfiguration nur für einen bestimmten Stimulationsstrombereich gültig ist. Hinzu kommt es bei simultaner Verwendung benachbarter Kanäle zu schmerzhaften Lautheitssummationen. Ursache hierfür sind einerseits die Überlagerung der durch die Elektroden stimulierten neuronalen Bereiche und andererseits die Wechselwirkungen von Strömen benachbarter Elektrodenkanäle. Diese Effekte führen nicht nur zu einer Verringerung der räumlichen Stimulationsauflösung, sondern auch zu einer Einschränkung der exakten Abbildung der Zeitstruktur innerhalb der einzelnen Stimulationskanäle.
Die Techniken und Grundlagen der elektrischen Stimulation von neuronalem Gewebe mit Kleinst-Vielkanalelektroden sind bisher kaum untersucht worden. Ziel dieser Arbeit war es, ein mathematisches Modell zu implementieren und Qualitätsparameter zu definieren, mit deren Hilfe die Verteilung des elektrischen Feldes und die daraus resultierende neuronale Erregung beschrieben und optimiert werden kann. Zur Verifizierung des Modells sollten Methoden und Techniken entwickelt werden, die eine hochauflösende Abtastung der elektrischen Felder und Messung der neuronalen Daten innerhalb eines Messsystems ermöglichen.
Bei der neuronalen Stimulation mit Kleinst-Vielkanalelektroden ergibt sich eine Reihe von Problemen grundsätzlicher Art. So werden bei elektrodenferner Stimulation größere Stimulationsströme benötigt als bei elektrodennaher Stimulation, wobei für den Strombedarf die Stimulationskonfiguration eine entscheidende Rolle spielt: Der S1 Stimulationsmodus benötigt weniger Strom zur Erreichung großer Stimulationstiefen als der S2 Stimulationsmodus. Der größte Strom wird mit zunehmendem Elektrodenabstand gleichermaßen von dem S3 und S7 Stimulationsmodus benötigt. Gleichzeitig verfügen Kleinst-Vielkanalelektroden bauartbedingt aber nur über kleine Elektrodenkontaktoberflächen und lassen daher auf Grund der kritischen Feldstärke nur geringe Stimulationsströme zu.
Ein weiteres Problem besteht bei diesen Kleinst-Elektrodendimensionen in der konkreten Lage der Neurone an denen eine neuronale Erregung evoziert wird. Die Dimension der Kleinst-Vielkanalelektroden liegt bei einem Elektrodenkanalkontaktdurchmesser von 70 µm bereits in der Größenordnung der zu stimulierenden Neurone mit einem Durchmesser von 10 bis 15 µm. Dies macht sich bei den Messungen besonders dann deutlich bemerkbar, wenn nicht der Stimulationsstrom die Größe des überschwelligen Bereichs modelliert, sondern wenn der Elektrodenkanalabstand durch die Wahl der entsprechenden Elektrodenkanäle verändert wird. Hier weisen zwar die meisten neuronalen Antworten noch in die sich aus dem Modell ergebende Richtung, jedoch kommt es zu einer höheren Streuung der Ergebnisse als bei Messungen mit der Folienelektrode, die eine Kontaktfläche von 170 µm besitzt.
Es gibt also eine Reihe von begrenzenden Faktoren bei der optimalen Dimensionierung der Stimulationselektrode, die sowohl abhängig von der physiologischen Topologie ist als auch von den eingesetzten Stimulationskonfigurationen. Es ist also zur Stimulation die Wahl der optimalen Codierstrategie und die richtige Dimensionierung der Stimulationselektrode sowie der Elektrodenkanalabstände von entscheidender Bedeutung.
Die neuronalen Messungen wurden erstmalig für diese Fragestellung am Hirnschnitt durchgeführt, da sie, im Gegensatz zu in-vivo Versuchen, eine exakte Positionierung der Elektroden auf dem Hirnschnitt unter Sichtkontrolle durch das Mikroskop erlauben. Es wurden aus den neuronalen Messungen die Amplituden und Latenzen der exzitatorischen postsynaptischen Potenziale (EPSP) sowie der Feldpotenziale ausgewertet.
Der Versuchsaufbau macht es möglich, die Potenzialfelder mit genau den Konfigurationen abzutasten, mit denen auch die neuronalen Messungen des Hirnschnittes durchgeführt wurden. Das implementierte Programm zur Berechnung der Feldverteilung besitzt zum Messprogramm ein Interface, so dass es möglich ist, die Einstellungen des Experimentes, wie Stimulationskonfigurationen, Abtastraster des Feldes und die Koordinaten des Messraums, in der Modellrechnung zu verwenden. Somit ist ein direktes Vergleichen zwischen Messung und Berechnung möglich. In nachfolgenden Arbeiten können die vorliegenden Ergebnisse als Grundlage für in-vivo Versuche eingesetzt werden.
Zur Durchführung der Messungen wurden sehr kleine Elektroden aus eigener Herstellung verwendet und es wurden uns freundlicherweise neu entwickelte Folienelektroden des Fraunhofer Instituts St. Ingbert zur Verfügung gestellt. Die Größe der verwendeten Kleinst-Vielkanalelektroden aus eigener Herstellung lag um ca. eine Zehnerpotenz unter den aktuell eingesetzten Elektrodentypen und ist speziell für den direkten Kontakt zwischen Elektrode und Gewebe konzipiert. Dies entspricht dem typischen Einsatzbereich von Hirnstammimplantaten. Dies ist auch notwendig, um eine maximale räumliche Separation der erzeugten Felder zu ermöglichen. Außerdem erlaubte das Elektrodendesign auf Grund der hohen Anzahl der Elektrodenkanäle und durch variieren der Konfigurationen die Feldrichtung zu bestimmen, ohne die Elektrode neu auf den Hirnschnitt aufsetzen zu müssen.
Der in dieser Arbeit implementierte Algorithmus zur Berechnung der Feldverteilungen und die eingeführten Qualitätsparameter erlauben, die unterschiedlichen Stimulationskonfigurationen miteinander zu vergleichen und zu optimieren. Die Ergebnisse aus diesen Modellrechnungen wurden sowohl mit den Messungen der elektrischen Felder als auch mit den Ergebnissen aus den neuronalen Antworten verglichen.
Der im Rahmen dieser Arbeit erstellte Versuchsaufbau bestand aus einer über mehrere Mikromanipulatoren getriebene mikrometergenaue Positioniereinrichtung. Es konnten sowohl die Stimulationselektrode als auch die Elektrode zur Aufzeichnung der neuronalen Daten gesteuert werden. Die Steuerung des gesamten Setup, d.h. die Positionierung, die Aufzeichnung der neuronalen Daten und die Generierung der Stimulationsmuster wurde über den zentralen Messrechner durch ein hierfür entwickeltes Computerprogramm gesteuert. Die Versuche wurden über ein inverses Mikroskop durch eine CCD-Kamera aufgezeichnet.
Der entscheidende Vorteil des in dieser Arbeit gewählten Modellansatzes besteht in der grundsätzlichen Beschreibung der Feldverteilung bei vielkanaliger Stimulation, so dass diese auch auf andere Elektrodenformen bzw. Konfigurationen und Dimensionen übertragbar ist. Es lassen sich so den verschiedenen Konfigurationen nach bestimmten Qualitätskriterien bewerten und an die jeweilige Zielrichtung der Stimulation anpassen. Die berechneten Felder konnten erfolgreich in der Messeinrichtung generiert und nachgemessen werden. Außerdem ist es gelungen, differenzierte neuronale Aktivitäten auszuwerten, welche die Aussagen des Modells abstützen.
Die bisher bekannten Cranialfragmente umfassen chronologisch den Zeithorizont der Eisenzeit (Hallstatt- und Latènezeit), die im nördlichen Mittelrheingebiet als stark regional geprägte Hunsrück – Eifel – Kultur bezeichnet wird. Absolutchronologisch datieren die perforierten Fragmente in die Zeit vom 8./ 7. Jh. v. Chr. bis in das 1 Jh. v. Chr.
Mit den Cranialfragmenten im Untersuchungsgebiet lässt sich ein eisenzeitlicher Schädelkult fassen, der bisher, durch die besondere Fundüberlieferung, nur auf die Region des nördlichen Mittelrheingebietes beschränkt scheint. Eine Häufung der Funde um das keltische Hengeheiligtum „Goloring“ im Landkreis Mayen – Koblenz als Zentrum der östlichen Hunsrück – Eifel – Kultur ist dabei klar erkennbar.
Sämtliche bisher bekannten Stücke stammen aus Siedlungsgruben eisenzeitlicher Gehöfte. Nach dem archäologischen Befund wurden die Stücke nach ihrer Verwendung im Sohlenbereich der Gruben deponiert.
Die bei den archäologischen Untersuchungen entdeckten Fragmente bestehen aus Einzelsegmenten oder größeren Teilen des menschlichen Schädels. Nach dem Befund wurden ausschließlich nur alte, schon skelettierte Schädel verwendet, die bereits längere Zeit im Sediment lagen und möglicherweise regulären Bestattungen entnommen wurden.
Sämtliche Stücke weisen als besondere Eigenart dieser Fundgruppe eine Lochung zur Aufhängung und Befestigung auf. Nach dem Befund konnte eine Aufhängung mit Riemen sowie eine Befestigung mit Eisendorn festgestellt werden. Weiterhin sind die Stücke sekundär modifiziert und manipuliert und lassen Schliff- und Schnittspuren, sowie Polituren erkennen. Die Schnittspuren wie auch die Lochungen wurden wahrscheinlich mit Steinwerkzeugen eingebracht. Die Schliffspuren finden sich besonders an den Rändern und Bruchkanten und lassen eine eindeutige sekundäre, postmortale Behandlung erkennen. Oft zeigen die Ränder zudem Schlagspuren einer groben Zurichtung.
Typologisch lässt sich eine Entwicklung fassen, die in der späten Urnenfelderzeit (Ha B) mit echten Trepanationsscheiben ihren Anfang hat. In der frühen Eisenzeit (Laufelder Gruppe im Mittelrheingebiet; Ha C) entstehen in Anlehnung an die Trepanationsscheiben gelochte und modifizierte Knochenscheiben bzw. Rondelle, die schon aus bereits skelettierten Schädeln entnommen wurden. In der älteren Hunsrück – Eifel – Kultur (Hallstattzeit; Ha D) wurden in der Regel größere Schädelteile und Segmente des Craniums perforiert und modifiziert. Während der darauf folgenden jüngeren Hunsrück – Eifel – Kultur (Latènezeit; Lt A/B) finden Schädelcalotten, halbe Schädel sowie größere Teile mit Os frontale oder Occipitale Verwendung. Aus der Mittellatènezeit (Lt C) liegt ein vollständiges Viscerocranium mit Lochung vor. In der späten Eisenzeit (Spätlatènezeit; Lt D) werden dann vollständige Schädel gelocht und modifiziert. Anhand der Typologie ist eine Entwicklung von medizinischen Schaustücken (Trepanationsscheiben) mit Amulettcharakter zu einem ausgeprägten Ahnen – bzw. Reliquienkult zu beobachten. Mit der frühen Hallstattzeit (Laufelder Gruppe; Ha C) wird ausschließlich schon skelettiertes Knochenmaterial verwendet.
Die anthropologische Untersuchung der auswertbaren Cranialfragmente ergab nach den Merkmalen am Schädel tendenziell mehr männliche Individuen. Das biologische Lebensalter lag nach den auswertbaren Charakteristika hauptsächlich in den Altersstufen adult bis matur und in Einzelfällen darüber. Es handelt sich um eine Altersgruppe, die in den regulären Nekropolen deutlich unterrepräsentiert ist, aber bei den Cranialfragmenten in den Siedlungen die Masse der Funde darstellt. Juvenile Individuen fehlen im Fundbestand bisher vollständig. Nach anthropologischen Kriterien handelt es sich bei fast allen Stücken um Langschädel mit dolichokranen Merkmalen.
Nach den Ergebnissen lässt sich der prähistorische Schädelkult an Mittelrhein und Mosel als ein ausgeprägter Ahnenkult charakterisieren. Die perforierten Cranialfragmente machen im Gegensatz zu anderen Regionen eine eigene Entwicklung bis zur Zeitenwende durch. Vereinzelte Parallelen zu den Funden im Mittelrheingebiet sind aus dem gesamten Verbreitungsgebiet der eisenzeitlich – keltischen Latènekultur bekannt. Zudem geben die antiken Autoren ebenfalls Hinweise auf eine solche Kultausprägung. Die Behandlung der Schädel in der Eisenzeit lässt auch rezente, ethnographische Parallelen zu den Inselkulturen Ozeaniens und Südostasiens erkennen.
Die verzierten Metallschalen des 1. Jts.v.Chr. stehen bereits seit der Mitte des 19. Jhs. im Interesse von Wissenschaft und Forschung. Ausgelöst wurde dieses Interesse durch die Auffindung der Nimrud-Schalen durch Layard 1849. In ihrem 1888 erschienenen zweibändigen Werk über griechische Kunst nahmen Dumon und Champlin einige der Schalen aus Nimrud auf. Sie unterteilten die Schalen mittels ikonographischer Merkmale in drei Gruppen (1. ägyptisch, 2. assyrisch und 3. einen Sonderstil).
Gegen Ende des 19. Jhs. verlagert sich das Interesse der Forscher immer mehr auf die zyprischen Schalen. 1893 erscheint eine Abhandlung von Brunn über die auf Zypern gefundenen Schalen, von denen er annimmt, daß sie von griechischen Handwerkern mit Sitz (Werkstatt) auf Zypern hergestellt worden sind. In den darauffolgenden Jahren werden weitere Arbeiten von Hogarth (1909), Poulsen (1912), Conteneau (1931), Gjerstad (1946) und vielen anderen mehr verfaßt, die jedoch alle davon ausgehen, daß die zyprischen Schalen sowohl in zyprischen als auch in phönizischen Werkstätten hergestellt worden sind.
1974 erscheinen die Untersuchungsergebnisse Barnett’s, der die im British Museum gelagerten Nimrud-Schalen katalogisierte und untersuchte. Barnett unterteilte die Schalen in fünf Gruppen, wobei diesmal nicht nur ikonographische Merkmale im Zentrum der Arbeit standen, sondern auch kompositorische Kriterien mit berücksichtigt wurden. Neben den bereits bekannten zyprischen und phönizischen Werkstätten nimmt er weitere Produktionsstätten für Metallschalen im Iran und den aramäisch geführten Staaten an. Neuere Monographien über die verzierten Metallschalen stammen von Imai (1977) und Markoe (1985). Imai hebt besonders die „internationale“ Beeinflussung der Schalendekore hervor, indem er auf die minoisch-mykenischen, ägyptischen, phönizischen u. a. Einflüsse hinweist. Markoe hingegen behandelt in seiner Arbeit hauptsächlich die Schalen aus Griechenland (sowie Kreta und Zypern) und Italien, wobei er die Parallelen zwischen den zyprischen und italischen sowie den griechischen und den iranischen Schalen betont.
Alles in Allem können wir festhalten, daß die bisherigen Untersuchungen, mit Ausnahme derer von Barnett, aus der Sicht von klassischen Archäologen abgefaßt worden sind, deren Interesse vor allem den Schalen aus Griechenland und Italien galt. Die Schalen aus Nimrud und dem Iran hingegen werden häufig vernachlässigt bzw. nur einzelne Stücke werden als Vergleiche herangezogen.
Gerade die ikonographische Betrachtung des Schalendekors läßt altorientalische (assyrische, syrische, phönizische, aramäische) und ägyptische Einflüsse erkennen, die eine Untersuchung des Materials von altorientalischer Seite her als notwendig erscheinen lassen. Ziel einer solchen Arbeit sollte zum einen sein, mögliche Herstellungszentren (-regionen) zu erkennen und zum anderen, kulturelle Kontakte zwischen den unterschiedlichen Regionen festzustellen.
Die Untersuchungen der vorliegenden Arbeit stützen sich auf 141 verzierte Metallschalen, die aus regulären Grabungen aus Italien, Griechenland, Zypern, Kreta, Nimrud und Iran, sowie aus dem Kunsthandel stammen. Um einen Überblick über das zu bearbeitende Material zu bekommen, soll der Katalog am Beginn der Publikation stehen. In dem Katalog wurden alle wichtigen Daten aufgenommen. Neben den technischen und gestalterischen Merkmalen werden auch alle bisher erschienenen Publikationen aufgeführt, die sich mit den jeweiligen Schalen befassen, so daß der Leser einen Eindruck von dem bisherigen Forschungsstand bekommt, der als Grundlage für den weiteren Verlauf der Arbeit angesehen werden muß. Der Katalog weist eine geographische Sortierung auf, die sich ausschließlich an den Auffindungsorten der Schalen orientiert und die ursprüngliche regionale Herkunft des Handwerkers bzw. der Werkstatt nicht berücksichtigt.
Im Anschluß an den Katalog findet sich dann eine wissenschaftsgeschichtliche Zusammenfassung der bisher erschienenen Monographien über die verzierten Metallschalen und im Anschluß erfolgt dann eine neue Sortierung des Materials anhand motivischer und stilistischer Merkmale, die Hinweise auf die Herstellungsregion bzw. die Herkunft des Handwerkers gibt.
Des weiteren war es möglich, innerhalb dieser Herstellungsregionen einzelne Werkstättenvoneinander zu isolieren.
Das westphälische Modell für Staatsinstitutionen, einschließlich nationaler Exekutive, Legislative und Judikative, hat sich aus den Ereignissen europäischer Geschichte heraus entwickelt. Seit dem Ende des Kalten Krieges dient es als grundlegendes Paradigma für Internationale Interventionen zum Wiederaufbau von gescheiterten - oder zum Aufbau von neuen - Staaten. Für die internationale Gemeinschaft fungiert das westphälische Modell als Maß zur Beurteilung ihrer Interventionen, wie zum Beispiel in Somalia, Kambodscha oder den Balkanstaaten. In den meisten Fällen gilt eine durch sie beaufsichtigte oder gar durchgeführte ‚freie und faire’ Wahl als hauptsächliche Massnahme zur Bildung eines ‚westphälischen’ und demokratischen Staates. Die Erfolgsrate solcher internationalen Friedenseinsätze und ‚state-building operations’ ist jedoch enttäuschend. Bei näherer Betrachtung der Misserfolge des letzten Jahrzehnts wird deutlich, daß sich die lokalen Gesellschaftssysteme der betroffenen Bevölkerungen oft beträchtlich von liberaler Demokratie unterscheiden. Dies ist insbesondere der Fall in Gesellschaften deren Ordnung nicht auf Staatsinstiutionen basiert. Ihnen liegen sozio-politische Systeme zugrunde die sich oft mit dem Paradigma des westlichen Staatssystems nur schwer vereinen lassen. Um im Rahmen internationaler Friedenseinsätze erfolgreich Staatstrukturen zu etablieren, ist es daher notwendig lokale Sozialstrukturen und lokale Konzepte politischer Legitimität und Autorität zu addressieren. Erst mit solchem Verständnis ist es möglich einen Staatsapparat in den Augen der Bevölkerung zu legitimieren. Ist Letzteres nicht der Fall, so kann sich eine Regierung zwar in Übereinstimmung mit internationalen Menschenrechten befinden, oder alle wichtigen demokratischen Einrichtungen vorweisen, jedoch dennoch dem Prinzip der Partizipation durch die Bevölkerung widersprechen. Ist dies das Endresultat eines internationalen Friedenseinsatzes, so hat die internationale Gemeinschaft ihre eigenen Werte bestaetigt. Jedoch herrscht kein Vertrauen zwischen der Bevölkerung und Regierung, da letztere nicht kompatibel mit dem Versaendnis der Bürger ist. Der ‚demokratische’ Staat ist nur schwerlich funktionsfähig.Der internationale Einsatz in Osttimor illustriert dieses Problem. Hier wurden die Vereinten Nationen (VN) mit dem Wiederaufbau und der Verwaltung eines Staates betraut (UNTAET ‚Übergangsregierung der Vereinten Nationen in Osttimor’). Zum ersten mal in der Geschichte übernahm die international Gemeinschaft damit die Souveränität über ein territoriales Gebiet...
Ferroelektrische Strontium-Wismut-Tantalat- (SBT) Filme werden in der Mikroelektronik als nicht-flüchtige Speichermedien verwendet und weiterentwickelt. Informationen werden durch Polarisation des Materials gespeichert und bleiben ohne weiteren Energieaufwand über einen Zeitraum von Jahren in solchen Speichern erhalten – sogenannten FeRAMs (Ferroelectric Random Access Memories). Darüber hinaus können gespeicherte Daten innerhalb von wenigen Nanosekunden wieder ausgelesen werden. Zusammengefasst ist eine Langzeitspeicherung kombiniert mit niedrigem Energieverbrauch und schneller Informationsverarbeitung durch den Einzug ferroelektrischer Materialien in die Computertechnologie möglich geworden.
Da die fortschreitende Miniaturisierung in der Mikroelektronik von zentraler Bedeutung ist, sind zur Charakterisierung der verwendeten Materialien Untersuchungsmethoden mit hoher Ortsauflösung unverzichtbar. Das Rasterkraftmikroskop – engl. Atomic Force Microscope (AFM) – ist eine solche Technik, mit der im Submikrometerbereich die Topographie sowie physikalische Eigenschaften von Materialien abgebildet werden können. Die vorliegende Arbeit widmet sich der Untersuchung von SBT-Filmen mit solchen AFM-Methoden.
Besonders die Rauhigkeit der einzelnen Filme in schichtartig aufgebauten Mikrochips ist bei der Herstellung von Halbleiterbauelementen von großer Bedeutung, wobei möglichst glatte Filme favorisiert werden. Deshalb wurden zunächst verschiedene SBT-Filme auf ihre topographischen Merkmale hin charakterisiert. Die Rauhigkeiten von SBT Filmen verschiedener Herstellungsverfahren wie der Metal Organic Decomposition (MOD) und der Metal Organic Chemical Vapour Deposition (MOCVD) wurden gegenübergestellt. Außerdem ist der Einfluss der SBT-Schichtdicke sowie der des Ferro-Anneals untersucht worden – Ferro-Anneal ist ein Temperungs-Schritt während der Filmherstellung, der zur Bildung der ferroelektrischen Aurivillius-Phase durchgeführt werden muss. Zudem wurde das unterschiedliche Kurzschlussverhalten zweier SBT-Filme in Zusammenhang mit ihren verschiedenen RMS-Rauhigkeitsdaten gebracht.
Der größte Teil der Arbeit setzt sich mit einer Methode auseinander, mit der die Polarisationseigenschaften von ferroelektrischen SBT-Filmen charakterisiert werden sollen – dem AFM/EFM-Polarisationsexperiment – engl. Electrostatic Force Microscope (EFM). Die SBT-Filme werden dabei mit einer AFM-Spitze polarisiert und in einem zweiten Schritt die daraus resultierenden elektrostatischen Felder mit einem EFM über der Probe abgebildet. Es wurde dabei kritisch hinterfragt, in wieweit diese Methode als Beurteilungskriterium der Materialeigenschaften herangezogen werden kann. Zudem wurden Aufladungsphänomene bei dieser Versuchsführung dokumentiert.
Außerdem wurde das Leckstromverhalten von SBT-Filmen auf der Submikrometerskala mit einer relativ neuen Messmethode, dem conducting-AFM (C-AFM), untersucht.
Die Ergebnisse aller Untersuchungen sind im folgenden stichpunktartig dargestellt.
Topographieuntersuchungen:
• Die RMS-Rauhigkeit von MOD/SBT-Filmen ist größer als die der MOCVD/SBTFilme. Mit steigender Prozesstemperatur des Ferro-Anneals wird die Oberflächenrauhigkeit von SBT-Filmen erhöht.
• SBT-Filme, die mit niedrigen Prozesstemperaturen hergestellt wurden, hier als Niedrigtemperatur-Filme bezeichnet, erfahren mit zunehmender Schichtdicke eine Glättung. Sie ist auf die Einbettung der Kristallite in die verhältnismäßig glatte FluoritPhase zurückzuführen, die wegen der geringen Temperaturen während des FerroAnneal-Prozesses noch nicht vollständig in die rauere ferroelektrische AurivilliusPhase umgesetzt wurde.
• Die unterschiedliche Zusammensetzung der Filme SrxBi2.2Ta2O8,3+x mit X1 = 0.9 und X2 = 1,0, im Text als Sr0,9-Film und Sr1,0-Film bezeichnet, führte zu höheren Kurzschlussraten des Sr0,9-Films in fertiggestellten FeRAM-Kondensatoren. Die Ursache kann auf die höhere Oberflächenrauhigkeit des Sr0,9-Films zurückgeführt werden. EFM-Untersuchungen:
• Bei der Polarisation ferroelektrischer SBT-Filme mit einer elektrisch gepolten AFMSpitze werden Ladungen in undefinierbarer Anzahl auf die Oberflächen gebracht. Diese Ladungen sind mehr oder weniger auf den Oberflächen beweglich. Mit zunehmender Polarisierbarkeit des ferroelektrischen Films wird die Ladung stärker am Polarisationsort durch elektrostatische Anziehung zwischen den orientierten Dipolen und der Oberflächenladung fixiert.
In dieser Arbeit konnte gezeigt werden, daß die Proteinkinase Akt das
Zellzyklusprotein p21 in Endothelzellen an der Aminosäure Threonin 145
phosphoryliert und auf diese Weise p21 posttranskriptionell reguliert. So führt die Aktabhängige Phosphorylierung zur Aufhebung der PCNA-Bindungsfähigkeit und zu einer Abnahme der Komplexbildung von p21 mit Cdk2 und Cdk4. Dementsprechend reduziert die Akt-Phosphorylierung von p21 an Threonin 145 die Hemmung der Cdk2-Aktivierung durch p21, begünstigt damit die Phosphorylierung von Retinoblastoma-Protein und die Freisetzung des Transkriptionsfaktors E2F. Diese Daten weisen auf einen neuen Signaltransduktionsweg hin, über den Akt die Endothelzellproliferation reguliert.
Außerdem führt die Akt-vermittelte Phosphorylierung von p21 an T145 zur Stabilisierung von p21 gegenüber Caspase-abhängiger Degradation während der pro-apoptotischen Stimulation der Endothelzellen und schützt die Zellen gegenüber der Apoptose-Induktion durch TNFα. Die p21-Phosphorylierung durch Akt stellt dabei einen essentiellen Mechanismus der endothelzellprotektiven Wirkung von Akt dar, denn in Abwesenheit von p21 infolge Antisense-Transfektion vermag die Überexpression von Akt nicht mehr zu einer Senkung der endothelialen Apoptoserate nach TNFα -Stimulation führen.
Der retinoid-related orphan receptor α (RORα) ist ein nukleärer Rezeptor, der nach Bindung an sein Responselement die Transkription zahlreicher Gene reguliert. Pharmazeutisches Interesse erlangt der Rezeptor vor allem durch seine Verwicklung in pathophysiologische Prozesse wie Osteoporose und Arteriosklerose sowie durch seine antiinflammatorische Wirkung, die auf der negativen Interferenz mit dem NF-κB-Signalweg beruht. Bisher konnten vier RORα-Isoformen isoliert werden, die durch alternatives Spleißen sowie durch die Regulation über unterschiedliche Promotorregionen entstehen. In verschiedenen Studien konnte eine isoformspezifische Regulation als Antwort auf pathophysiologische Veränderungen der Zellen festgestellt werden, wie beispielsweise die Induktion der RORα4-Transkription in Leberzellen infolge einer Sauerstoffunterversorgung. Um Einblicke in die Mechanismen zu gewinnen, die der spezifischen Regulation der RORα4-Expression zugrunde liegen, wurde in der vorliegenden Arbeit der RORα4-Promotor als erster Promotor einer RORα-Isoform identifiziert und analysiert.
Sechs Fragmente mit einer Länge von bis zu 5,1 kbp der aus Datenbanken entnommenen, putativen Promotorsequenz wurden in einen Reportergenvektor kloniert. Transiente Transfektionsexperimente und Reportergenanalysen deckten die Promotoraktivität der gewählten Sequenz auf.
In dem durch einen hohen Gehalt an den Nukleotiden G und C auffallenden Promotor wurden drei einzelne GC-Boxen (A, B und C) sowie eine Viererkette (Box D) und eine Tandem-GCBox (Box E) als mögliche Bindungsmotive für Sp-Transkriptionsfaktoren gefunden. Mithilfe von Kotransfektionen konnte eine Induktion der Promotoraktivität durch die Transkriptionsfaktoren Sp1 und Sp4 nachgewiesen werden, während Sp3 die Promotoraktivität in diesen Experimenten nicht beeinflusste.
Durch die gezielte Mutation oder Deletion, bzw. die Inkubation mit verschiedenen Substanzen konnten diesen GC-Boxen unterschiedliche Funktionen zugeordnet werden. Durch transiente Transfektionen stark verkürzter Promotorfragmente wurde ein für die Promotoraktivität nötiger Sequenzbereich von 170 Basenpaaren eingegrenzt. In Mutationsanalysen wurde demonstriert, dass die beiden proximalen GC-Boxen A und B für die basale Promotoraktivität essentiell sind.
Die RORα4-Promotoraktivität ließ sich zelltypabhängig durch den Phorbolester TPA induzieren. In Deletionsanalysen ließ sich dieser Effekt teilweise auf die GC-Boxen C und D zurückführen. Der distalen GC-Box E konnte ebenfalls eine Funktion zugeordnet werden. In Reportergenanalysen konnte demonstriert werden, dass sie die Induktion der Promotoraktivität durch den HDAC-Inhibitor Trichostatin A vermittelt.
Durch die Untersuchungen an den TK-luc-Konstrukten mit RORα-Responselementen konnte gezeigt werden, dass der virale Promotor aufgrund der einklonierten RORα-Responselemente sehr stark auf die Kotransfektion der RORα-Isoformen reagiert. Die Reportergenanalyse mit diesen Konstrukten stellt daher eine effiziente Methode dar, um die RORα-vermittelte Transaktivierung zu bestimmen.
Obwohl der RORα4-Promotor zahlreiche RORα-Responselemente trägt, konnte in den Kotransfektionen mit Expressionsplasmiden für die einzelnen Isoformen in keiner der drei Zelllinien eine Autoregulation gefunden werden. Ebensowenig zeigte sich ein Einfluss des putativen RORα-Liganden Melatonin auf die Promotoraktivität.
Des Weiteren wurde gezeigt, dass die RORα4-Promotoraktivität in HeLa und MCF-7-Zellen durch das cAMP-Analogon DbcAMP induzierbar ist, während in HEK 293 keine Beeinflussung der Promotoraktivität erzielt wurde. Neben der Steigerung der Promotoraktivität durch TPA, konnte mit der DbcAMP-Induktion folglich ein zweiter, zelltypabhängiger Effekt auf die RORα4-Promotoraktivität identifiziert werden.
Das positions-spezifisch integrierende TRE5-A Retrotransposon besitzt zwei Promotorregionen (A- und C-Modul). Für das C-Modul konnte ein spezifisch bindendes Protein (CbfA) gefunden werden, das vermutlich über die Expression des Minusstrang-Transkripts regulativ in den Transpositionsmechanismus eingreift. Gleichzeitig stellt CbfA in D. discoideum einen kritischen Faktor dar, der sowohl auf das Wachstum als auch auf die Differenzierung Einfluss nimmt.
Es konnte gezeigt werden:
• Der AT-Haken in CbfA ist für die DNA-Bindung essentiell. Die Inaktivierung hat zur Folge, dass keine Differenzierung stattfindet. Es scheint, dass primär der AT-Haken für die DNA-Bindung sorgt und von den Zinkfingern unterstützt wird.
• Die JmjC-Domäne in CbfA ist essentiell. Transformanden mit CbfA ohne aktive JmjC-Domäne zeigen Defekte sowohl in Wachstum als auch Differenzierung.
• CbfA ist ein nukleares Protein. Es konnte zwar keine Kernlokalisationssequenz identifiziert werden, jedoch weisen die Versuche auf zumindest eine Kernlokalisierungssequenz im C-Terminus des cbfA hin.
• Ein C-terminal verkürztes CbfA ist funktionslos: wahrscheinlich aufgrund fehlender Kernlokalisation und somit fehlender DNA-Bindung.
• Ein N-terminal verkürztes CbfA ist teilweise funktionsfähig: die Komplementation in JH.D2-Zellen führt zu einer partiellen Revertierung hin zum Phänotyp der AX2-Zellen.
• Struktur-Homologien der JmjC-Domäne in CbfA zu Mitgliedern aus der Familie der Fe(II)/2OG-Oxygenasen, DNA-bindende Motive und die Lokalisation im Zellkern weisen auf eine Funktion des CbfAs als Chromatin-Remodeller im Zellkern hin.
• In der Transit von Wachstums- zu Entwicklungsphase kann der CbfA-Mangel durch artifizielle Proteinase A-Expression ausgeglichen werden, aber nicht durch Komplementation mit YakA, Adenylat-Zyklase oder cAMP Rezeptor 1.
• CbfA fungiert wahrscheinlich als Regulator der acaA-Transkription auf Ebene der chromosomalen Strukturen.
• cbfB, ein weiteres Gen mit einer JmjC-Domäne wurde in D. discoideum identifiziert, die Gensequenz vervollständigt und vom Dictyostelium Genom-Projekt verifiziert.
Diadenosinpolyphosphate (ApnAs), wirken in einer Vielzahl unterschiedlicher Gewebe als extrazelluläre Signalmoleküle. Ihre asymmetrische Hydrolyse durch Enzyme auf der Zelloberfläche oder durch lösliche Enzyme im extrazellulären Milieu wurde in der Literatur bereits mehrfach beschrieben. Die molekulare Identität dieser Enzyme war jedoch nicht bekannt.
In der vorliegenden Arbeit wurden die Fähigkeit von NPP1, NPP2 und NPP3, den drei Mitgliedern der E-NPP-Familie, Diadenosinpolyphosphate zu hydrolysieren, untersucht. Dazu wurden humanes NPP1 und NPP3 aus der Ratte heterolog in CHO-Zellen exprimiert und die enzymatische Aktivität wurde anhand von Membranfraktionen analysiert. Für die Charakterisierung der katalytischen Eigenschaften von NPP2 wurde eine lösliche sekretierte Form des humanen NPP2 aus partiell aufgereinigtem Vaccinia-Viruslysat eingesetzt. Es konnte gezeigt werden, dass die heterolog exprimierten Enzyme NPP1, NPP2 und NPP3 die untersuchten Diadenosinpolyphosphate Diadenosin-5´,5´´´-P1,P3-triphosphat (Ap3A), Diadenosin-5´,5´´´-P1,P4-tetraphosphat (Ap4A) und Diadenosin-5´,5´´´-P1,P5-pentaphosphat (Ap5A), sowie das Diguanosinpolyphosphat Diguanosin-5´,5´´´-P1,P4-tetraphosphat (Gp4G) hydrolysieren.. Ein Vergleich der Hydrolyseraten zeigte, dass NPP1-2 Ap3A, Ap4A, Ap5A und Gp4G mit vergleichbarer Rate hydrolysieren. NPP3 zeigte ebenfalls keine Präferenz für eines der untersuchten Diadenosinpolyphosphate, hydrolysierte aber Gp4G im Vergleich zu Ap4A deutlich langsamer. Die Hydrolyse der Dinukleotide erfolgte asymmetrisch durch Spaltung der α,β-Pyrophosphatbindung. Als primäre Hydrolyseprodukte entstanden Nukleosid-5´-Monophosphat und der verbleibende Mononukleotidrest Npn-1. Für Ap3A als Substrat wurde für NPP1-3 ein alkalisches pH-Optimum mit maximaler Aktivität bei pH 8.5-9 (NPP1 und NPP3), bzw. pH 10 (NPP2) nachgewiesen. Die enzymatische Aktivität von NPP1-3 wurde durch EDTA inhibiert und die Km-Werte für Ap3A lagen mit 5,1 ± 3,6 µM (NPP1), 8,0 ± 0,5 µM (NPP2) und 49,5 ± 17,7 µM (NPP3) im niedrigen mikromolaren Bereich. Untersuchungen zur Hemmbarkeit der NPP-vermittelten Diadenosinpolyphosphathydrolyse (Ap4A) zeigten, dass die Enzyme NPP1, NPP2 und NPP3 nach Koapplikation verschiedener P2-Rezeptorantagonisten in unterschiedlichem Ausmaß inhibiert wurden. Cibacron Blue inhibierte kräftig alle drei Enzyme, während PPADS einen stärkeren inhibitorischen Einfluss auf die katalytsiche Aktivität von NPP1 und NPP3 als auf die katalytische Aktivität von NPP2 zeigte. Suramin inhibierte dagegen nur die NPP1 und NPP2 katalysierte Ap4AHydrolyse und hatte keinen Einfluss auf NPP3. Eine Inhibierung von NPP1-3 durch NaF wurde nicht beobachtet. Eine geringe inhibitorische Wirkung auf NPP1 wurde durch die extrazellulären Matrix-Komponenten Heparin und Heparansulfat, durch ATP und die Nukleotidanaloga, AMP-CP, AMP-CPP und ATP-γ-S beobachtet. NPP2 und NPP3 wurden durch AMP-CP nicht inhibiert. Den schwächsten inhibitorischen Einfluss zeigte ATP auf die durch NPP3-vermittelte Ap4AHydrolyse.
Die hier für NPP1-3 ermittelten katalytischen Eigenschaften zeigten Übereinstimmgen aber auch Unterschiede gegenüber früheren Daten, die für die Hydrolyse von Diadenosinpolyphosphaten auf der Oberfläche von Zellen ermittelt wurden. Insgesamt sprechen die Ergebnisse dafür, dass NPP1-3 die Hauptvertreter der Diadenosinpolyphosphat-hydrolysierenden Enzyme in Säugergewebe darstellen. Möglicherweise gibt es aber auch ApnA-hydrolysierende Enzyme, die nicht zu den bisher charakterisierten Mitgliedern der E-NPP-Familie zugehören.
In einem zweiten Teil der Arbeit wurde die Expression von NPP1-3 im Gehirn der Ratte mittels Western-Blot-Analyse (Entwicklungsstadien P1, P21 und adult) untersucht. Aufgrund der geringen Spezifität der gegen NPP1 und NPP2 zur Verfügung stehenden Antikörper, konnten jedoch keine eindeutigen Aussagen zur Expression von NPP1 und NPP2 im Gehirn getroffen werden. NPP3 konnte im Rattengehirn nachgewiesen werden. Die Expression war entwicklungsabhängig und nahm mit zunehmendem Alter der Tiere deutlich ab. Die Entwicklung spezifischer Antikörper erscheint ein lohnender Ansatz, um die zelluläre Verteilung von NPP1-3 im Nervengewebe zu bestimmen.
In der vorliegenden Arbeit wird die Expression der Nonapetide Oxytocin und Vasopressin im Zentralnervensystem der Ratte, Rattus rattus und des afrikanischen Graumulls, Cryptomys anselli, mit immunhistochemischen Methoden untersucht. Bei Säugetieren allgemein werden Oxytocin (OX) und Vasopressin (VP) in separaten Populationen magnozellulärer Neuronen des Hycleus supraopticus und die weitverstreuten akzessorischen magnozellulären neurosekretorischen Zellen). Über axonalen Transport gelangen die Hormone hauptsächlich in die Neurohypophyse und werden von dort in das Blutgefäßsystem ausgeschüttet. Neben allgemein bekannten peripheren Wirkungen wie beispielsweise der Uteruskontraktion (Oxytocin), der Milchejektion (Oxytocin) und der Homöostase des Wasserhaushalts (Vasopressin) werden den beiden Hormonen auch wichtige zentrale Effekte wie die Beeinflussung von Sozialverhalten, Partnerwahl, Aggression etc. zugeschrieben, wobei sie als hypothalamische Neurotransmitter fungieren.
Als ein subterranes, eusoziales Säugetier zeigt der Graumull eine ungewöhnliche (eusoziale) Familienstruktur: Die Tiere leben in großen Familien, wobei ein einziges Weibchen mit seinem Partner für die gesamte Nachkommenschaft sorgt. Die Jungtiere verweilen ihr gesamtes Leben bei den Eltern, meist ohne selbst zur Reproduktion zu kommen, und kümmern sich u.a. um ihre jüngeren Geschwister. Verhaltensbiologische Analysen konnten zeigen, daß im Gegensatz zum Nacktmull (Heterocephalus glaber) bei Cryptomys anselli weder Pheromone noch dominant-aggressives Verhalten der „Königin“ zu einer sexuellen Suppression der Nachkommen führen.
Parallel zum Graumull wird die Ratte als ein in der Neurobiologie und Verhaltensphysiologie gut erforschter „Standardorganismus“ immunhistochemisch untersucht. Die vorliegende Arbeit beschäftigt sich zuerst mit der Frage, ob und inwieweit bei Ratten und Graumullen die jeweilige soziale Organisation mit dem Muster der Transmitterexpression von Oxytocin und Vasopressin korreliert. Desweiteren ist von besonderem Interesse, ob sich die einzelnen Angehörigen der Graumull-Familien mit ihrem jeweiligen individuellen sozialen Status auch bezüglich der Verteilung und Quantität der beiden Transmitter unterscheiden. Auf dieser Grundlage wurden insgesamt vierzehn Graumulle und vier Ratten auf die Oxytocin- und Vasopressin-Expression im Zentralnervensystem hin untersucht.
Die vorgestellten immunhistochemischen Befunde an der Ratte und am
Graumull entsprechen prinzipiell der in der Literatur beschriebenen Expression von Oxytocin und Vasopressin im Nucleus paraventricularis hypothalami, im Nucleus supraopticus sowie in den weit verbreiteten akzessorischen magnozellulären neurosekretorischen Neuronen im Hypothalamus anderer Säugetiere. Bei Cryptomys ergab weder die qualitative noch die quantitative intraspezifische Analyse der immunreaktiven OX- und VP- Neuronen signifikante Unterschiede zwischen Individuen unterschiedlicher sozialer Stellung. Dagegen weist der Graumull im Vergleich mit der Ratte und anderen daraufhin bearbeiteten Säugern bisher nicht bekannte qualitative Unterschiede im oxytocinergen System auf, wobei unsere Befunde an der Ratte weitgehend mit der vorhandenen Literatur übereinstimmen: Eine magnozelluläre Neuronen-population im Corpus mamillare, welche auch in der Routinefärbung (Kresylechtviolett) erkennbar ist, zeigt bei den Graumullen eine Oxytocin-Expression, nicht aber bei den Ratten. In der Literatur ist für diese Neuronenpopulation bis dato nur die Expression von ABA beschrieben worden, nicht aber ihr oxytocinerger Charakter. Darüber hinaus ist eine bei der Ratte auffällige Gruppe akzessorischer magnozellulärer und oxytocinerger Neuronen, der Nucleus commissuralis anterior der Ratte, beim Graumull weder in der Routinefärbung noch immunhistochemisch nachweisbar. Als ein weiterer Unterschied ist die Expression von Oxytocin in der Area hypothalamica lateralis bei der Ratte sehr viel dichter als beim Graumull, ein Merkmal von potentiell qualitativem Charakter.
Der interspezifische Vergleich (Ratte-Graumull) ergab also eine potentiell neue Population Oxytocin-exprimierender Neuronen für den Graumull, nicht aber für die Ratte. Es wäre denkbar, daß über diese neu entdeckte oxytocinerge, aber nicht vasopressinerge Expression/Population mamillärer Neuronen innerhalb des limbischen Systems Projektionen in den Neokortex das Sozialverhalten der Graumulle beeinflussen können. In der Zukunft gilt es zu prüfen, ob diese Neuronenpopulation mit ihrer Oxytocin-Expression auch in anderen Säugetieren inklusive anderen eusozialen Spezies vorkommt. Das Fehlen des Nucleus commissuralis anterior (CoA) beim Graumull beruht hingegen wahrscheinlich nur auf strukturellen Unterschieden zwischen den Gehirnen von Ratten und Graumullen.
Fungi belonging to the Rhytismatales (Ascomycota) are parasites or endophytes of plants, some are saprophytes. Their fruiting bodies are localized in different organs of the host plants belonging to many different families of gymnosperms and angiosperms. Many species of Rhytismatales are known on species of Pinaceae, Ericaceae, and Poaceae. These fungi usually have ascomata that are more or less embedded in host tissue and open by longitudinal or radial splits. They have a more or less carbonized covering stroma, thin-walled, iodine negative asci, and ascospores usually covered by gelatinous sheaths.
In the present study, two lists of species of Rhytismatales in China are presented. One is based on literature and includes 103 species in 15 genera. The second one contains the names of the species in the present study, 57 species in 20 genera based on 90 specimens I collected in the Yunnan and Anhui province in China during July to August in 2001. 31 species in the second list are new species or new records for China, so we presently know 134 species in 22 genera of Rhytismatales for China. 28 new species of Rhytismatales are proposed, 21 species from the Yunnan province and seven from the Anhui province. Among them, three new species are proposed in three new genera, Nematococcomyces, New Genus 1, and New Genus 2, respectively. The 28 new species are Cerion sp., Coccomyces spp. 1-2, Colpoma spp. 1-2, Hypoderma spp. 1-6, Lirula sp., Lophodermella sp., Lophodermium spp. 1-5, Nematococcomyces rhododendri C.-L. Hou, M. Piepenbr. & Oberw., Neococcomyces sp., New Genus 1 sp., New Genus 2 sp., Rhytisma spp. 1-2, Soleella sp., Terriera spp. 1-2, and Therrya sp. The genus Davisomycella is proposed as a synonym of Lophodermella based on observations of the morphology, ecology, and the infected organ. The four genera Cerion, Naemacyclus, Terriera, and Therrya, and three species, Hypoderma rubi, Lophodermium uncinatum, and Naemacyclus pinastri, are reported for the first time for China. All the new taxa, the newly recorded ones, as well as six species which had not been illustrated in detail before, are carefully described and illustrated by line drawings in the present study.
The results show that species of Rhytismatales are highly diverse especially in the natural vegetation in high mountainous areas in China. Most species of Rhytismatales are conspicuously host specific. The diversity of Rhytismatales is closely related to that of the preferred hosts, which are members of Pinaceae, Ericaceae, and Cupressaceae. Based on the detailed morphological observations, the significance of different morphological characteristics for a natural classification of Rhytismatales is discussed. Genera are traditionally defined by character states of a few characteristics, namely the opening patterns of ascomata, the depth of ascomata in the host tissue, and asci and ascospore shape. Data from collections in the field, detailed morphological investigation, and molecular data show, however, that the ecology, the infected organ, the host relationship, and many other characteristics have to be combined to circumscribe natural groups.
The discussion of the systematic significance of morphological characteristics is complemented by molecular data. In the present study, partial nuclear large subunit rDNA sequences of 52 specimens representing 38 species are used to analyse phylogenetic relationships for members of Rhytismatales.
Most species of Rhytismatales are placed in a monophyletic group corresponding to the Rhytismatales in the Maximum Parsimony analysis. The delimitation of the Rhytismatales from the Helotiales is, however, difficult. Cyclaneusma minus should be transferred from the Rhytismatales to the Helotiales, and Cudonia circinans and Spathularia flavida from the Helotiales to the Rhytismatales. These tranfers have previously been proposed based on SSU rDNA analysis by other authors. New Genus 1 sp. has morphological characteristics typical for species of Rhytismatales. In the LSU rDNA analysis, however, it is more closely related to Helotiales rather than toRhytismatales. Therefore New Genus 1 sp. is placed in the Helotiales.
Tryblidiopsis pinastri is morphologically intermediate between members of Rhytismataceae and Cudoniaceae. LSU rDNA sequences in the present study show that T. pinastri is more closely related to species of Cudoniaceae. Therefore, this species is removed from the Rhytismataceae to the Cudoniaceae. The delimitation of further families could not be resolved in the present analysis.
Though many new morphological, ecological, and molecular phylogenetic findings are contributed for the first time, the systematic conclusions at generic, family, and order level can only be fragmentary in the present study. With more collections and more molecular data of the worldwide 450 known and many more unknown species of Rhytismatales at hand, a natural system combining morphological and molecular analysis can be elaborated.
Einleitung
APP und die Alzheimersche Krankheit
Das Alzheimer Amyloid Precursor Protein (APP) ist ein Typ-1 Transmembranprotein mit einem Molekulargewicht von 110-135 kDa [Selkoe et al. 1988, Weidemann et al. 1989]. Es wird in allen bisher untersuchten Geweben exprimiert und weist in mehrzelligen Organismen einen hohen Konservierungsgrad auf [Robakis et al. 1987, Rosen et al. 1989]. APP ist unter anderem Vorläufer des β-A4-Peptides (Aβ), das in extrazellulären Aggregaten (Plaques) im Zentralen Nervensystem von Alzheimer-Patienten akkumuliert [Masters et al. 1985]. Die sogenannte „Amyloid-Hypothese der Alzheimerschen Erkrankung“ besagt, dass das Aβ-Peptid eine pathologische Kaskade initiiert, die zur Bildung von amyloiden Plaques, neuronaler Funktionsstörung und letztendlich Demenz führt [Hardy 1997, Selkoe 1999].
Prozessierung des APP
Der Hauptanteil des zellulären APP wird über den (nicht pathogenen) α-Sekretase-Weg prozessiert, wobei das sekretorische APP (α-sAPP) freigesetzt wird, das beinahe der gesamten N-terminalen Ektodomäne des APP entspricht. Die α-Sekretase spaltet APP innerhalb der Aβ-Domäne und verhindert somit die Bildung des pathogenen Aβ-Peptides. Kandidaten für die Katalyse dieser Spaltung sind Proteasen der ADAM-Familie [Buxbaum et al. 1998, Hooper et al. 1997, Koike et al. 1999, Lammich et al. 1999, Loechel et al. 1998].
Das Aβ-Peptid entsteht bei der sukzessiven proteolytischen Spaltung des APP durch die sogenannten β- und γ-Sekretasen. Bei der β-Sekretase handelt es sich um die Aspartat-Protease BACE (β-site APP cleaving enzyme) [Hussain et al. 1999, Sinha et al. 1999, Vassar et al. 1999, Yan et al. 1999]. Die Identität der γ-Sekretase ist noch nicht endgültig geklärt, jedoch spielen Presenilin-1 und -2 sowie Nicastrin eine Rolle bei der γ-Spaltung des APP [de Strooper et al. 1998, 1999, Struhl et al. 2000, Wolfe et al. 1999].
Unter physiologischen Bedingungen wird ca. 30% des APP durch α-Sekretasen prozessiert, ein viel geringerer Anteil dagegen durch die β-Sekretasen. Mehr als die Hälfte des zellulären APP bleibt ungespalten [Koo 2002].
Biologische Funktionen des APP
Die Funktionen des APP lassen sich unterscheiden nach Funktionen der kurzen zytoplasmatischen Domäne und der ca. 100 kDa großen Ektodomäne (α-sAPP). Die zytoplasmatische Domäne des APP stellt eine Plattform für die Bindung verschiedener Interaktionspartner dar. In Kooperation mit den Bindungspartnern spielt APP eine Rolle in unterschiedlichsten zellulären Prozessen wie vesikulärem Transport, Zellmotilität oder Genaktivierung [Review siehe Annaert und de Strooper 2002]. Die meisten Interaktionspartner der zytoplasmatischen Domäne des APP binden an die YENPTY-Sequenz nahe des C-Terminus des APP, die auch als Signal für die Endozytose des APP dient [Perez et al. 1999].
Die sekretorische Ektodomäne des APP hat eine wachstumsfördernde und neuroprotektive Wirkung. Um diese Wirkung auszuüben, bindet α-sAPP an einen bisher unbekannten Rezeptor, der auf der Zelloberfläche diverser Zelltypen wie Neuronen, Fibroblasten, Thyreozyten und Keratinozyten exprimiert wird [Review siehe Schmitz et al. 2002].
Polarer Transport des APP
In polaren MDCK Zellen wird das APP-Holoprotein fast ausschließlich zur basolateralen Zelloberfläche transportiert [Haass et al. 1994]. Es wurde gezeigt, dass dieser polare Transport des APP durch Tyrosin 653 in der zytoplasmatischen Domäne des APP beeinflusst wird. Mutation dieses Tyrosins zu Alanin führte zu partieller Fehlsortierung von ca. 50% des APP zur apikalen Plasmamembran. Die Sekretion von α-sAPP dagegen fand in MDCK-Zellen unabhängig von Tyrosin 653 basolateral statt [Haass et al. 1995].
Intrazellulärer Proteintransport durch Adaptor-Protein-Komplexe
Am intrazellulären Proteintransport sind Adaptor-Protein-Komplexe (APs) beteiligt, die bestimmte Sortierungssignale in der zytoplasmatischen Domäne von Frachtproteinen erkennen. Bis heute sind vier dieser tetrameren AP-Komplexe (AP-1 bis AP-4) bekannt, die zum Teil verschiedene Isoformen einzelner Untereinheiten aufweisen, z.B. AP-1A und AP-1B [Review: Boehm und Bonifacino 2001]. Jeder AP-Komplex spielt eine Rolle in einem bestimmten Schritt des intrazellulären Proteintransportes. Für AP-1A wird eine Funktion im anterograden und retrograden Transport zwischen Endosomen und TGN beschrieben [Review: Hinners und Tooze 2003]. AP-2 vermittelt Endozytose verschiedener Transmembranproteine von der Plasmamembran [Review: Kirchhausen 2002]. AP-3 spielt eine Rolle im Proteintransport zu Lysosomen und Lysosom-ähnlichen Organellen wie Melanosomen [Robinson und Bonifacino 2001]. AP-4 sowie AP1-B sortieren Proteine zur basolateralen Plasmamembran polarer Epithelzellen [Fölsch et al. 1999, Simmen etal. 2002].
Die Sortierungsmotive, die von Adaptor-Komplexen in der zytoplasmatischen Domäne der Fracht-Proteine gebunden werden, enthalten in den meisten Fällen entweder ein Tyrosin oder zwei Leucine. Das gesamte Motiv besteht aus jeweils vier bis zehn Aminosäuren [Review siehe Bonifacino und Traub 2003].
Ziele der Arbeit
In der vorliegenden Arbeit wurde der polare Transport des APP in Epithelzellen untersucht. Ein Ziel war es, Faktoren zu finden, die den basolateralen Transport des APP in Abhängigkeit von Tyrosin 653 vermitteln. Des weiteren sollte der Transport von APP und sAPP in verschiedenen Epithelzelllinien analysiert werden. Um ein gutes Werkzeug zur Detektion von APP zu haben, wurden GFP-APP-Fusionsproteine hergestellt und charakterisiert.
Ergebnisse und Diskussion
GFP-APP-Fusionsproteine wurden hergestellt und in MDCK-, FRT- und LLC-PK1-Zellen stabil exprimiert. Die Charakterisierung der GFP-APP-Fusionsproteine durch Immunfluoreszenzanalysen zeigte, dass die chimeren Proteine im TGN sowie in peripheren Vesikeln lokalisiert sind und mit endogenem APP stark kolokalisieren. GFPAPP war somit gut geeignet, um den intrazellulären Transport des APP zu untersuchen.
Eine Analyse der zytoplasmatischen Domäne des APP im Bereich des Tyrosin 653 zeigte, dass dieses Tyrosin und die drei folgenden Aminosäuren (YTSI) ein Konsensus-Motiv für die Bindung von tetrameren Adaptor-Protein-Komplexen darstellen.
Zu Beginn dieser Arbeit waren AP-1 bis AP-3 bereits gut charakterisiert, wohingegen für AP-4 keine Funktion bekannt war. In Kollaboration mit Simmen et al. konnte gezeigt werden, dass AP-4 den basolateralen Transport einiger Proteine vermittelt [Simmen et al. 2002]. Immunfluoreszenzanalysen lokalisierten AP-4 im TGN und peripheren Vesikeln, die unterschiedlich von AP-1A/B markierten Strukturen waren. Da kaum Kolokalisation von AP-4 und AP-1A/B zu beobachten war, ist die Lokalisation von AP-4 und AP-1B, das auch eine Rolle im basolateralen Proteintransport spielt, in unterschiedlichen Subdomänen des TGN und unterschiedlichen vesikulären Strukturen anzunehmen.
Polarer Transport des APP durch Adaptor-Protein-Komplexe
Die mögliche Funktion von AP-1 und AP-4 im Transport von APP wurde zunächst mit Hilfe von in vitro-Bindungsstudien untersucht. Dazu wurde die zytoplasmatische Domäne des APP als GST-Fusionsprotein kloniert und exprimiert. Die Frachtproteinbindenden Untereinheiten von AP-1 und AP-4 wurden unter Verwendung von radioaktiv markiertem Methionin durch in vitro-Transkription und -Translation hergestellt. In Bindungsstudien interagierten AP-1A und AP-1B mit der zytoplasmatischen Domäne des APP, nicht aber AP-4. Diese Ergebnisse deuten an, dass AP-1A und AP-1B eine Rolle im intrazellulären Transport von APP spielen könnten. AP-4 dagegen scheint nicht an diesem Prozess beteiligt zu sein.
Durch Mutation des Tyrosin 653 in APP zu Alanin (Y653A) wurde die Interaktion zwischen AP-1B und APP stark verringert, was darauf hindeutet, dass dieses Tyrosin einen Teil des Bindungsmotivs für AP-1B darstellt. Übereinstimmend damit entspricht die genaue Aminosäureabfolge des Y653TSI-Motivs den Sotierungsmotiv-Präferenzen von AP-1B [Ohno et al. 1999]. Die Interaktion von AP-1A dagegen war mit WildtypAPP und der Tyrosin-Mutante vergleichbar und scheint somit auf einem anderen Interaktions-Motiv zu basieren. AP-1A und AP-1B erkennen somit unterschiedliche Sortierungsmotive in der zytoplasmatischen Domäne des APP und kooperieren möglicherweise im intrazellulären Transport des APP. Diese Ergebnisse sind der erste Bericht über eine Interaktion von Adaptor-Protein-Komplexen mit der zytoplasmatischen Domäne des APP.
Die Rolle von AP-1B im basolateralen Transport von APP wurde genauer untersucht mit Hilfe der LLC-PK1 Zelllinie, die kein AP-1B exprimiert [Ohno et al. 1999]. In LLCPK1-Zellen werden verschiedene Proteine unpolar zur apikalen und basolateralen Membran verteilt, die in MDCK-Zellen durch Interaktion mit AP-1B basolateral transportiert werden [Fölsch et al. 1999, Sugimoto et al. 2002]. Um den Transport von APP in polaren LLC-PK1-Zellen zu untersuchen, wurde Plasmamembran-ständiges GFP-APP durch zwei unabhängige Methoden nachgewiesen: die apikale oder basolaterale Oberfläche der Zellen wurde selektiv entweder biotinyliert oder mit GFPAntikörpern markiert. Beide Methoden zeigten, dass GFP-APP in LLC-PK1-Zellen sowohl an der apikalen als auch an der basolateralen Zelloberfläche lokalisiert ist. Somit wird auch APP in diesen Zellen im Vergleich zu MDCK-Zellen anders sortiert. Dieses Ergebnis festigt die Hypothese einer Funktion von AP-1B im Transport von APP, die aufgrund der Daten der in vitro-Bindungsstudien aufgestellt wurde.
Polare Sekretion des sAPP ist unabhängig vom Transport des Holoproteins
Neben dem Transport des APP-Holoproteins war auch die polare Sekretion des sAPP Thema dieser Arbeit. Es war gezeigt worden, dass basolaterale Sekretion des sAPP in MDCK-Zellen unabhängig vom Transport des APP-Holoproteins ist [Haass et al. 1995]. Dieses Ergebnis konnte in der vorliegenden Arbeit bestätigt und auf andere Zelllinien erweitert werden. Um die korrekte Sekretion von GFP-sAPP nachzuweisen, wurde die GFP-sAPP-Sekretion zunächst in polaren MDCK-Zellen untersucht, die stabil GFP-APP exprimierten. Da GFP am N-Terminus des APP angefügt ist, trägt auch das sezernierte APP die GFP-Markierung. GFP-sAPP konnte mittels Immunpräzipitation mit GFP-spezifischen Antikörpern lediglich im basolateralen Medium nachgewiesen werden. Somit sezernieren MDCK-Zellen GFP-sAPP in gleicher Polarität wie von Haass et al. für endogenes sAPP gezeigt wurde [Haass et al. 1995].
Experimente in GFP-APP exprimierenden LLC-PK1- und FRT-Zellen zeigten, dass auch hier die polare Sekretion des GFP-sAPP und der Transport des APPHoloproteins zwei unabhängige Prozesse sind. Polare LLC-PK1-Zellen transportierten GFP-APP zur apikalen und basolateralen Plasmamembran (siehe oben). GFP-sAPP-Sekretion aus polaren LLC-PK1-Zellen dagegen fand ausschließlich basolateral statt. In FRT-Zellen wurde GFP-sAPP im Gegensatz zu MDCK- und LLCPK1-Zellen apikal sezerniert. Kolokalisation des GFP-APP mit Transferrin-Rezeptor in FRT-Zellen deutete dagegen an, dass das Holoprotein wie in MDCK-Zellen basolateral transportiert wird. Dies ist auch zu erwarten, da FRT-Zellen AP-1B exprimieren und es auch in dieser Zelllinie basolateralen Transport vermittelt [A. Gonzalez, persönlich, ASCB 2003]. Nach diesen Ergebnissen zu urteilen, finden auch in FRT und LLC-PK1-Zellen APP-Transport und sAPP-Sekretion unabhängig voneinander statt.
Basolaterale sAPP-Sekretion ist unabhängig von der Ektodomäne
In MDCK-Zellen wurde zusätzlich die Sekretion eines GFP-APP untersucht, in dem der Großteil der Ektodomäne deletiert und durch GFP ersetzt wurde, die SekretaseSchnittstellen jedoch noch vorhanden waren. Durch Immunfluoreszenzanalyse wurde zunächst nachgewiesen, dass die subzelluläre Lokalisation dieser Deletionsmutante der des endogenen APP entspricht. Die Sekretion dieses stark verkürzten sAPP erfolgte wie die des Wildtyps basolateral. Dieses Ergebnis deutet an, dass die Determinante für die basolaterale Sekretion des sAPP nicht innerhalb der Ektodomäne liegt, wie in einigen älteren Publikationen angenommen wird [Haass et al. 1995, de Strooper et al. 1995]. Neuere Ergebnisse dagegen führen die polare Sekretion des sAPP auf die basolaterale Lokalisation der α-Sekretase zurück [Capell et al. 2002], was die basolaterale Sekretion der Deletionsmutante erklären könnte.
sAPP-Bindung an polaren Zellen
Durch Interaktion mit einem bisher unbekannten Rezeptorprotein erfüllt sAPP für verschiedene Zelltypen die Funktion eines Wachstumsfaktors [Saitoh et al., 1989, Pietrzik et al., 1998, Hoffmann et al., 2000]. Da viele Wachstumsfaktor-Rezeptoren selektiv entweder an der apikalen oder basolateralen Plasmamembran von Epithelzellen lokalisiert sind, wurden Bindungsstudien mit rekombinant exprimiertem sAPP (sAPPrec) an polaren FRT und MDCK-Zellen durchgeführt. Analyse der Bindung mit einem sAPPrec-spezifischen Antikörper zeigte, dass sAPP ausschließlich an der apikalen Plasmamembran beider Zelllinien bindet. Da die Sekretion des sAPP in FRT-Zellen ebenso apikal erfolgt, ist in dieser Zelllinie eine autokrine Regulation durch sAPP vorstellbar, was auch durch vorherige Ergebnisse angedeutet wurde [Pietrzik et al. 1998]. Für MDCK-Zellen, die sAPP basolateral sezernieren und apikal binden, muss ein anderer Regulationsmechanismus vorliegen. Es könnte sich um parakrine Regulation handeln, was jedoch noch bestätigt werden muss.
Fazit: In dieser Arbeit wurde zum ersten Mal gezeigt, dass tetramere Adaptor-ProteinKomplexe eine Rolle im intrazellulären Transport von APP spielen. In diesem Zusammenhang wurde die Funktion des AP-4-Komplexes in einer Kollaboration analysiert. Es wurde gezeigt, dass AP-1A und AP-1B eine Rolle im Transport von APP spielen. Eine Funktion von AP-4 im Transport von APP ist nach den vorliegenden Ergebnissen unwahrscheinlich. Untersuchungen zur APP-Sortierung in verschiedenen Epithelzelllinien zeigten, dass die Hypothese der Unabhängigkeit von APP-Transport und sAPP-Sekretion als genereller Mechanismus angesehen werden kann. Durch Analyse der sAPP-Bindung an polaren FRT- und MDCK-Zellen wurde erstmals die polare Lokalisation des putativen sAPP-Rezeptors untersucht, was einen ersten Einblick in den Mechanismus der sAPP-vermittelten Regulation in polaren Zellen ermöglichte.
Cytochrome P450 (CYP) enzymes oxidize, peroxidize and/or reduce cholesterol, vitamins, steroids, xenobiotics and numerous pharmacological substances in an oxygen- and NADPHdependent manner. Since many CYP isozymes are also capable of metabolizing arachidonic acid to biologically active products, CYP enzymes are often described as the third pathway of arachidonic acid metabolism i.e., in addition to cyclooxygenases and lipoxygenases. CYP enzymes are predominantly expressed in the liver while others, such as members of the CYP 2J, CYP 2C and CYP 4A subfamilies, can be detected in extrahepatic tissues, particularly in the cardiovascular system. Recent data suggest that a CYP 2C enzyme(s) expressed in coronary artery endothelial cells generate epoxyeicosatrienoic acids (5,6-; 8,9-; 11,12- and 14,15-EET) which contribute to the acute control of vascular tone and the longterm regulation of vascular homeostasis.
The expression of CYP 2C in coronary artery endothelial cells is regulated by a number of stimuli, such as cyclic stretch and fluid shear stress as well as by the corticosteroid cortisol and a number of CYP substrates (nifedipine, cerivastatin and -naphthoflavone). However, the signalling pathways and the transcription factors involved in regulating the expression of the gene are unknown.
Since most of the CYP 2C enzymes are transcriptionally regulated, we were interested in identifying the CYP 2C isoform(s) expressed in porcine coronary artery endothelial cells (PCAEC) as well as determining its/their promoter sequence(s). The overall goal was to study the involvement of different transcription factor binding elements in the regulation of the CYP 2C gene(s). Porcine coronary arteries were used given the possibility of analysing the results obtained at the cellular level with alterations in vascular function. Comparison of the porcine CYP 2C and the human CYP 2C8 and 2C9 promoters was also a major goal of this study.
To identify the relevant porcine CYP 2C isoform nested RT-PCR was performed using total RNA from porcine coronary artery endothelial cells. Comparison of the sequence of the product of this reaction with the NCBI database suggested that the CYP 2C expressed in PCAEC was approximately 85% homologous with the human CYP 2C9 enzyme. To obtain the full length CYP 2C isoform 5´ rapid amplification of cDNA end (5´ RACE) was performed using a downstream reverse gene specific primer which is conserved in all of the porcine CYP 2C isoforms. The intention behind using such a primer was to amplify all the possible CYP cDNAs expressed in PCAEC. With the 5´ RACE technology it was possible not only to identify the exact isoform (CYP 2C34) expressed in PCAEC, but it was also possible to amplify 550 bp of the 5´ upstream region. This result was authenticated by comparing the protein/nucleotide sequence with other human CYP 2C genes such as CYP 2C8 and CYP 2C9 as well as different porcine CYP 2C genes (CYP 2C34, CYP 2C49). Multiple protein/nucleotide sequence alignment revealed approximately 85-90% sequence identity. An exon1-2 specific radio-labelled probe of the CYP 2C34 gene was then used to screen a porcine genomic library for positive genomic clones containing the promoter region of the CYP 2C34 gene.
For the isolation of 5´ flanking region of CYP 2C34 gene a PCR-based directional genome walking strategy was used in which the positive porcine genomic BAC clones were taken as a DNA template. Four arbitrarily designed universal walking primers and a gene-specific primer derived from the CYP 2C34 gene sequence were employed and led to the identification and isolation of 1.4 kb of the 5´ flanking region.
The 1.4 kb 5´ flanking region of CYP 2C34 gene contains multiple transcription factor binding sites including glucocorticoid-responsive element (GRE), hypoxia-responsive element (HRE), CAAT-enhancer binding protein (C/EBP), stress responsive element (STRE) consensus sequences. CYP 2C34 promoter constructs were generated and reporter gene activity (luciferase) activity was compared with that of a promoterless vector (pGL3-Basic) at first in HEK cells and then in PCAEC. After using cortisol as a positive control to demonstrate that the promoter constructs generated were functional we determined the effects of physiologically relevant stimuli i.e., hypoxia and cyclic stretch. Additional experiments with zinc sulphate were performed in a preliminary analysis of the role of Zn2+ inducible transcription factors and might be cooperative heterodimerization formation with these transcription factor with C/EBP in the regulation of CYP 2C34 expression. With all these stimuli, reporter gene activity of CYP 2C34 promoter was significantly (3-8 fold) increased over values obtained in unstimulated cells.
Analysis of the regions that are essential for the induction of promoter activity in response to the different stimuli of interest have to be performed in combination with gel shift assays, siRNA experiments as well as site-directed mutagenesis experiments. Comparison of the regulation of the CYP 2C34 gene and correlation with changes in vascular function (in isolated porcine coronary arteries) should deliver information relevant to the regulation of the CYP 2C enzyme expressed in human coronary artery endothelial cells. The recent demonstration of a clinically relevant role for CYP 2C9 in coronary heart disease underlines the importance of such a study.
Determination of the structure of complex I of Yarrowia lipolytica by single particle analysis
(2004)
Komplex I enthält ein Flavinmononukleotid sowie mindestens acht Eisen- Schwefel Zentren als redoxaktive Cofaktoren. Da ein wesentlicher Teil des mitochondrialen Genoms für Untereinheiten von Komplex I codiert, betrifft eine Vielzahl von mitochondrialen Erkrankungen diesen Enzymkomplex.
Komplex I wurde bisher aus Mitochondrien, Chloroplasten und Bakterien isoliert. Die Minimalform von Komplex I wird in Bakterien gefunden, wo er aus 14 (bzw 13 im Falle einer Genfusion) Untereinheiten besteht und eine Masse von etwa 550 kDa aufweist. Generell werden sieben hydrophile und sieben hydrophobe Untereinheiten mit über 50 vorhergesagten Transmembranhelices gefunden. Im Komplex I aus Eukaryoten wurde eine grössere Anzahl zusätzlicher, akzessorischer Untereinheiten nachgewiesen. Hier werden die sieben hydrophoben Untereinheiten vom mitochondrialen Genom codiert, während alle anderen Untereinheiten kerncodiert sind und in das Mitochondrium importiert werden müssen.
Die obligat aerobe Hefe Yarrowia lipolytica wurde als Modellsystem zur Untersuchung von eukaryotischem Komplex I etabliert. Die bisher am besten untersuchte Hefe Saccharomyces cerevisiae enthält keinen Komplex I. Hier wird die Oxidation von NADH durch eine andere Klasse von sogenannten alternativen NADH Dehydrogenasen durchgeführt. Auch Y. lipolytica enthält ein solches alternatives Enzym, das allerdings mit seiner Substratbindungsstelle zur Aussenseite der inneren Mitochondrienmembran orientiert ist. Durch molekularbiologische Manipulation konnte eine interne Version dieses Enzymes exprimiert werden, wodurch es möglich ist, letale Defekte in Komplex I Deletionsmutanten zu kompensieren. Mittlerweile wurden alle Voraussetzungen geschaffen, um kerncodierte Untereinheiten von Komplex I aus Y. lipolytica gezielt genetisch zu verändern. Die Proteinreinigung wird durch die Verwendung einer auf einem His-tag basierenden Affinitätsreinigung erheblich erleichtert...
The transcriptional regulator RcsB controls the expression of a minimum of 20 different genes having diverse functionalities and biosynthetic operons in the family of Enterobacteriaceae. While in the heterodimeric complex with the co activator RcsA, the RcsAB box consensus is recognized, DNA binding sites for RcsB without RcsA have also been identified. The conformation of RcsB might therefore be modulated upon interaction with various co activators, resulting in recognition of different DNA targets. In this study the interaction of RcsB with some of these DNA targets have been analysed by a diverse array of techniques including gel shift assay and SPR. The solution structure of the C-terminal DNA-binding domain of RcsB from Erwinia amylovora spanning amino acid residues 129-215 has been solved in this study by heteronuclear NMR spectroscopy. The C-terminal domain is composed of four α-helices where the two central helices of the H-T-H motif are similar to the structures of the regulatory proteins GerE, NarL and TraR. The DNA-binding activity of the C-terminal domain alone is established for the first time in this study and was specified by fluorescence spectroscopy, SPR and NMR titration experiments. The molecular interaction between the individual RcsB domains was analysed by cross-linking experiments and heteronuclear NMR spectroscopy and the amino acid residues of the C-terminal domain involved in this interaction were identified precisely. Another important part of this project was the cell-free production of different Trp analogue labelled RcsB protein. RcsB protein was produced in quite a good yield with different Trp analogue having spectrally enhanced properties. The isolated RcsB alloproteins proved to be ideal for protein interaction studies by fluorescence spectroscopy and the very first evidence of an oligomerization of RcsB due to molecular association has been put forth from these studies. The phosphorylated state of the RcsB protein was mimicked by a beryllofluoride complex in order to study its role in transcriptional regulation. It was found that RcsB alone could bind to DNA targets upon this modification by the beryllofluoride complex. Thus the phosphorylation of the protein that involves the Asp 56 residue induces a structural change of the protein followed probably by a domain movement also, so that the C-terminal domain having the H-T-H DNA binding motif that was previously eclipsed by the N-terminal domain is relieved of this constraint.
In this study the clinical value of the method of 31P und 1 H MRI spectroscopy is analyzed in the evaluation of tumors of the liver and the cerebrum. At first 39 patients (HCC n=30, metastases of colorectal carcinomas n=9) undergoing transarterial chemoembolization (TACE) were evaluated MR tomographically with 1.5 Tesla using 31P CSI spectroscopy. Moreover, 53 patients with cerebral tumors (17 meningiomas, 11 gliomas WHO grades I-II, 6 gliomas WHO grade III, 13 gliomas WHO grade IV and 6 metastases) were evaluated 1 H spectroscopically with the ISIS technique in different echo times. The results of both groups were correlated with the histopathological findings and compared with a study group. For evaluation the area under the curve of the measurable signal intensities were calculated, the ratios were determined and statistically evaluated. In patients with livertumors undergoing TACE, the 31P spectroscopy was performed before and after each course of TACE. Pretherapeutic evaluation revealed the tumor tissue with increased PME peak, PME/ß-ATP ratio, and PME/PDE ratio. In all cases the tumor spectres were to be differentiated from the spectra of the study group. If chemoembolization was technically successful, we found an increase in the Pi peak (+90.1%) and a decrease in the ß-ATP peak (-19.1%). After each course of therapy a number of patient groups could be differentiated depending on the changes in the different peaks and ratios. A response was characterized by a decrease of the PME/ß-ATP and PME/PDE ratios and an increase of the PDE/ß-ATP ratio. In non-responders, there was no decrease of the PME/ß-ATP and PME/PDE ratios, and these ratios increased 6 weeks later. The PDE/ß-ATP ratio decreased. Constant ratios were found if a steady state of the disease was achieved. Regrowth of tumor was accompanied by elevated PME and decreased PDE peaks. With regard to the 1 H spectroscopical findings the following statements can be made: The tumor spectra can be distinctly differentiated from the study group spectres. In this respect highly significant differences for the NAA/Cho and PCr/Cho ratios can be seen. The spectra of the meningiomas can be often characterized by the missing NAA. A small peak at 2.0 ppm can probably be due to a part of healthy brain tissue in the VOI at the rim of the tumor in some of the spectra. Moreover, some of the meningiomas show Alanin at 1.47 ppm, which, however, can also be overlain by fat signal in this area. On average, the PCr peak is reduced by half with regard to the referene; Inositol can hardly be detected even with short echo times. The metastases show a decreased NAA/Cho and PCr/Cho ratio. In few cases Ins/Cho can be measured, and then below the level of the study group. Additionally, two distinct peaks could be seen at 0.9 and 1.25 ppm according to strongly increased free fatty acids. All gliomas show a reduced NAA signal. In this respect, the reduction of the NAA/Cho ratio shows a nonsignificant dependence on malignity, which can be reflected in an almost completely reduced NAA signal in glioblastomas. PCr and Ins are also decreased. With increasing malignity of the lesion the Inositol signal increases and reaches the normal values of the study group. Using 1 H spectroscopy it is possible to support the differential diagnosis of the imaging modalities. Due to its sensitivity it is possible to use the 31P spectroscopy in therapy control. In order to establish these methods in the daily routine further improvements are necessary, particularly in regard to measurement sequences, automatisms and standardized evaluation protocols.
Taphonomy and palaeoecology of Laetoli as well as Makuyuni, Arusha region in northern Tanzania
(2004)
This thesis is the result of the Hominid Corridor research Project in Tanzania since 1993 to 1995 that include Pliocene and Pleistocene localities. The localities under study include Laetoli and Manyara area in Arusha Region, northern Tanzania. The thesis has the following specific objectives: firstly, to identify taxa recovered from the studied assemblages; secondly, to underpin taphonomic history of the assemblages under study; thirdly, to elucidate further palaeoecological reconstruction of the assemblages; and finally, to examine surface fossil fauna modifications including agents of modifications either hominids or carnivores.
The Upper Laetolil Beds are dated at 3.5 million years ago (Ma) and the Ndolanya Beds are bracketed in age between 3.5 and 2.41 Ma. The Naibadad Beds, also from Laetoli area, are date to be between 2.2 to 2.1 Ma. The Naibadad Beds are correlated with the base of Bed I at Olduvai Gorge. There are so far no absolute dates for Manyara assemblages. Based on biostratigraphic correlation, the younger overlying unit, the Upper Manyara Beds are estimated to belong to Later Pleistocene and the Lower Manyara Beds are estimated to belong to Early Pleistocene. The Upper Manyara Beds are correlated to the age of Bed III at Olduvai Gorge, while the Lower Manyara Beds are interpreted to span the same contemporaneity with the upper part of Bed II at Olduvai Gorge.
At Laetoli localities, terrestrial mammals while localities from Manyara besides terrestrial mammals dominate fauna; they include aquatic species such as fish, crocodiles and hippopotamus. The main families recovered from Upper Laetolil Beds complement those already recovered from former research works by other workers. This is also true for the younger overlying stratigraphic horizon, the Upper Ndolanya Beds. Thus, mammalian families recovered from Upper Laetolil Beds include Bovidae, Carnivora, Elephantidae, Equidae, Lagomorpha, Suidae, Rodentia, Hominoidea and Rhenocerotidae. Remains of an invertebrate, Gastropoda were also recovered. For Upper Ndolanya Beds include almost the same families recovered from Upper Laetolil Beds, but based on former recovery of fossil fauna, these Beds outnumber greatly the Upper Laetolil Beds in bovid composition by 20 per cent. Such a change in species composition is noticed also from South African localities and East African localities such as the East Turkana. This is interpreted to be due to climatic change drier environments that included species adapted to such palaeoclimates.
For the first time, our team has been able to retrieve specimens identifiable to taxa, a pattern that not possible from previous workers who claimed to have recovered too sparse specimens to be identifiable to any taxon.
The Upper Manyara Beds as well as Lower Manyara taxonomic composition include aquatic species besides the large terrestrial mammalian fauna retrieved from there. In due regard, the former horizon is attributed to have affinity with Olduvai Bed III components and the latter, older horizon, is attributed to have affinity with upper parts of Bed II times at Olduvai Gorge. The Lower Manyara Beds can be said to have, in relative terms, affinity to species recovered from site RC 11 of the Chiwondo Beds, Malema region in northern Malawi, although the former site may be equable to the terminal age of the latter locality.
Fossil hominid remains; attributable to genus Homo and possibly species Homo erectus have been recovered from two localities, Mk 2 and Mk, along Lower Manyara Beds. On the other hand, stone tools, identified to belong to the Acheulian industrial technocomplex, were recovered from site Mk 4.
All of fossil fauna from Laetoli sites were mostly exfoliated and there shows to be little effect in terms of hydrodynamic sorting of the fossil bones. However, intense carnivore activity is witnessed due to the almost one to one ratio of proximal to distal ends. This is also true for the Lower Manyara Beds locality. Through examination of surface modifications of the fossil fauna, it has been established that there was carnivore consumption of ungulates. There is no evidence of hominid involvement that has to be testified by stone tools.
In einer kontrollierten klinischen Studie wurden zehn gesunden Probanden über drei Tage hinweg insgesamt 180 g (3 · 1000 ml) hochmolekularer, hochsubstituierter Hydroxyethylstärke Hespan® 6% HES 450/0,7 (Mw = 450 kDa, DS = 0,7) in 0,9% NaCl infundiert, um die Auswirkungen dieser Volumenersatzlösung auf die Blutgerinnung feststellen zu können. Durch die mittelgroße Infusionsmenge sollte eine wirklichkeitsnahe, an eine perioperative Situation angelehnte Untersuchungsgrundlage geschaffen werden.
Die Gerinnungsanalyse erfolgte durch intrinsisch aktivierte Rotationsthrombelastographie (ROTEG®), die als globale Vollblut-Messmethode mit den Parametern CT (Coagulation time), CFT (Clot formation time) und MCF (Maximum clot firmness) im Gegensatz zu den zusätzlich bestimmten isolierten Einzelfaktoren der klassischen plasmatischen Gerinnungstests wie der Faktor VIII-Aktivität (F VIII: C) oder Fibrinogen den Gerinnungsprozess in seiner dynamischen Gesamtheit (Zusammenspiel von Plättchenfunktion, plasmatischen Gerinnungsfaktoren und Fibrinogen) erfasst. Außerdem wurden, um die Gerinnungsergebnisse mit den HES-Mengen im Blut vergleichen zu können, die HES-Konzentrationen (cHES) sowie die mittleren HES-Molmassen (MwHES) aus dem Probandenplasma bestimmt.
Die Blutabnahmen erfolgten an den drei Infusionstagen zu Beginn, während und am Ende der zweistündigen HES-Infusion sowie zu sieben Abnahmezeitpunkten danach. Zusätzlich fanden Nachuntersuchungen an insgesamt 15 Folgetagen mit zunehmendem zeitlichen Abstand statt.
Die thrombelastographischen Messungen an den Infusionstagen zeigten vor allem bei dem ROTEG®-Parameter CFT (relative Verlängerung des anfangs im Referenzbereich liegenden Medians bis zu 170%), aber auch bei der CT (Verlängerung aus dem Referenzbereich heraus um bis zu 28%) deutliche Veränderungen. Bei den plasmatischen Gerinnungstests betrug die Verminderung der anfangs im Referenzbereich liegenden F VIII: C bis zu 76% (Median), die des anfangs im Referenzbereich liegenden von Willebrand-Faktor-Antigens (vWF: Ag) bis zu 88% (Median). Der ausgeprägteste Hämatokritabfall betrug dabei lediglich 21% (Median).
Aus diesen Ergebnissen folgt, dass hochmolekulare, hochsubstituierte Hydroxyethylstärke eine über einen reinen Dilutionseffekt hinausgehende kombinierte Störung der Thrombozytenfunktion einerseits und des intrinsischen Systems andererseits hervorruft und somit die Gerinnungsfähigkeit des Blutes im Sinne eines erworbenen, künstlichen von Willebrand-Syndroms vom Typ 1 problematisch verringert. Da die CFT noch am zehnten Folgetag um 89% (Median) verlängert war und die F VIII: C noch um 29% (Median) vermindert, ist für die Gerinnungsbeeinträchtigung ein ausgedehnter Zeitraum anzunehmen.
Gleichzeitig zeigte sich am zehnten Folgetag in dieser Studie ein Plasmawert von 8,5 mg/ml (Median) für die cHES, am 60. Folgetag wurden immer noch 3,7 mg/ml (Median) gemessen, was den Kumulationseffekt der Substanz widerspiegelt.
Nach den vorliegenden Daten ist anzunehmen, dass weniger ein hohes Molekulargewicht, mehr jedoch ein hoher Substitutionsgrad und ein großes C2/C6-Verhältnis einerseits die primäre und sekundäre Hämostase direkt beeinträchtigen, gleichzeitig aber auch die Abbaubarkeit großer HES-Moleküle einschränken und somit deren gerinnungskompromittierende Effekte prolongieren.
Die Untersuchungen wurden mit moderaten Dosierungen von hochsubstituierter HES vorgenommen. Es ist anzunehmen, dass bei einer Ausschöpfung der empfohlenen maximalen Dosierung noch extremere Blutgerinnungsstörungen eingetreten wären. Hieraus ergibt sich die Empfehlung, in der Volumenersatztherapie in den meisten Fällen Präparaten mit einem niedrigeren Substitutionsgrad wie HES 130/0,4 den Vorzug zu geben, bei denen bisher keine schwerwiegenden Blutungen beobachtet werden konnte. Die routinemäßige Hämodilution ist nach den vorgelegten Daten keine Indikation für hochsubstituierte HES. Deren Verwendung sollte auf akute Notfälle beschränkt werden. Mehrfachinfusionen an aufeinanderfolgenden Tagen sollten ausgeschlossen werden.
Aus den vorgestellten Studien und Fallbeschreibungen sowie den Daten dieser Arbeit ergeben sich Fragen nach dem genauen Pathomechanismus der Gerinnungsbeeinträchtigung durch hochsubstituierte HES, einschließlich indirekter Effekte wie Plasmaviskositätsveränderungen. Auch die pharmakodynamischen und pharmakokinetischen Probleme, die durch eine Kumulation bei Mehrfachapplikation der Substanz bedingt sind, bedürfen weiterer Klärung. Schließlich bleibt unklar, ab welchem genauen Grad der Einschränkung sowohl der Plättchenfunktion als auch der plasmatischen Gerinnung mit klinisch relevanten mikrovaskulären Blutungen zu rechnen ist.
Nitric oxide (NO) is a potent mediator with pleiotropic functions such as inhibition of platelet aggregation, smooth muscle relaxation and regulation of neuronal transmission. These effects are mostly mediated by intracellular NO-sensitive guanylyl cyclases (GCs) which convert GTP into the second messenger, cGMP. This messenger in turn activates multiple downstream effectors such as cGMP-dependent protein kinases, cGMP-regulated ion channels and cGMPdependent phosphodiesterases. Mammalian NO-sensitive GCs are obligate heterodimers of an α and β subunit each. Given that these enzymes play a key role in cGMP-mediated pathways, one may anticipate that mechanisms other than allosteric activation via NO may exist to regulate the production and turnover of cGMP. In this thesis, novel aspects of the regulation of the most abundantly expressed GC heterodimer α1β1 are presented.
A possible mechanism of regulation that was tested here, is tyrosine phosphorylation. Using anti-phosphotyrosine antibodies, the phosphorylation of the β1 subunit was detected after incubation of β1-overexpressing COS-1 cells with protein tyrosine phosphatase (PTP) inhibitors such as pervanadate and bpV(phen). β1 phosphorylation on tyrosines was also observed in PC-12 cells which endogenously express GC and in rat aorta after inhibition of PTPs. Furthermore, hydrogen peroxide was found to be a physiological stimulus for the induction of reversible β1 tyrosine phosphorylation in intact cells. Using phenylalanine mutants of different tyrosines, residue 192 (Y192) of β1 was identified as the major phosphorylation site. Consistent with this finding, sequence analyses showed that Y192 forms part of a motif that resembles a preferential target site for Src-like kinases. When tyrosine-phosphorylated, this motif exposes a typical SH2 docking site for members of the Src kinase family.
Experiments with inhibitors of Src kinases, PP1 and PP2, clearly showed that phosphorylation of Y192 is Src-dependent. Preincubation of β1-expressing cells with these inhibitors significantly reduced the level of phosphorylated β1 after bpV(phen) treatment. Furthermore, co-expression of β1 with Src led to a strong phosphorylation of this subunit. Co-precipitation experiments showed that Src interacts with GC. Interestingly, kinases of the Src family are recruited to β1 via the SH2 domain upon phosphorylation of Y192. Together, these results indicate that Src kinases phosphorylate tyrosine 192 thereby creating a docking site for their own SH2 domains. Kinase bound to GC may then catalyze phosphorylation of GC or other downstream effectors. Inhibition of PTPs altered GC activity in two ways: it increased both the basal activity and the YC-1- and BAY 41-2272-stimulated activity two-fold, and it reduced the sensitivity of the enzyme towards NO. The detailed mechanism of action is still unknown, but experiments using the mutant β1[Y192F] demonstrated that residue 192 is not responsible for these effects.
Another major focus of this thesis was the identification of novel GC binding proteins. Using the yeast two-hybrid approach, the carboxy-terminal portion of a protein named AGAP1 (amino acid (aa) 399-804) was found to interact with the catalytic domain of α1 (aa 466-690) and with the regulatory domain of β1 (aa 1-348). Human AGAP1 is a multidomain protein of 804 amino acids with a calculated molecular mass of 89,1 kDa comprising an Arf-GAP (GAP:GTPase activating protein), a putative GTPase domain, two Ankyrin repeats and a PHdomain. Co-precipitation experiments using lysates from mammalian cells overexpressing both binding partners confirmed the interaction of AGAP1 with the GC subunits. Immunofluorescence analyses demonstrated that AGAP1 co-localizes with GC in the cytoplasm of COS-1 cells.
In Northern blots, AGAP1 mRNA was detected in various human and murine tissues showing a comparable expression pattern described for the mRNA of α1 and β1. Using an AGAP1-specific antibody, endogenous protein was precipitated from lysates of HEK-293 cells derived from human embryonic kidney. The same antibody efficiently cross-reacted with the rat homologue (rAGAP1) and immunoprecipitated endogenous rAGAP1 from lysates of PC-12 cells, aorta and heart. The molecular mass of rAGAP1 is larger than that of the human protein, possibly due to an additional exon present in the rat genome. Like β1, AGAP1 is a substrate for tyrosine kinases. Phosphorylation of AGAP1 was detected after inhibition of PTPs or by coexpression of Src. Furthermore, the kinase inhibitor PP2 strongly impaired phosphorylation of AGAP1 after pervanadate treatment suggesting that tyrosine kinases of the Src family are involved. Measurements of cGMP production showed that AGAP1 has no influence on the activity of NO-sensitive GC. Interestingly, inhibition of PTPs potently increased the complex formation between AGAP1 and GC indicating that the interaction between these two proteins is modulated by reversible tyrosine phosphorylation. Whether this effect is due to the phosphorylation of AGAP1 or GC is still unknown. AGAP1 associates with endosomes and exposes Arf-GAP activity towards Arf1 and Arf5 which are involved in vesicular transport. Thus, one may hypothesize that binding of α1β1 to AGAP1 targets GC to distinct subcellular compartments in close proximity to cGMP-dependent effectors, thereby optimizing cGMP generation and fostering cGMP-driven actions.
Taken together, these results demonstrate that beside the modulation of GC by NO the enzyme is regulated by tyrosine phosphorylation and interaction with AGAP1.
CFTR ist ein Chloridkanal, der bei der rezessiven Erbkrankheit Mukoviszidose defekt ist. Es ist bekannt, dass CFTR durch Proteinkinasen aktiviert und seine Aktivität durch Nukleotide reguliert wird. Die Regulation von CFTR wurde unter zwei verschiedenen Gesichtspunkten untersucht. Zum einen wurden Experimente durchgeführt, die Aufschluss über die Beteiligung der Nukleotidbindedomänen beim Öffnen und Schließen des Kanals und über die Notwendigkeit einer ATP-Hydrolyse geben sollten. Zum anderen wurde untersucht, ob neben der durch Proteinkinasen vermittelten Aktivierung von CFTR ein alternativer Prozess existiert. Hierbei wurde ein Regulationsmechanismus entdeckt, der eine Proteinkinase-unabhängige Aktivierung von CFTR durch Phosphatidylinositolphosphate ermöglicht.
Humaner CFTR wurde in Oozyten des Krallenfrosches Xenopus laevis heterolog exprimiert und mit der Patch-Clamp-Methode untersucht. Stationäre und zeitaufgelöste Ströme des CFTR-Wildtyps wurden mit mutierten CFTR-Kanälen verglichen. Das Lysin im Walker AMotiv ist an der Koordinierung des γ-Phosphats von MgATP bei der Hydrolyse beteiligt, so dass Walker A-Mutationen die ATP-Bindung und –Hydrolyse von ATPasen beeinflussen. In dieser Arbeit wurden Walker A-Mutanten untersucht, die eine Substitution des konservierten Lysins innerhalb der Walker A-Sequenz der NBD1 (K464A) oder beider Nukleotidbindedomänen (K464A/K1250A) aufwiesen. Da die Öffnungsgeschwindigkeit der Mutante K464A kaum einen Unterschied zu der des Wildtyps aufzeigte, die Mutante K1250A jedoch das Öffnen stark verlangsamte, wurde gefolgert, dass keine Hydrolyse von ATP an der NBD1 für die Öffnung nötig ist. Während Wildtyp-Kanäle auf eine gleichzeitige Applikation von ATP und AMP-PNP, einem nichthydrolysierbaren ATP-Analogon, mit einem verlängerten Offenhalten der Kanäle („locked open“–Effekt) reagierten, das sich in einem langsamen Schließen der Kanäle äußerte, konnte bei K464A-Mutanten dieser Effekt nicht beobachtet werden. Außerdem erfolgte das Schließen der Doppelmutante K464A/K1250A im Vergleich zur Einzelmutante K1250A nach MgATP-Entzug schneller. Daraus wurde geschlossen, dass die NBD1 auf das durch die NBD2 vermittelte Offenhalten des Kanals, möglicherweise durch eine direkte Interaktion, regulierend einwirkt, bevor letztere den Kanal wieder schließt. Da auch ein Öffnen und Schließen des CFTR-Kanals unter Mg2+-freien Bedingungen zu beobachten war, unter denen keine ATP-Hydrolyse erfolgen kann, konnte die Notwendigkeit einer ATP-Hydrolyse bezüglich des Kanalgatings ausgeschlossen werden. Ein Einwirken der NBD1 auf das Offenhalten der Kanäle durch die NBD2 war unter nicht-hydrolytischen Bedingungen anhand des Vergleichs der Schließkinetiken von WT und Mutante K464A nicht feststellbar, so dass eine direkte Interaktion beider Nukleotidbindedomänen wahrscheinlich ausgeschlossen werden kann.
Im zweiten Teil dieser Arbeit wurde der Effekt des Phospholipids Phosphatidylinositol-4,5-bisphosphat (PIP2) auf CFTR-Kanäle untersucht. Die Applikation von PIP2 und MgATP zu unphosphorylierten CFTR-Kanälen zeigte einen deutlichen Stromanstieg, der einem Chloridstrom entsprach. Einzelkanaluntersuchungen ergaben, dass durch PKA induzierte Kanäle und Einzelkanäle, die durch PIP2 aktiviert wurden, dieselbe Leitfähigkeit von ~5 pS besaßen. Somit konnte eine PIP2-induzierte Aktivität endogener Chloridkanäle ausgeschlossen und ein Einfluss des Phospholipids auf CFTR-Chloridkanäle bewiesen werden, der zudem ATP-abhängig war.
Neben PIP2, welches den stärksten Effekt auf die CFTR-Aktivität zeigte, konnten auch Phosphatidylinositol (PI) und Phosphatidylinositol-4-monophosphat (PIP), sowie Arachidonsäure unphosphorylierte CFTR-Kanäle aktivieren. Damit wurde gezeigt, dass der Effekt des Signalanstiegs durch Phosphatidylinositole abhängig von der Struktur des Moleküls war, also von der Anzahl der Phosphatgruppen am Inositolring und der Fettsäurezusammensetzung des Phospholipids.
Experimente, die unter Mg 2+-freien Bedingungen durchgeführt wurden, so dass eine Phosphorylierungsreaktion durch Kinasen ausgeschlossen werden konnte, zeigten dennoch eine PIP2-vermittelte Aktivierung von unphosphorylierten CFTR-Kanälen. Auch eine Substitution des nicht-hydrolysierbaren ATP-Analogons AMP-PNP anstelle von ATP erlaubte die Öffnung unphosphorylierter CFTR-Kanäle. Mit diesen beiden Ergebnissen wurde gezeigt, dass eine PIP2-vermittelte Aktivierung von unphosphorylierten CFTR-Kanälen unabhängig von einer Proteinphosphorylierung ist.
Physiologisch betrachtet könnte man sich vorstellen, dass über die Aktivierung von Lipidkinasen die Synthese von PIP2 über PI und PIP stimuliert wird, so dass das Phospholipid, wie für viele Ionenkanäle und Transporter gezeigt, eine direkte Interaktion mit dem Protein eingeht. Eine ATP-abhängige Synthese von PIP2 in Makropatches an Xenopus-Oozyten durch endogene Lipidkinasen könnte eine mögliche Erklärung für den gezeigten ATP-abhängigen Anstieg des CFTR-Signals sein.
In dieser Arbeit wurde bei CFTR-Kanälen zum ersten Mal ein alternativer Regulationsmechanismus über Phosphatidylinositolphosphate identifiziert, der Proteinkinaseunabhängig ist und der möglicherweise über eine direkte Interaktion zwischen dem Phospholipid und dem Protein vermittelt wird.
Die HIV-Infizierung von Zellkulturen in vitro ist essentiell für das Verstehen der Kinetik der Virusreplikation, für die Aufdeckung von Resistenzentwicklungen gegenüber antiretroviraler Medikamente und für die Entwicklung neuer antiretroviraler Therapiestrategien. Voraussetzung hierfür ist ein geeignetes Monitoring der HIV-Infektion von in vitro infizierten Zellen. Die vorliegende Arbeit beschäftigt sich mit dem Monitoring der HIV-Replikation von in vitro infizierten Zellen mittels der Real-Time TaqMan™ PCR. Die Ergebnisse der Real-Time TaqMan™ PCR wurden mit denen eines p24 ELISAs verglichen. Der p24 ELISA diente als etablierte Standardmethode zum Monitoring einer in vitro HIV-Infektion. HUT 78-Zellen wurden in vitro mit vier unterschiedlichen HIV-1 IIIb Infektionsdosen (MOI 0,05; MOI 0,01; MOI 0,002; MOI 0,0005) infiziert. Mittels der Real-Time TaqMan™ PCR wurde die HIV-1 gag cDNA quantifiziert. Mittels ELISA erfolgte die Quantifizierung des HIV-p24. Zusätzlich dazu wurde die Anzahl an proviralen HIV-1 Transkripten in den Zellkulturen mittels der TaqMan™ PCR quantifiziert. Die Quantifizierung der HIV-1 gag cDNA und des p24 ergaben nahezu identische Kurvenverläufe der Infektionskinetiken. Beide Nachweismethoden zeigten vergleichbare Daten bezüglich des exponentiellen Ansteigens und der sich daran anschließenden Plateauphase der HIV-Replikation. Die Sensitivität beider Nachweismethoden war ebenfalls vergleichbar. Ein großer Unterschied lag in den Messbereichen beider Methoden. Bei der Real-Time TaqMan™ PCR konnte eine Linearität über 7 log-Stufen
demonstriert werden. Dies hatte den Vorteil, dass die Zellkulturproben vor der Quantifizierung der HIV-1 gag cDNA nicht verdünnt werden mussten. Im Gegensatz dazu war der Messbereich des HIV-p24 ELISAs sehr eng und erforderte in den meisten Fällen eine Verdünnung der Messproben. Bezüglich des Arbeitsaufwandes und der aufkommenden Kosten ergaben sich für die Quantifizierung der HIV-1 gag cDNA mittels der Real-Time TaqMan ™ und für die Quantifizierung des p24 mittels ELISA nahezu identische Werte. Der Verlauf der Werte an proviralen HIV-1 Transkripten ähnelt dem der HIV-1 gag cDNA Kinetik. Mittels der Quantifizierung der proviralen HIV-1 Kopien kann jedoch keine Aussage über die HIV-Replikation getroffen werden. Abschließend ist zu sagen, dass die Real-Time TaqMan™ PCR eine zuverlässige und sensitive Methode ist, eine HIV-1 Replikation von in vitro infizierten Zellen zu quantifizieren und den Replikationsverlauf zu beschreiben. Die Real-Time TaqMan™ PCR stellt eine alternative Methode zum HIV-p24 ELISA dar, um eine in vitro HIV-Replikation zu dokumentieren.
In der vorliegenden in vitro-Studie wurde der Einfluß von zwei Insertionstechniken auf die zervikale Randqualität von Klasse-II-Kompositrestaurationen unter Zuhilfenahme von Kunststoffmatrizen und Lichtkeilen untersucht. Als weiteren Versuchsparameter wählte man zur Adaptation des Füllungsmaterials neben herkömmlichen Metallinstrumenten zusätzlich modifizierte Biberschwanzpinsel.
Die Photodynamische Therapie (PDT) wird mittlerweile bei einer Vielzahl von Erkrankungen eingesetzt. Ziel dieser Dissertation war die nähere Untersuchung der Kinetik und der Wirkmechanismen der Photosensibilisatoren Methylenblau und disulfoniertem Aluminiumphthalocyanin. Zuerst klärten wir die Frage der Toxizität des Methylenblaus. Wir ermittelten dabei die für die nachfolgenden Versuche nötigen Dosen und Höchstdosen des Methylenblaus in Bezug auf die humane Keratozyten-Linie HaCat und periphere mononukleäre Zellen. Für disulfoniertes Aluminiumphthalocyanin stützten wir uns auf vorhandene Publikationen. Als Lichtquelle benützten wir die PDT Lampe der Firma Waldmann, die ein homogenes Lichtspektrum von 600 bis 700 nm erzeugt, so dass das Wirkungsmaximum aller gängigen Photosensibilisatoren abgedeckt ist. Ausserdem liefert diese Lampe eine gleichmässige Energiedichte über eine größere Fläche, die die Reproduzierbarkeit der Ergebnisse gewährleistet.
In der Arbeit konnte gezeigt werden, dass es für die photodynamische Therapie mit Methylenblau und disulfoniertem Aluminiumphthalocyanin eine Dosis gibt mit der man sowohl Keratinozyten als auch Leukozyten in ihrer Proliferation hemmen kann, ohne eine zytotoxische Wirkung auszulösen. Für Keratinozyten ergab sich dabei ein Anstieg der Proliferationshemmung bei 5 µM Methylenblau und 2stündiger Inkubationszeit bei 200 J/cm², die Toxizität zeigte sich bei 5µM Methylenblau und 4stündiger Inkubationszeit und bereits bei 100 J/cm² maximal. Demgegenüber ergab sich bei stimulierten Leukozyten bereits bei 1µM Methylenblau und 2 Stunden Inkubationszeit ein starker proliferativer Effekt, bei 5µM Methylenblau und 2 Stunden Inkubationszeit zeigte sich dagegen ein deutliche Toxizität. Hierbei fand sich ab 0,5 J/cm² eine zunehmende Proliferationshemmung und Toxizität. Insgesamt war bei Keratinozyten die Differenz bzgl. antiproliferativer und zytotoxischer Dosis geringer als bei Leukozyten. Letztere zeigten sich dabei auch empfindlicher, besonders wenn man die Leukozyten zuvor stimulierte. Daraus ergibt sich ein Potential für den therapeutischen Einsatz der Photodynamischen Therapie bei entzündlichen Dermatosen.
Als mögliche Wege indirekt toxischer Wirkung wurde in der Folge die Stimulation des nukleären Transkriptionsfaktors NF-ΚB, die Bildung von Stickstoffmonoxid (NO) und der protektive Effekt von α-Liponsäure untersucht. Dass der nukleäre Transkriptionsfactor NF-ΚB durch Photodynamische Therapie mit Methylenblau aktiviert werden kann, ist bereits gezeigt worden, so dass wir diese Versuche nicht wiederholten. Die Photodynamische Therapie mit dem Photosensibilisator Methylenblau wirkt also sowohl direkt als auch indirekt toxisch. In unseren Versuchen beschränkten wir uns im weiteren auf die Wirkung des Photosensibilisators disulfoniertes Aluminiumphthalocyanin auf den nukleären Transkriptionsfaktor NF-ΚB. Mittels Gelelektrophorese konnten wir keine Aktivierung von NF-ΚB zeigen. Die Photodynamische Therapie mit dem Photosensibilisator disulfoniertem Aluminiumphthalocyanin wirkt also nur auf direkt toxischem Weg. Bezüglich der Stickstoffmonoxid-Bildung fand sich bei beiden Photosensibilisatoren in den von uns verwendeten Konzentrationen und Inkubabionszeiten kein Nitritnachweis. Auch bei α-Liponsäure ergab sich bei Keratinozyten weder ein pro- noch antiproliferativer Effekt und somt kein Anhalt auf eine indirekte toxische Wirkung.
Der klinische Einsatz der Photodynamischen Therapie erscheint vor dem Hintergrund der erarbeiteten Daten bei entzündlichen Dermatosen möglich, weil infiltrierende aktivierte Leukozyten sensibler gegenüber PDT sind als das umliegende Gewebe, wie hier beispielhaft für Keratinozyten gezeigt wurde.
Um die Rolle von potentiell schmerzauslösenden Substanzen bei der Entstehung von menschlichem Muskelschmerz und von muskulärer Hyperalgesie zu beurteilen, wurde bei dieser Arbeit das DOMS Muskelschmerzmodell und das hypertone NaCl Muskelschmerzmodell in Kombination mit der Mikrodialysetechnik verwendet. Dabei wurden bei 10 gesunden, untrainierten Probanden metabolische Änderungen im Glucosestoffwechsel (Glucose, Laktat) und Fettstoffwechsel (Glycerol), Änderung der Glutamat Freisetzung und Änderungen von inflammatorischen Mediatoren (PGE2, NO, Substanz P) in den schmerzhaften und in den Kontrollmuskeln untersucht. Studienbegleitend erfolgte zur Beurteilung der Effektivität der Übungen und des dabei entstandenen Muskelschadens die Bestimmung von Serum CK, Serum Laktat, des Muskelumfangs und der Muskeldruckschmerzschwelle (PPT). Die Probanden gaben regelmäßig die Schmerzintensität auf einer visuellen Analogskala (VAS) an. Die DOMS Muskelschmerzen wurden 24 Stunden vor dem Beginn der Mikrodialyse durch konzentrisch/ exzentrische Kontraktionen der Wadenmuskulatur im Verum Bein ausgelöst. Während der Mikrodialyse erfolgte die Schmerzstimulation der Wadenmuskulatur durch Plantar- und Dorsalflexion des Fußes. Die Schmerzauslösung beim hypertonen NaCl Modell geschah während der Mikrodialyse durch sequentielle Injektionen von hypertoner NaCl Lösung ( 5 ∗ 200 µl 5.8% NaCl Lösung in 2 Minuten Intervallen) in den Bizepsmuskel am Oberarm. Die Zuordnung der Behandlung (Verum vs. Kontrollmuskel) erfolgte jeweils nach dem Zufallsprinzip.
Direkt nach den DOMS Übungen kam es zu einem signifikanten Anstieg von Laktat im Serum, nach 24 Stunden zu einem signifikanten Ansteigen der CK Aktivität und einer Zunahme des Muskelumfangs. Mit beiden Modellen konnte zuverlässig ein Muskelschmerz erzeugt werden, wobei die Schmerzintensität bei wiederholter Stimulierung abnahm und dies im DOMS Modell stärker ausgeprägt war. Eine mechanische Hyperalgesie konnte nur an den Waden beobachtet werden, die dort aber beidseitig auftrat und damit eine Art „zentraler Übererregbarkeit“ vermuten lässt. Die Dialysatkonzentrationen von Glutamat, PGE2 und Substanz P zeigten aufgrund der Schmerzstimulation im DOMS Bein einen lokalen Anstieg (Glutamat 125 ± 20 µM [p=0.005], PGE2 239 ± 45 pg/ml, Substanz P 64 ± 11 pg/ml). Dabei traten im Kontrollbein keine signifikanten Änderungen auf. Während der Mikrodialyseperiode war die NO Konzentration im DOMS Bein signifikant geringer als im Kontrollbein (p = 0.02), zeigte dabei aber keine Beeinflussung durch die Schmerzstimulation. Gleichzeitig war dabei die Laktatkonzentration im DOMS Bein im Vergleich zum Kontrollbein erhöht. Die Glucose- und Glycerolkonzentrationen wiesen durch die Schmerzauslösung keine bedeutenden Veränderungen auf.
Im Bizepsmuskel kam es infolge der hypertonen NaCl Injektionen zu einem signifikanten Anstieg der Glutamat Konzentration im Dialysat (50 ± 3 µM, p = 0.003), wobei diese im Kontrollmuskel konstant blieb. Die Injektionen hatten aber keinen Einfluss auf die Werte von Glucose, Laktat, Glycerol, NO, PGE2, des Muskelumfangs und der PPT.
Möglicherweise ist ein inflammatorischer Prozess an den peripheren Mechanismen der Muskelschmerzentstehung beim DOMS Modell beteiligt. Die Injektion von hypertoner NaCl Lösung löst den Muskelschmerz vermutlich direkt durch die hohe extrazelluläre Natrium Konzentration aus, wobei es zu einer Depolarisation der Nozizeptormembran mit einer nachfolgenden Glutamat Freisetzung aus den aktivierten Nozizeptoren kommt. Die Vorteile dieses Modells sind die Wiederholbarkeit und die kurze Dauer des Muskelschmerzes. Die dem ausgelösten Schmerz zugrundeliegenden Mechanismen ähneln jedoch nicht den Mechanismen die dem klinischen Muskelschmerz zugrunde liegen. Deshalb könnte es sein, dass die Bedeutungen der Ergebnisse aus diesem Modell relativ beschränkt sind und die Nützlichkeit insbesondere für pharmakologische Studien damit auch eingeschränkt ist.
Der Neurotransmitter Glutamat ist an den peripheren Mechanismen der Muskelschmerzentstehung beteiligt, da die Glutamat Freisetzung direkt mit dem Muskelschmerz beim DOMS Modell und beim Hypertonen NaCl Modell assoziiert war. Die beim DOMS Modell erhöhten Konzentrationen von Laktat, PGE2, sowie die Änderungen von Substanz P und die erniedrigten NO Konzentrationen könnten auch zu der Entstehung von Muskelschmerz beitragen.
Der beobachtete Rückgang der Schmerzintensität bei wiederholter Stimulierung lässt auf eine Art „Gewöhnung“ schließen, die bei Anwendung des DOMS Modells für pharmakologische Untersuchungen einen Nachteil darstellen könnte.
Ziel: Anliegen des Kooperationsprojektes der Klinik für Nephrologie und der Klinik für Psychosomatische Medizin und Psychotherapie ist die internistische und eine umfassende psychologische Untersuchung von152 Lebendnierenspendern, die ihre Niere zwischen 1973 und 2001 in der Universitätsklinik Frankfurt am Main spendeten. Im Rahmen dieser Studie werden aus der oben genannten Arbeitsgruppe heraus, mehrere Arbeiten und Publikationen entstehen. Ziel der vorliegenden Arbeit ist die Untersuchung der 152 Frankfurter Lebendnierenspender in Bezug auf psychosomatische und psychosoziale Aspekte des Erlebens und der Verarbeitung der Lebendnierentransplantation und ihrer Folgen. In der bisherigen empirischen Forschung zu psychischen und psychosomatischen Folgen einer Lebendnierentransplantation wurden beim Spender eher wenige und wenn, dann im Ausmaß begrenzte psychische Komplikationen berichtet. In der Regel sind die psychische Verarbeitung sowie die psycho-sozialen Auswirkungen einer Lebendnierentransplantation insgesamt positiv zu bewerten.
Methode: N= 152 Lebendnierenspender werden internistisch und psychologisch untersucht. Die psychologische Untersuchung verwendet ein breites Spektrum von Erhebungsmethoden. Neben vier standardisierten testpsychologischen Fragebögen wird ein semistrukturiertes ca. einstündiges Interview mit den Spendern geführt. Die vorliegende Arbeit befasst sich gesondert mit dem halbstrukturierten Interview. Die Erlebnisberichte der Spender werden mittels eines eigens erstellten Kategoriensystems ausgewertet.
Ergebnisse: Abschluss der Datenerhebung der vorliegenden Arbeit ist der 15. Februar 2002. Sieben Spender verstarben vor Beginn der Studie, jedoch nicht an den Folgen der Einnierigkeit.Drei Spender waren nicht auffindbar. 19 Spender wurden wegen Wohnsitz im Ausland und/oder Mangel an deutschen Sprachkenntnissen vom psychologischen Interview ausgeschlossen. Von den 123 in Frage kommenden Untersuchungsteilnehmern haben wir mit 100 Spendern Interviews führen können, was einer vergleichsweise hohen Rücklaufquote von 81,3% entspricht. Die meisten Spender trafen ihre Entscheidung sofort (84%) und bereuten ihre Spende im Nachhinein nicht.
Nahezu alle Spender (97%) würden die Entscheidung ihre Niere spenden zu wollen heute wieder treffen. Die meisten Spender bewerten die Spende als ein positives Ereignis vergleichbar mit einer Lebensrettung oder einer Geburt. Einige Spender berichten durch die Spende eine Steigerung ihres Selbstwertgefühls und Selbstbewusstseins erfahren zu haben. 75% der Spender schildern durch die Spende keine Veränderung in der Beziehung zu dem Empfänger erlebt zu haben, bei 23% habe sich die Beziehung verbessert. 3% geben an, die Beziehung zu bestimmten Familienmitgliedern sei nach der Spende schlechter geworden. 3% der Spender bereuen gespendet zu haben. 8% empfanden Druck im Entscheidungsprozess. 5% hatten starke Angst vor der Operation oder dem Leben mit einer Niere. Insgesamt 6% der Spender berichten über langfristige psychische Komplikationen (Verdacht auf: 2% Anpassungsstörung, 2% Angststörung, 1% Depression, 1% Burnout). 11% wünschen sich eine professionelle psychologische Vor- und/oder Nachbetreuung.
Diskussion: Die Ergebnisse der Untersuchung weisen insgesamt auf eine langfristig positive psychische Verarbeitung, sowie auf positive psychosoziale Auswirkungen einer Lebendnierentransplantation hin. Es gibt eine inhomogene Subgruppe mit kleiner Personenanzahl, die negative Erfahrungen mit der Lebendnierenspende machte. Dieser wird gesondert Beachtung geschenkt und die Bereitstellung von adäquaten Beratungs- und Hilfsangeboten diskutiert.
The majority of bacterial membrane-bound NiFe-hydrogenases and formate dehydrogenases have homologous membrane-integral cytochrome b subunits. The prototypic NiFe-hydrogenase of Wolinella succinogenes (HydABC complex) catalyzes H2 oxidation by menaquinone during anaerobic respiration and contains a membrane-integral cytochrome b subunit (HydC) that carries the menaquinone reduction site. Using the crystal structure of the homologous FdnI subunit of Escherichia coli formate dehydrogenase-N as a model, the HydC protein was modified to examine residues thought to be involved in menaquinone binding. Variant HydABC complexes were produced in W. succinogenes, and several conserved HydC residues were identified that are essential for growth with H2 as electron donor and for quinone reduction by H2. Modification of HydC with a C-terminal Strep-tag II enabled one-step purification of the HydABC complex by Strep-Tactin affinity chromatography. The tagged HydC, separated from HydAB by isoelectric focusing, was shown to contain 1.9 mol of heme b/mol of HydC demonstrating that HydC ligates both heme b groups. The four histidine residues predicted as axial heme b ligands were individually replaced by alanine in Strep-tagged HydC. Replacement of either histidine ligand of the heme b group proximal to HydAB led to HydABC preparations that contained only one heme b group. This remaining heme b could be completely reduced by quinone supporting the view that the menaquinone reduction site is located near the distal heme b group. The results indicate that both heme b groups are involved in electron transport and that the architecture of the menaquinone reduction site near the cytoplasmic side of the membrane is similar to that proposed for E. coli FdnI.
In Archaea, bacteria, and eukarya, ATP provides metabolic energy for energy-dependent processes. It is synthesized by enzymes known as A-type or F-type ATP synthase, which are the smallest rotatory engines in nature (Yoshida, M., Muneyuki, E., and Hisabori, T. (2001) Nat. Rev. Mol. Cell. Biol. 2, 669-677; Imamura, H., Nakano, M., Noji, H., Muneyuki, E., Ohkuma, S., Yoshida, M., and Yokoyama, K. (2003) Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 100, 2312-2315). Here, we report the first projected structure of an intact A(1)A(0) ATP synthase from Methanococcus jannaschii as determined by electron microscopy and single particle analysis at a resolution of 1.8 nm. The enzyme with an overall length of 25.9 nm is organized in an A(1) headpiece (9.4 x 11.5 nm) and a membrane domain, A(0) (6.4 x 10.6 nm), which are linked by a central stalk with a length of approximately 8 nm. A part of the central stalk is surrounded by a horizontal-situated rodlike structure ("collar"), which interacts with a peripheral stalk extending from the A(0) domain up to the top of the A(1) portion, and a second structure connecting the collar structure with A(1). Superposition of the three-dimensional reconstruction and the solution structure of the A(1) complex from Methanosarcina mazei Gö1 have allowed the projections to be interpreted as the A(1) headpiece, a central and the peripheral stalk, and the integral A(0) domain. Finally, the structural organization of the A(1)A(0) complex is discussed in terms of the structural relationship to the related motors, F(1)F(0) ATP synthase and V(1)V(0) ATPases.
The signal transducer and activator of transcription (Stat) gene family comprises seven members with similarities in their domain structure and a common mode of activation. Members of this gene family mediate interferon induction of gene transcription and the response to a large number of growth factors and hormones. Extracellular ligand binding to transmembrane receptors causes the intracellular activation of associated tyrosine kinases, phosphorylation of Stat molecules, dimerization, and translocation to the nucleus. Prolactin-induced phosphorylation of Stat5 is a key event in the development and differentiation of mammary epithelial cells. In addition to the crucial phosphorylation at tyrosine 694, we have identified an O-linked N-acetylglucosamine (O-GlcNAc) as another secondary modification essential for the transcriptional induction by Stat5. This modification was only found on nuclear Stat5 after cytokine activation. Similar observations were made with Stat1, Stat3, and Stat6. Glycosylation of Stat5, however, does not seem to be a prerequisite for nuclear translocation. Mass spectrometric analysis revealed a glycosylated peptide in the N-terminal region of Stat5. Replacement of threonine 92 by an alanine residue (Stat5a-T92A) strongly reduced the prolactin induction of Stat5a glycosylation and abolished transactivation of a target gene promoter. Only the glycosylated form of Stat5 was able to bind the coactivator of transcription CBP, an essential interaction for Stat5-mediated gene transcription.
Respiratory chain complex I contains 8-9 iron-sulfur clusters. In several cases, the assignment of these clusters to subunits and binding motifs is still ambiguous. To test the proposed ligation of the tetranuclear iron-sulfur cluster N5 of respiratory chain complex I, we replaced the conserved histidine 129 in the 75-kDa subunit from Yarrowia lipolytica with alanine. In the mutant strain, reduced amounts of fully assembled but destabilized complex I could be detected. Deamino-NADH: ubiquinone oxidoreductase activity was abolished completely by the mutation. However, EPR spectroscopic analysis of mutant complex I exhibited an unchanged cluster N5 signal, excluding histidine 129 as a cluster N5 ligand.
Stable supercomplexes of bacterial respiratory chain complexes III (ubiquinol:cytochrome c oxidoreductase) and IV (cytochrome c oxidase) have been isolated as early as 1985 (Berry, E. A., and Trumpower, B. L. (1985) J. Biol. Chem. 260, 2458-2467). However, these assemblies did not comprise complex I (NADH:ubiquinone oxidoreductase). Using the mild detergent digitonin for solubilization of Paracoccus denitrificans membranes we could isolate NADH oxidase, assembled from complexes I, III, and IV in a 1:4:4 stoichiometry. This is the first chromatographic isolation of a complete “respirasome.” Inactivation of the gene for tightly bound cytochrome c552 did not prevent formation of this supercomplex, indicating that this electron carrier protein is not essential for structurally linking complexes III and IV. Complex I activity was also found in the membranes of mutant strains lacking complexes III or IV. However, no assembled complex I but only dissociated subunits were observed following the same protocols used for electrophoretic separation or chromatographic isolation of the supercomplex from the wild-type strain. This indicates that the P. denitrificans complex I is stabilized by assembly into the NADH oxidase supercomplex. In addition to substrate channeling, structural stabilization of a membrane protein complex thus appears as one of the major functions of respiratory chain supercomplexes.
Arsenic trioxide is a toxic metalloid and carcinogen that is also used as an anticancer drug, and for this reason it is important to identify the routes of arsenite uptake by cells. In this study the ability of hexose transporters to facilitate arsenic trioxide uptake in Saccharomyces cerevisiae was examined. In the absence of glucose, strains with disruption of the arsenite efflux gene ACR3 accumulated high levels of (73)As(OH)(3). The addition of glucose inhibited uptake by approximately 80%. Disruption of FPS1, the aquaglyceroporin gene, reduced glucose-independent uptake by only about 25%, and the residual uptake was nearly completely inhibited by hexoses, including glucose, galactose, mannose, and fructose but not pentoses or disaccharides. A strain lacking FPS1, ACR3, and all genes for hexose permeases except for HXT3, HXT6, HXT7, and GAL2 exhibited hexose-inhibitable (73)As(OH)(3) uptake, whereas a strain lacking all 18 hexose transport-related genes (HXT1 to HXT17 and GAL2), FPS1 and ACR3, exhibited <10% of wild type (73)As(OH)(3) transport. When HXT1, HXT3, HXT4, HXT5, HXT7, or HXT9 was individually expressed in that strain, hexose-inhibitable (73)As(OH)(3) uptake was restored. In addition, the transport of [(14)C]glucose was inhibited by As(OH)(3). These results clearly demonstrate that hexose permeases catalyze the majority of the transport of the trivalent metalloid arsenic trioxide.
Structural and functional characterization of the dimerization region of soluble guanylyl cyclase
(2004)
Soluble guanylyl cyclase (sGC) is a ubiquitous enzyme that functions as a receptor for nitric oxide. Despite the obligate heterodimeric nature of sGC, the sequence segments mediating subunit association have remained elusive. Our initial screening for relevant interaction site(s) in the most common sGC isoenzyme, α1 β1, identified two regions in each subunit, i.e. the regulatory domains and the central regions, contributing to heterodimer formation. To map the relevant segments in the β1 subunit precisely, we constructed multiple N- and C-terminal deletion variants and cotransfected them with full-length α1 in COS cells. Immunoprecipitation revealed that a sequence segment spanning positions 204–408 mediates binding of β1 to α1 The same region of β1[204–408] was found to promote β /β1 homodimerization. Fusion of [204 β1–408] to enhanced green fluorescent protein conferred binding activity to the recipient protein. Coexpression of β1[204–408] with α1 or β1 targeted the sGC subunits for proteasomal degradation, suggesting that β1[204–408] forms structurally deficient complexes with α1 and β1. Analysis of deletion constructs lacking portions of the β1 dimerization region identified two distinct segments contributing to α1 binding, i.e. an N-terminal site covering positions 204–244 and a C-terminal site at 379–408. Both sites are crucial for sGC function because deletion of either site rendered sGC dimerization-deficient and thus functionally inactive. We conclude that the dimerization region of β1 extends over 205 residues of its regulatory and central domains and that two discontinuous sites of 41 and 30 residues, respectively, facilitate binding of β1 to the α1 subunit of sGC.
Nitric oxide (NO)-sensitive soluble guanylyl cyclase (sGC) is the major cytosolic receptor for NO, catalyzing the conversion of GTP to cGMP. In a search for proteins specifically interacting with human sGC, we have identified the multidomain protein AGAP1, the prototype of an ArfGAP protein with a GTPase-like domain, Ankyrin repeats, and a pleckstrin homology domain. AGAP1 binds through its carboxyl terminal portion to both the α1 and β1 subunits of sGC. We demonstrate that AGAP1 mRNA and protein are co-expressed with sGC in human, murine, and rat cells and tissues and that the two proteins interact in vitro and in vivo. We also show that AGAP1 is prone to tyrosine phosphorylation by Src-like kinases and that tyrosine phosphorylation potently increases the interaction between AGAP1 and sGC, indicating that complex formation is modulated by reversible phosphorylation. Our findings may hint to a potential role of AGAP1 in integrating signals from Arf, NO/cGMP, and tyrosine kinase signaling pathways.
Nitric oxide (NO) represents a short lived mediator that pivotally drives keratinocyte movements during cutaneous wound healing. In this study, we have identified p68 DEAD box RNA helicase (p68) from an NO-induced differential keratinocyte cDNA library. Subsequently, we have analyzed regulation of p68 by wound-associated mediators in human and murine keratinocytes. NO, serum, growth factors, and pro-inflammatory cytokines were potent inducers of p68 expression in the cells. p68 was constitutively expressed in the epithelial compartment of murine skin. Upon injury, we found a transient down-regulation of overall p68 protein in wound tissue. However, p68 did not completely disappear during early wound repair, as we found an expression of p68 protein in isolated wound margin tissue 24 h after wounding. Moreover, immunohistochemistry and cell fractionation analysis revealed a restricted localization of p68 in keratinocyte nuclei of the developing epithelium. Accordingly, cultured keratinocytes also showed a nuclear localization of the helicase. Moreover, confocal microscopy revealed a strong localization of p68 protein within the nucleoli of the cells. Functional analyses demonstrated that p68 strongly participated in keratinocyte proliferation and gene expression. Keratinocytes that constitutively overexpressed p68 protein were characterized by a marked increase in serum-induced proliferation and vascular endothelial growth factor expression, whereas down-regulation of endogenous p68 using small interfering RNA markedly attenuated serum-induced proliferation and vascular endothelial growth factor expression. Altogether, our results suggest a tightly controlled expression and nucleolar localization of p68 in keratinocytes in vitro and during skin repair in vivo that functionally contributes to keratinocyte proliferation and gene expression.
The MAM (meprin/A5-protein/PTPmu) domain is present in numerous proteins with diverse functions. PTPμ belongs to the MAM-containing subclass of protein-tyrosine phosphatases (PTP) able to promote cell-to-cell adhesion. Here we provide experimental evidence that the MAM domain is a homophilic binding site of PTPμ. We demonstrate that the MAM domain forms oligomers in solution and binds to the PTPμ ectodomain at the cell surface. The presence of two disulfide bridges in the MAM molecule was evidenced and their integrity was found to be essential for MAM homophilic interaction. Our data also indicate that PTPμ ectodomain forms oligomers and mediates the cellular adhesion, even in the absence of MAM domain homophilic binding. Reciprocally, MAM is able to interact homophilically in the absence of ectodomain trans binding. The MAM domain therefore contains independent cis and trans interaction sites and we predict that its main role is to promote lateral dimerization of PTPμ at the cell surface. This finding contributes to the understanding of the signal transduction mechanism in MAM-containing PTPs.
Supersilylated tetrachlorodigermane (tBu3Si)Cl2GeGeCl2(SitBu3) and trigermoxetane (tBu3Si)3Ge3Cl3O
(2004)
In contrast to the tetrachlorodigermane (tBu3Si)Cl2Ge-GeCl2(SitBu3), the cis,transcyclotrigermane (tBu3SiGeCl)3 is sensitive to oxygen. Its treatment with O2 at ambient temperature leads to the trigermoxetane (tBu3Si)3Ge3Cl3O. According to an X-ray structure analysis of single crystals consisting of cocrystallized (tBu3Si)3Ge3Cl3O and (tBu3Si)Cl2Ge-GeCl2(SitBu3) the trigermaoxetane contains an almost planar Ge3O-ring while the tetrachlorodigermane (tBu3Si)Cl2Ge- GeCl2(SitBu3) possesses a Si-Ge-Ge-Si chain which is exactly all trans,
The major light-harvesting complex (LHC-II) of higher plants plays a crucial role in capturing light energy for photosynthesis and in regulating the flow of energy within the photosynthetic apparatus. Native LHC-II isolated from plant tissue consists of three isoforms, Lhcb1, Lhcb2, and Lhcb3, which form homo- and heterotrimers. All three isoforms are highly conserved among different species, suggesting distinct functional roles. We produced the three LHC-II isoforms by heterologous expression of the polypeptide in Escherichia coli and in vitro refolding with purified pigments. Although Lhcb1 and Lhcb2 are very similar in polypeptide sequence and pigment content, Lhcb3 is clearly different because it lacks an N-terminal phosphorylation site and has a higher chlorophyll a/b ratio, suggesting the absence of one chlorophyll b. Low temperature absorption and fluorescence emission spectra of the pure isoforms revealed small but significant differences in pigment organization. The oligomeric state of the pure isoforms and of their permutations was investigated by native gel electrophoresis, sucrose density gradient centrifugation, and SDS-PAGE. Lhcb1 and Lhcb2 formed trimeric complexes by themselves and with one another, but Lhcb3 was able to do so only in combination with one or both of the other isoforms. We conclude that the main role of Lhcb1 and Lhcb2 is in the adaptation of photosynthesis to different light regimes. The most likely role of Lhcb3 is as an intermediary in light energy transfer from the main Lhcb1/Lhcb2 antenna to the photosystem II core.
The transporter associated with antigen processing (TAP1/2) translocates cytosolic peptides of proteasomal degradation into the endoplasmic reticulum (ER) lumen. A peptide-loading complex of tapasin, major histocompatibility complex class I, and several auxiliary factors is assembled at the transporter to optimize antigen display to cytotoxic T-lymphocytes at the cell surface. The heterodimeric TAP complex has unique N-terminal domains in addition to a 6 + 6-transmembrane segment core common to most ABC transporters. Here we provide direct evidence that this core TAP complex is sufficient for (i) ER targeting, (ii) heterodimeric assembly within the ER membrane, (iii) peptide binding, (iv) peptide transport, and (v) specific inhibition by the herpes simplex virus protein ICP47 and the human cytomegalovirus protein US6. We show for the first time that the translocation pore of the transporter is composed of the predicted TM-(5-10) of TAP1 and TM-(4-9) of TAP2. Moreover, we demonstrate that the N-terminal domains of TAP1 and TAP2 are essential for recruitment of tapasin, consequently mediating assembly of the macromolecular peptide-loading complex.
The purification and functional reconstitution of a five-component oligopeptide ATP-binding cassette transporter with a remarkably wide substrate specificity are described. High-affinity peptide uptake was dependent on liganded substrate-binding protein OppA, which interacts with the translocator OppBCDF with higher affinity than unliganded OppA. Transport screening with combinatorial peptide libraries revealed that (i) the Opp transporter is not selective with respect to amino acid side chains of the transported peptides; (ii) any peptide that can bind to OppA is transported via Opp, including very long peptides up to 35 residues long; and (iii) the binding specificity of OppA largely determines the overall transport selectivity.
The mode of the antitumoral activity of multimutated oncolytic herpes simplex virus type 1 G207 has not been fully elucidated yet. Because the antitumoral activity of many drugs involves the inhibition of tumor blood vessel formation, we determined if G207 had an influence on angiogenesis. Monolayers of human umbilical vein endothelial cells and human dermal microvascular endothelial cells, but not human dermal fibroblasts, bronchial epithelial cells, and retinal glial cells, were highly sensitive to the replicative and cytotoxic effects of G207. Moreover, G207 infection caused the destruction of endothelial cell tubes in vitro. In the in vivo Matrigel plug assay in mice, G207 suppressed the formation of perfused vessels. Intratumoral treatment of established human rhabdomyosarcoma xenografts with G207 led to the destruction of tumor vessels and tumor regression. Ultrastructural investigations revealed the presence of viral particles in both tumor and endothelial cells of G207-treated xenografts, but not in adjacent normal tissues. These findings show that G207 may suppress tumor growth, in part, due to inhibition of angiogenesis.
We study issues of duality in 3D field theory models over a canonical noncommutative spacetime and obtain the noncommutative extension of the self-dual model induced by the Seiberg–Witten map. We apply the dual projection technique to uncover some properties of the noncommutative Maxwell–Chern–Simons theory up to first-order in the noncommutative parameter. A duality between this theory and a model similar to the ordinary self-dual model is established. The correspondence of the basic fields is obtained and the equivalence of algebras and equations of motion are directly verified. We also comment on previous results in this subject.
We perform a study of the possible existence of hybrid stars with color superconducting quark cores using a specific hadronic model in a combination with an NJL-type quark model. It is shown that the constituent mass of the non-strange quarks in vacuum is a very important parameter that controls the beginning of the hadron–quark phase transition. At relatively small values of the mass, the first quark phase that appears is the two-flavor color superconducting (2SC) phase which, at larger densities, is replaced by the color-flavor locked (CFL) phase. At large values of the mass, on the other hand, the phase transition goes from the hadronic phase directly into the CFL phase avoiding the 2SC phase. It appears, however, that the only stable hybrid stars obtained are those with the 2SC quark cores.