Biologische Hochschulschriften (Goethe-Universität)
Filtern
Erscheinungsjahr
Dokumenttyp
- Dissertation (847)
- Wissenschaftlicher Artikel (12)
- Ausgabe (Heft) zu einer Zeitschrift (2)
- Bachelorarbeit (1)
- Diplomarbeit (1)
Volltext vorhanden
- ja (863)
Gehört zur Bibliographie
- nein (863)
Schlagworte
- Gentherapie (7)
- NMR-Spektroskopie (6)
- gene therapy (6)
- Elektrophysiologie (5)
- Molekularbiologie (5)
- RNA (5)
- Schmerz (5)
- Apoptosis (4)
- Arzneimitteldesign (4)
- Carotinoide (4)
- Computational chemistry (4)
- Cytochromoxidase (4)
- Docking (4)
- Immunologie (4)
- Inhibition (4)
- Metabolic Engineering (4)
- Mitochondria (4)
- Mitochondrium (4)
- Proteine (4)
- Altern (3)
- Ameisen (3)
- Angiogenese (3)
- Biodiversität (3)
- Biotechnologie (3)
- Cochlea (3)
- DPOAE (3)
- Elektronentransfer (3)
- Evolution (3)
- Genexpression (3)
- Genregulation (3)
- HIV (3)
- Heterologe Genexpression (3)
- Krebs (Medizin) (3)
- Membranprotein (3)
- Mongolische Rennmaus (3)
- Paracoccus denitrificans (3)
- Photosynthese (3)
- Phylogenie (3)
- Proteinfaltung (3)
- RNS (3)
- Saccharomyces cerevisiae (3)
- Screening (3)
- Signaltransduktion (3)
- Strukturaufklärung (3)
- Transkriptionsfaktor (3)
- Virtual Screening (3)
- West Africa (3)
- Westafrika (3)
- Wirkstoff-Rezeptor-Bindung (3)
- Yarrowia lipolytica (3)
- Zellkultur (3)
- Zellzyklus (3)
- angiogenesis (3)
- apoptosis (3)
- cell cycle (3)
- microRNA (3)
- vasculogenesis (3)
- zebrafish (3)
- 5-Lipoxygenase (2)
- Allergie (2)
- Apoptose (2)
- Aptamer (2)
- Archaea (2)
- Archaebakterien (2)
- Arzneimittel (2)
- Belize (2)
- Biochemie (2)
- Bioinformatik (2)
- Biomarker (2)
- Biomechanik (2)
- Biosynthese (2)
- Brustkrebs (2)
- C. elegans (2)
- Chemie und Pharmazie (2)
- Drug Design (2)
- Drug design (2)
- Eisenzeit (2)
- Electron transfer (2)
- Electrophysiology (2)
- Elektronenmikroskopie (2)
- Endothelin (2)
- Entzündung (2)
- Enzym (2)
- Epigenetik (2)
- Fluoreszenz (2)
- Frankfurt <Main> / Universität / Fachbereich Biochemie (2)
- G-Protein gekoppelte Rezeptoren (2)
- G-Protein-gekoppelter Rezeptor (2)
- GPCR (2)
- Genome (2)
- Gentransfer (2)
- Guanylatcyclase (2)
- Hitzeschock-Proteine (2)
- Hitzestress (2)
- Hyperalgesie (2)
- Hören (2)
- Hörrinde (2)
- In silico-Methode (2)
- Iron Age (2)
- Ischämie (2)
- Kaliumkanal (2)
- Kinetik (2)
- Konformationsänderung (2)
- Lentiviren (2)
- Licht-Sammel-Komplex (2)
- Ligand (2)
- MHC Klasse I (2)
- Magnetische Kernresonanz (2)
- Melatonin (2)
- Membranproteine (2)
- Messung (2)
- Methanbakterien (2)
- Mikroplastik (2)
- Mittelhirn (2)
- Molekulardesign (2)
- Molekulardynamik (2)
- Molekulare Bioinformatik (2)
- Molekülstruktur (2)
- NADH-Dehydrogenase <Ubichinon> (2)
- NADH:ubiquinone oxidoreductase (2)
- NMR (2)
- NMR spectroscopy (2)
- Neuronal Differentiation (2)
- Neuronales Netz (2)
- Onkologie (2)
- Pflanzenstress (2)
- Photolabile Schutzgruppen (2)
- Pichia pastoris (2)
- Plant stress (2)
- Proteomanalyse (2)
- Protonentransfer (2)
- Retrotransposition (2)
- Rotkehlchen (2)
- Schmerzforschung (2)
- Schülerlabor (2)
- Small RNA (2)
- Spektroskopie (2)
- Stress (2)
- Systematik (2)
- Südostasien (2)
- Thermus thermophilus (2)
- Tierphysiologie (2)
- Translokation (2)
- Tropischer Regenwald (2)
- Ubihydrochinon-Cytochrom-c-Reductase (2)
- Umweltfaktor (2)
- Verbreitung (2)
- Verhalten (2)
- Verhaltensbiologie (2)
- Virtuelles Screening (2)
- Wirkstoffdesign (2)
- Xenorhabdus (2)
- Yeast-Two-Hybrid-System (2)
- Zellskelett (2)
- ageing (2)
- auditory cortex (2)
- caging (2)
- conservation (2)
- endothelial cell (2)
- endothelium (2)
- extracellular matrix (2)
- fungi (2)
- gene expression (2)
- hearing (2)
- immunology (2)
- inflammation (2)
- microtubule-targeting agents (2)
- mitochondria (2)
- molecular biology (2)
- mongolian gerbil (2)
- photolabile Schutzgruppe (2)
- sRNA (2)
- transcription factors (2)
- vascular endothelial cells (2)
- virtual screening (2)
- yeast (2)
- Ökotoxikologie (2)
- 19F NMR shifts for fluoroarenes (1)
- 2-Hydroxylase (1)
- 2-Photonen (1)
- 2-hydroxylase (1)
- 3-alkylphenols (1)
- 5-lipoxygenase (1)
- 6-methylsalicylic acid synthase (1)
- A-Typ-ATPasen (1)
- A1AO ATPase (1)
- ABC-Transporter (1)
- ADAM10 (1)
- ADAM15 (1)
- ADAMTS-13 (1)
- AF4 (1)
- AFLPs (1)
- ALE (1)
- ATP-Binding Cassette Transporter (ABC) (1)
- AVA (1)
- Absorptionsspektroskopie (1)
- Acetogenic bacteria (1)
- Acetylcholin (1)
- Actin-bindende Proteine (1)
- Acylimin Sulfonylimin (1)
- Adaptation (1)
- Adenom (1)
- Adrenodoxine (1)
- Aedes albopictus (1)
- Agapetes (1)
- Ageing (1)
- Agelas (1)
- Aktives Zentrum (1)
- Aktuelle Motivation (1)
- Akute lymphatische Leukämie (1)
- Aldosteron (1)
- Aldosteronantagonist (1)
- Alignment <Biochemie> (1)
- Alkaloide (1)
- Allergy (1)
- Allosterischer Effektor (1)
- Alzheimer's disease (1)
- Alzheimer-Krankheit (1)
- Ameisenpflanzen (1)
- Aminobuttersäure <gamma-> (1)
- Aminosäurensequenz (1)
- Amphisphaeriales (1)
- Amplitudenmodulation (1)
- Amyloid (1)
- Anabolismus (1)
- Ananasgewächse (1)
- Angewandte Botanik (1)
- Angiogenesis (1)
- Animal Behavior (1)
- Anisotropy (1)
- Anpassung (1)
- Anthrakologie (1)
- Anthropologie (1)
- Anthropometrie (1)
- Antikörperdetektion (1)
- Antisense-Oligonucleotide (1)
- Aphanomyces astaci (1)
- Apolipoprotein E (1)
- Aptamere (1)
- Aquatisches Ökosystem (1)
- Archäobotanik (1)
- Aromatase (1)
- Artbildung (1)
- Artensterben (1)
- Artificial kidney (1)
- Arzneimittel / Zulassung (1)
- Arzneimittelanalogon (1)
- Arzneimittelprüfung (1)
- Ascidien (1)
- Asian Tiger Mosquito (1)
- Asiatische Tigermücke (1)
- Assembly (1)
- Ataxin-2 (1)
- Atmungskette (1)
- Atoll (1)
- Aufreinigung (1)
- Ausbreitung (1)
- Autism Spectrum Disorder (1)
- Autoproteolyse (1)
- Außerschulisches Lernen (1)
- Axoninitialsegment (1)
- Azide (1)
- B-Lymphozyt (1)
- B-Zell-Lymphom (1)
- BH3 mimetics (1)
- BH3-Mimetika (1)
- BMI (1)
- BRG1 (1)
- Baculovirussystem (1)
- Baleen whales (1)
- Bartonella henselae (1)
- Batten disease (1)
- Bayes-Lernen (1)
- Bildungswahrscheinlichkeit (1)
- Bindestelle (1)
- Bioakkumulation (1)
- Bioartificial kidney (1)
- Bioassay-guided fractionation (1)
- Biochemische Analyse (1)
- Biochemistry (1)
- Biodiversity (1)
- Bioenergetik (1)
- Biogeographie (1)
- Biogeography (1)
- Biokonzentration (1)
- Biologie (1)
- Biologische Uhr (1)
- Biomagnifikation (1)
- Biomolekül (1)
- Biophysical Chemistry (1)
- Biotechnologische Industrie (1)
- Biotechnology (1)
- Biotest (1)
- Biotic interactions (1)
- Bivalven-Vergesellschaftung (1)
- Black Lipid Membrane (1)
- Blech- und Metallwarenindustrie (1)
- Blitzlicht (1)
- Blitzlicht-Photolyse (1)
- Blood-Brain Barrier (1)
- Blut (1)
- Blut-Hirn-Schranke (1)
- Blutgefäßsystem (1)
- Bodycomposition (1)
- Bodyfat (1)
- Borrelia burgdorferi (1)
- Boswelliasäuren (1)
- Bovidae (1)
- Bovines Herpesvirus 1 (1)
- Breast Cancer (1)
- Breast cancer (1)
- Bremsen (1)
- Brevibacterium flavum (1)
- Brevibacterium linens (1)
- Brieftaube ; Orientierungsverhalten ; Flugdatenregistriergerät ; GPS <Satellitengeodäsie> (1)
- Broken symmetry (1)
- Bromeliaceae (1)
- Bungarus (1)
- Bungarus niger (1)
- Bungarus walli (1)
- Burkina Faso (1)
- C peptide (1)
- C-Peptid (1)
- CDK1 Kinase (1)
- CHO (1)
- CIDNP (1)
- CLPXP-Protease (1)
- CNGA3 (1)
- CNGB1 (1)
- CNV 16p11.2 (1)
- CRASP-Proteine (1)
- CRISPR/Cas9 (1)
- CSOs (1)
- Cadherine ; Proteine ; Struktur-Aktivitäts-Beziehung (1)
- Caenohalictini (1)
- Caenorhabditis elegans (1)
- Calcium activated potassium channels (1)
- Calcium-aktivierte (1)
- Calmodulin (1)
- Candida albicans ; Antimykotikum (1)
- Capoeta damascina (1)
- Capsaicin (1)
- Carbendazim (1)
- Carbon capture (1)
- Carcinogenese (1)
- Cardiac regeneration (1)
- Cardiovascular disease (1)
- Caribbean (1)
- Carnivora (1)
- Carotinoidbiosynthese (1)
- Caspase-8 (1)
- Cell-free Protein Synthesis (1)
- Cellular suicide switch (1)
- Central Nervous System (1)
- Cerebral cortex (1)
- Chagas (1)
- Chalydomonas (1)
- Channel Protein (1)
- Channelrhodopsin (1)
- Cheminformatics (1)
- Cheminformatik (1)
- Chemische Verschiebung (1)
- Chemische Ökologie (1)
- Chinchilla (1)
- Chinese hamster ovary (1)
- Chinoloxidase ba3 (1)
- Chironomus riparius (1)
- Chlamydomonas (1)
- Chlor (1)
- Chlorophyll Fluorescence (1)
- Chrimson (1)
- Chromatin (1)
- Chronischer Schmerz (1)
- Chronobiologie (1)
- Chronobiology (1)
- Cicer arietinum (1)
- Cladocera (1)
- Clathrin-vermittelte Endozytose (1)
- Climate (1)
- Climate Change (1)
- Climate change (1)
- Clock genes (1)
- Cluster-Analyse (1)
- Coccoidea (1)
- Coenzym (1)
- Cofaktor (1)
- Coiled coil (1)
- Colorectal Cancer (1)
- Columba livia (1)
- Connectomics (1)
- Conservation (1)
- Copper (1)
- Corbicula (1)
- Coronaries (1)
- Cortisol im Speichel (1)
- Cryptochrom (1)
- Crystallography (1)
- Ctenidae (1)
- Culicidae (1)
- Cupiennius salei (1)
- Curcumin (1)
- Cyclo-AMP (1)
- Cyclo-GMP (1)
- Cyclooxygenase-2 (1)
- Cyclooxygenasen (1)
- Cyprinidae (1)
- Cytochrom c Oxidase (1)
- Cytochrome c Oxidase (1)
- Cytochrome c oxidase (1)
- Cytomegalievirus (1)
- Cytoplasmatische Vererbung (1)
- DASPMI (1)
- DFT (1)
- DIRAS2 (1)
- DNA Methylation (1)
- DNA-Methylierung (1)
- DNA-binding region (1)
- DNS-Sequenz (1)
- DNS-Sonde (1)
- DNS-Synthese (1)
- DR5 (1)
- Daboia russelii (1)
- Daphnia (1)
- Datenbank (1)
- De novo Design (1)
- De-Novo-Synthese (1)
- Death-receptor (1)
- Decapping (1)
- Degeneration (1)
- Delaunay-Triangulierung (1)
- Deoxymannojirimycin (1)
- Depolymerisierung (1)
- Deskriptor (1)
- Detergenz (1)
- Deterministische Optimierung (1)
- Deutschland / Abwasserverordnung (1)
- Development (1)
- Developmental Biology (1)
- Diadinoxanthin (1)
- Dictyostelium discoideum (1)
- Didaktik Neurowissenschaften (1)
- Differentielle Genexpression (1)
- Digitalisierung (1)
- Dimensionsreduktion (1)
- Dipol (1)
- Direkteinleiter (1)
- Dispersal (1)
- Diversität (1)
- Docking protein (1)
- Dolastatinderivate ; Konformationsanalyse ; Tubuline ; Proteinbindung ; NMR-Spektroskopie ; Hammerkopf-Ribozym ; Übergangszustand ; Phospholamban (1)
- Domatien (1)
- Dominanzspektrum (1)
- Dornapparat (1)
- Dreidimensionale NMR-Spektroskopie (1)
- Dreidimensionale geometrische Modellierung (1)
- Drought (1)
- Druckerzeugungsmechanismen (1)
- Drug Delivery (1)
- Drug Targeting (1)
- Druggability (1)
- Dynamik (1)
- EAAT3 (1)
- EAAT4 (1)
- EGFR (1)
- EMCP (1)
- EMSA (1)
- EPR spectroscopy (1)
- Echoorientierung (1)
- Ecology (1)
- Ecotoxicogenomics (1)
- Ecotoxicology (1)
- Ectodomain Shedding (1)
- Efferentes System (1)
- Eintrittsinhibitor (1)
- Einzelpartikelelektronenmikroskopie (1)
- Eisen- (1)
- Eisen-Schwefel-Zentrum N1a (1)
- Electron Paramagnetic Resonance (1)
- Electron microscopy (1)
- Electrospinning (1)
- Elektrisches Remodeling (1)
- Elektrokardiogramm (1)
- Elektronenspinresonanzspektroskopie (1)
- Elektrospray-Ionisation (1)
- Emerging insect model organisms (1)
- Enchytraeidae (1)
- Enchytraeidae-Artengemeinschaft (1)
- Endocrine disrupter (1)
- Endokrin wirksamer Stoff (1)
- Endokrinologie (1)
- Endothel (1)
- Endothelial cell (1)
- Endothelial cells (1)
- Endotheliale Vorläuferzellen (1)
- Endothelin B Rezeptor (1)
- Endothelin Receptor B (1)
- Endothelin-Rezeptor (1)
- Endothelprogenitorzellen (1)
- Endothelzelle (1)
- Endothelzellen (1)
- Endsteinzeit (1)
- Entomologie (1)
- Entomology (1)
- Enzymaktivität (1)
- Enzyme (1)
- Enzymologie (1)
- EphrinB2 (1)
- Eplerenon (1)
- Erdmagnetfeld (1)
- Erdmagnetismus (1)
- Erithacus rubecula (1)
- Ernährungsweise (1)
- Escherichia coli (1)
- Ethnobotanik (1)
- Ethnoökologie (1)
- European Rabbit (1)
- European Robins (1)
- European robin (1)
- Europäisches Wildkaninchen (1)
- Evolutionary developmental biology (1)
- Excitation (1)
- Excitatory balance (1)
- Exozytose (1)
- Export (1)
- Extracellular matrix (1)
- Extrakt (1)
- Extremhabitat (1)
- Exzitation (1)
- Exzitotoxizität (1)
- FCP (Fucoxanthin-Chlorophyll bindende Proteine) (1)
- FCP (Fucoxanthin-Chlorophyll binding Protein) (1)
- FHL-1 (1)
- FRET (1)
- FVIII (1)
- Fabclavine (1)
- Faktor H (1)
- Felsentaube ; Ortsgedächtnis (1)
- Ferroptosis (1)
- Flavobacterium (1)
- Flavobacterium spec P99-3 (1)
- Flavoproteins (1)
- Fledermäuse (1)
- Floristische Kartierung (1)
- Fluorene derivatives (1)
- Fluorescence Lifetime (1)
- Fluorescence labelling (1)
- Fluoreszenz <Motiv> (1)
- Fluoreszenz-Resonanz-Energie-Transfer (1)
- Fluoreszenzmarkierung (1)
- Fluoreszenzspektrometer (1)
- Fluoreszenzspektroskopie (1)
- Fluorid cleavable linker (1)
- Fluorid spaltbarer Linker (1)
- Fluss (1)
- Flussnapfschnecke (1)
- Follikuläre dendritische Zellen (1)
- Foraminiferen (1)
- Force Field Development (1)
- Formvergleich (1)
- Fraßschaden (1)
- Freilandstudie (1)
- Freshwater (1)
- Freshwater Ecosystems (1)
- Fucoxanthin-Chlorophyll-Protein (1)
- Fulani (1)
- Fulbe (1)
- Functional Ecology (1)
- Functional traits (1)
- Funktion (1)
- Fusionsinhibitor (1)
- G-protein coupled receptor (1)
- GABA (1)
- GABA Transporter Typ 1 (1)
- GC-MS (1)
- GEF (1)
- GLUT4 (1)
- GSVs (1)
- Gal2 (1)
- Galakturonsäure (1)
- Gaussian processes (1)
- Gauß Prozesse (1)
- Gehölze (1)
- Gehölzfrüchte (1)
- Gemeinschwämme (1)
- Gene expression (1)
- Gene therapy (1)
- Gene trap (1)
- Genetics (1)
- Genetische Variabilität (1)
- Genfalle (1)
- Genklonierung (1)
- Genom (1)
- Genome engineering (1)
- Gentianinae (1)
- Geoinformationssystem (1)
- Gephyrin (1)
- Gerinnungsfaktor VIII (1)
- Gerontologie (1)
- Giraffe (1)
- Glatter Krallenfrosch (1)
- Glioblastom (1)
- Global Alignment (1)
- Global change (1)
- Glycinrezeptor (1)
- Glykoprotein GP 41 (1)
- Glykoproteine5550 !085487139!{{Chemische Synthese}}; Enzymkatalyse (1)
- Glyzinrezeptor (1)
- Graphentheorie (1)
- Grün fluoreszierendes Protein (1)
- HC-Pro (1)
- HIV infection (1)
- HIV-Infektion (1)
- HPLC (1)
- HRGXE-Motiv (1)
- HWC database (1)
- Habituation (1)
- Halictini (1)
- Halobacterium salinarium (1)
- Halobacterium salinarum (1)
- Haloferax volcanii (1)
- Halophile (1)
- Halophile Bakterien (1)
- Hauptkomponentenanalyse (1)
- Heart (1)
- Hefe (1)
- Hefeartige Pilze (1)
- Helix <alpha-> (1)
- Hematopoetic differentiation (1)
- Hemicellulose (1)
- Herpesvirus (1)
- Hexachlorbenzol (1)
- Hinterhorn <Rückenmark> (1)
- Hinterkiemer (1)
- Hippocampal development (1)
- Hippocampus (1)
- Hirntumor (1)
- Histon-Deacetylierung (1)
- Histone (1)
- Histone Deacetylation (1)
- Histonmodifikationen (1)
- Hodgkin-Lymphom (1)
- Homeobox (1)
- Homeodomänenproteine ; Stat1 (1)
- Homologiemodellierung (1)
- Homöobox (1)
- Honigbiene (1)
- Hydrogen storage (1)
- Hydrogen-dependent CO2 reductase (1)
- Hydrogenasen (1)
- Hydrolasen (1)
- Hämatopoese (1)
- Höhle (1)
- Hörschädigung (1)
- Hörzelle (1)
- IKK epsilon (1)
- IMAC (1)
- Immortalisierung (1)
- Immunadsorption (1)
- Immunkrankheit (1)
- Immunology (1)
- Immunreaktion (1)
- Immunrekonstitution (1)
- Immunseren (1)
- Immunsuppression (1)
- Import (1)
- Indikator (1)
- Indirekteinleiter (1)
- Induced Fit (1)
- Industrieabwasser (1)
- Infectivity (1)
- Infektiösität (1)
- Inflammation (1)
- Influenza (1)
- Inhibitor Binding Pocket (1)
- Inhibitor-binding (1)
- Inhibitorbindetasche (1)
- Inhibitory balance (1)
- Inhibitory interneurons (1)
- Innenohr (1)
- Innovation (1)
- Inquisition post mortem (1)
- Integrale Membranproteine (1)
- Interaktionsanalyse (1)
- Interferon (1)
- Inthraszentin (1)
- Intrazellulärer Transport (1)
- Ionenkanal (1)
- Ionenspezifität (1)
- Ischemia (1)
- Isolierung <Chemie> (1)
- Isopoda (1)
- Isoprenoide (1)
- JAK/STAT-Signalweg (1)
- Java (1)
- Juckreiz (1)
- Juvenile neuronal ceroid lipofuscinosis (1)
- Kalium Kanäle (1)
- Kalmar <Art> ; Diisopropylfluorophosphatase (1)
- Kalziumspeicher (1)
- Kampfsport (1)
- Kanalprotein (1)
- Karate (1)
- Kardiovaskuläres System (1)
- Karibik (1)
- Katabolismus (1)
- Katalase (1)
- Kation ; Organische Verbindungen ; Elektrophysiologie (1)
- Katze (1)
- Kern-Zytoplasma-Transport (1)
- Kernhülle ; Hitzeschock-Proteine ; Proteine ; Wechselwirkung (1)
- Kernpilze (1)
- Ketonkörper (1)
- Kichererbse (1)
- Kieselalgen (1)
- Kinabalu (1)
- Kinematik (1)
- Klassifikation (1)
- Klimarekonstruktion (1)
- Knockout <Molekulargenetik> (1)
- Koaktivatoren (1)
- Kohlenstoffisotop (1)
- Kohlenstoffkreislauf (1)
- Konkurrenz (1)
- Konstitutionstypen (1)
- Kopplungskonstanten (1)
- Korrelation (1)
- Krebsforschung (1)
- Kristallographie (1)
- Kristallzüchtung (1)
- Kronendach (1)
- Kryo-Elektronenkristallographie (1)
- Kryoelektronenmikroskopie (1)
- Kryokonservierung (1)
- Kuala Lumpur <Region> ; Bambus ; Ameisen ; Biozönose (1)
- Kulturlandschaft (1)
- Kupfer (1)
- Kupfer-ATPase (1)
- Kupferstoffwechsel (1)
- Körperfett (1)
- Künstliche Niere (1)
- LINC00607 (1)
- LINE-1 (1)
- LTD (1)
- LTP (1)
- Labyrinth <Anatomie> (1)
- Lactalbumin (1)
- Landschaftsentwicklung (1)
- Landwirtschaft (1)
- Laserin (1)
- Later Stone Age (1)
- Leaf dry matter content (LDMC) (1)
- Lebensmittelallergie (1)
- Lebensweise (1)
- Lebenszykluseffekte (1)
- Lentivirale Vektoren (1)
- Licht (1)
- Lichtabhängigkeit (1)
- Lichtsammelkomplexe (1)
- Ligand (Biochemie) (1)
- Ligand <Biochemie> (1)
- Light sheet-based fluorescence microscopy (1)
- Light-sheet microscopy (1)
- Limonene-3-hydroxylase (1)
- Line Notation (1)
- Lineage Through Time (1)
- Linearisierung (1)
- Linker (1)
- Lipid Environment (1)
- Lipidmembran (1)
- Lipoxygenase <5-> (1)
- Lycopersicon peruvianum ; Hitzestress ; Transkriptionsfaktor ; Proteintransport ; Hitzeschocktranskriptionsfaktor (1)
- Lymphknoten (1)
- Lysosomal storage disease (1)
- Lysosomale Speicherkrankheit (1)
- Lysozym (1)
- M87o (1)
- MALDI (1)
- MCAK (1)
- MD Simulation (1)
- MEA (1)
- MEK inhibition (1)
- MHC (1)
- MICOS complex (1)
- MLL (1)
- Macroevolution (1)
- Macrotermes (1)
- Magnesium (1)
- Magnetkompass (1)
- Magnetkompassorientierung (1)
- Magnetokardiographie (1)
- Magnetperzeption (1)
- Magnetrezeption (1)
- Magnetrezeptormolekül (1)
- Maillard reaction (1)
- Maillard-Reaktion (1)
- Makromolekulare Chemie (1)
- Makromolekül (1)
- Makroreste (1)
- Malaysia (1)
- Malaysia ; Leptogenys ; Schwarmverhalten ; Pheromon ; Verhalten (1)
- Manteltiere (1)
- Markierungsgen (1)
- Marsupials (1)
- Maschinelles Lernen (1)
- Massenspektrometrie (1)
- Maternal Immune Activation (1)
- Maus ; Recombinasen (1)
- Mediale olivo-cochleäre Efferenz (1)
- Mediterranean (1)
- Medizintechnik (1)
- Meerschweinchen (1)
- Mehrdimensionale NMR-Spektroskopie (1)
- Membran (1)
- Membrane Potential (1)
- Membrane Proteins (1)
- Membranfusion (1)
- Membranlipide (1)
- Messenger-RNS ; Translokation ; Peptide ; Wechselwirkung ; Leukämie (1)
- Meta effect (1)
- Metabolon (1)
- Methanogen (1)
- Methanol (1)
- Methylobacterium (1)
- Methyltransferase (1)
- Microarray (1)
- Microbielle rhodopsine (1)
- Microbiology (1)
- Microsatelliten (1)
- Microvesicles (1)
- Migration (1)
- Mikrobiom (1)
- Mikroplastik, Boden, Reifenabrieb, Analytik (1)
- Mikroskopie (1)
- Mikrovesikel (1)
- Milchdrüse (1)
- Milchdrüse ; Entwicklung ; Genregulation (1)
- Milchdrüsengewebe (1)
- Mitochondriale DNS (1)
- Mitochondrien (1)
- Mitose (1)
- Mitteleuropa (1)
- Mittelmeerraum (1)
- Molarenevolution (1)
- Molecular Evolution (1)
- Molecular dynamic simulation (1)
- Molekulare Evolution (1)
- Molekulargenetik (1)
- Moleküldesign (1)
- Moleküldynamiksimulation (1)
- Molekülkomplex (1)
- Monoclonal Antibodies (1)
- Monographie (1)
- Monoklonaler Antikörper (1)
- Monolage (1)
- Monoterpenoid (1)
- Monoterpenoid tolerance (1)
- Monozyklase (1)
- Monozyt (1)
- Morphogenesis (1)
- Morphology (1)
- Moschcowitz-Syndrom (1)
- Motivation (1)
- Motorprotein (1)
- Mulitvariate Statistik (1)
- Multi-domain proteins (1)
- Multielektroden (1)
- Multikomponentenreaktion (1)
- Multiproteinkomplex (1)
- Multispezies-Testsysteme (1)
- Multivariate Modellierung (1)
- Muscheln (1)
- Mutante (1)
- Mutualismus (1)
- MySQL (1)
- Myrmekophytie (1)
- Myxol (1)
- NCoA proteins (1)
- NCoA-Proteine (1)
- NES (1)
- NLS (1)
- NMDA (1)
- NMDA-Antagonist (1)
- NMDA-Rezeptor (1)
- NMR shift calculation (1)
- NMR-Spectroscopy (1)
- NMR-spectroscopy (1)
- Naja (1)
- Nanodiscs (1)
- Nanoparticle (1)
- Nanopartikel (1)
- Nase (1)
- Natriumglutamat <Natrium-L-glutamat> (1)
- Natural Products (1)
- Natural products (1)
- Naturheilkunde (1)
- Naturstoff (1)
- Naturstoffe (1)
- Nekrose (1)
- Neovascularisation (1)
- Neozoen (1)
- Nervensystem (1)
- Nervenzelle (1)
- Nestbau (1)
- Netzhaut (1)
- Neuroanatomie (1)
- Neurodevelopmental Psychiatric Disorders (1)
- Neuronale Differenzierung (1)
- Neuronale Plastizität (1)
- Neurosimulation (1)
- Neurotransmitter-Rezeptor (1)
- Niche (1)
- Nichtsteroidales Antiphlogistikum (1)
- Niere (1)
- Nierentubulus (1)
- Non-canonical terpenes (1)
- Normalkoordinatenanalyse (1)
- Novel Object Test (1)
- Nuclear factor kappa B (1)
- Nucleinsäuren (1)
- Nucleus reuniens (1)
- Nuklearfaktor Kappa B (1)
- Nukleotidzucker (1)
- Nutrient concentration (1)
- OAE (1)
- ORF1 (1)
- Offener Leserahmen (1)
- Ohrenqualle ; Phylogenie ; Sequenzanalyse <Chemie> ; Artbildung ; Tiergeographie (1)
- Ohrenqualle ; Strobilation ; Umweltüberwachung (1)
- Oligonukleotid (1)
- Omp85 (1)
- Omp85-Protein (1)
- Ontogenese (1)
- Oozyten von Xenopus laevis (1)
- Opisthobranchia (1)
- Optical electrophysiology (1)
- Optische Spektroskopie (1)
- Optogenetics (1)
- Optogenetik (1)
- Orexin (1)
- Organic micropollutants (1)
- Organische Synthese (1)
- Organogenese (1)
- Organoids (1)
- Orientation (1)
- Orientierung (1)
- Ortsgedächtnis (1)
- Ortspezifische Mutagenese (1)
- Oxidativer Stress (1)
- Oxoferrylzustand (1)
- Oxygenierung (1)
- P-bodies (1)
- PAM (1)
- PELDOR / DEER (1)
- PGE2 (1)
- PGE2 Cancer Tumorigenesis (1)
- PSGP (1)
- Paarverteilungsfunktion (1)
- Pain (1)
- Palladium-Katalyse (1)
- Pan paniscus (1)
- Papierindustrie (1)
- Paprika ; Desaturasen ; Genexpression ; Paprika (1)
- Paracoccus denitrificans ; Cytochrom c1 (1)
- Paracoccus denitrificans ; Cytochromoxidase ; Protonentransfer ; Elektronentransport (1)
- Parallelverarbeitung (1)
- Parkinson (1)
- Paruroctonus mesaensis (1)
- Patch-Clamp-Methode (1)
- Patch-clamp (1)
- Paul-Ehrlich-Institut (1)
- Peddigrohr (1)
- Peptidbeladungskomplex (1)
- Peptide (1)
- Peptide Loading Complex (PLC) (1)
- Perania nasuta (1)
- Perlhirse (1)
- Permeasen (1)
- Persischer Golf ; Krabben ; Systematik ; Tiergeographie ; Mittelkrebse (1)
- Persönlichkeit (1)
- Pestalotia (1)
- Pestalotiopsis (1)
- Pestizidbelastung (1)
- Pflanzen ; Katalase ; Heterologe Genexpression (1)
- Pflanzenameisen (1)
- Pflanzenfressende Insekten (1)
- Pflanzenhormon (1)
- Pflanzenkartierung (1)
- Pflanzenphysiologie (1)
- Pflanzensoziologie (1)
- Phaeodactylum tricornutum (1)
- Pharmacophore (1)
- Pharmazeutische Chemie (1)
- Pharmazie (1)
- Phasenverschiebung (1)
- Photocages (1)
- Photoisomerization (1)
- Photolabile protecting groups (1)
- Photorhabdus (1)
- Photosynthetisches Reaktionszentrum (1)
- Photosystem I (1)
- Phylogeny (1)
- Phytochrome (1)
- Phytoen (1)
- Pichia ciferrii (1)
- Pigmentproteine (1)
- Pimephales promelas (1)
- Pink1 (1)
- Pinnotheres (1)
- Plant morphological groups (1)
- Plant physiology (1)
- Plant regeneration (1)
- Plant regeneration; community assembly; diversity (1)
- Plants (1)
- Plasmamembran ; Calcium-ATPasen ; Calmodulin ; Peptide ; Wechselwirkung ; Dreidimensionale NMR-Spektroskopie (1)
- Pleistozän (1)
- Podospora anserina (1)
- Poecilia (1)
- Polymere (1)
- Polypeptid transport-associated domains (1)
- Population genetics (1)
- Populationsgenetik (1)
- Positive reinforcement training (1)
- Post-Targeting Funktionen (1)
- Postglaziale Verbreitung (1)
- Posttranslationale Modifikationen (1)
- Potyviren (1)
- PrP (1)
- Prenyl pyrophosphates (1)
- Primär aktive Transporter (1)
- Prion (1)
- Prionprotein (1)
- Processing bodies (1)
- Prognose (1)
- Proliferation (1)
- Promoter (1)
- Promotor (1)
- Promotor <Genetik> (1)
- Prostaglandine (1)
- Prostgandin E Synthasen (1)
- Proteasom (1)
- Proteasomeninhibitoren (1)
- Protein Arginin Methyltransferase (1)
- Protein Structure (1)
- Protein associated with myc (1)
- Protein flexibility (1)
- Protein-Protein Interactions (1)
- Protein-Protein Interaktion (1)
- Protein-Protein-Wechselwirkung (1)
- Protein-Sortierung (1)
- Protein-Tyrosin-Kinase (1)
- Protein-Tyrosin-Phosphatase (1)
- Proteine ; Ligand <Biochemie> ; Wechselwirkung ; NMR-Spektroskopie (1)
- Proteine; Posttranslationale Änderung; Elektrospray-Ionisation; Massenspektrometrie (1)
- Proteinexpression (1)
- Proteinflexibilität (1)
- Proteinregulation (1)
- Proteinsekretion (1)
- Proteintransport (1)
- Proteintyrosinphosphatase (1)
- Proteoliposomen (1)
- Proteomics (1)
- Proteorhodopsin (1)
- Proteostasis (1)
- Proton transfer (1)
- Protonenpumpe (1)
- Pseudomonas (1)
- Pseudomonas putida (1)
- Pseudorezeptoren (1)
- Pseudotypisierung (1)
- Pulmonale Hypertonie (1)
- Puromycin (1)
- Pyramidal neurons (1)
- Pyrrolimidazolalkaloide (1)
- Qinghai-Tibet Plateau (1)
- Quercus (1)
- Quercus frainetto Ten. (Ungarische Eiche) (1)
- Quercus ilex L. (Steineiche) (1)
- Quercus pubescens Willd. (Flaumeiche) (1)
- Quercus robur L. (Stieleiche) (1)
- Quercus rubra L. (Roteiche) (1)
- Quinolinate Phosphoribosyltransferase (1)
- Quinon-Fumarat-Reduktase (1)
- R peptide (1)
- R-Peptid (1)
- RAPDs (1)
- RBFOX1 (1)
- RDCs (1)
- REM-Schlaf (1)
- RNA interference (1)
- RNA-Interferenz (1)
- RNA-folding (1)
- RNS-Bindungsproteine (1)
- RNS-Interferenz (1)
- RUNX1 (1)
- Radical-Pair-Mechanism (1)
- Radikal <Chemie> (1)
- Radikalpaar (1)
- Radikalpaar-Mechanismus (1)
- Radikalpaar-Prozess (1)
- Radioliganden (1)
- Raf <Biochemie> (1)
- Ras (1)
- Reaktionskinetik (1)
- Receptor-based (1)
- Reconstitution (1)
- Regeneration (1)
- Regulation (1)
- Regulation der Genexpression (1)
- Reinigung (1)
- Rekonstitution (1)
- Remote sensing (1)
- Renal tubule (1)
- Renin-Angiotensin-System (1)
- Repetitive DNS (1)
- Reproduction (1)
- Retina (1)
- Retroposon (1)
- Retroviren (1)
- Revision (1)
- Rezeptor (1)
- Rezeptorbasiert (1)
- Rezeptorinternalisierung (1)
- Rheumatoid Arthritis (1)
- Rhinophores (1)
- Rhodnius prolixus (1)
- Rhodopsin (1)
- Rhodopsine (1)
- Ribosomen, rRNA Prozessierung, snoRNA, Ribosomenbiogenesefaktoren (1)
- Ribozym (1)
- Rind (1)
- Risikoanalyse (1)
- Risikomanagement (1)
- Risk assessment (1)
- Rotang-Palme (1)
- Rotoren (1)
- Russell´s Viper (1)
- Ruthenium (1)
- Ruthenium-Laserflash-Spektroskopie (1)
- Rückenmark (1)
- Rückzugsreflex (1)
- SAGE (1)
- SCA2 (1)
- SCO2 (1)
- SILAC (1)
- SIMPrint (1)
- SINE (1)
- SPAD (1)
- SR proteins (1)
- STAT5 (1)
- STAT5-DNA Bindungsstellen (1)
- STM (1)
- Sahel ; Unkraut ; Pflanzensoziologie ; Burkina Faso (1)
- Salt stress (1)
- Salztress (1)
- Sarcophilus (1)
- Sarkoplasmatisches Retikulum ; Calcium ; ATP ; Wechselwirkung (1)
- Sauerstoffisotop (1)
- Sauerstoffradikal (1)
- Savanna (1)
- Scaffold Hopping (1)
- Schadstoffbelastung (1)
- Schallintensität (1)
- Schistosomiaisis (1)
- Schleimpilze (1)
- Schmierläuse (1)
- Schutz (1)
- Schwefelwasserstoff (1)
- SecYEG (1)
- Sediment (1)
- Sehzelle (1)
- Sekretion (1)
- Sekundenherztod (1)
- Sekundärmetabolite (1)
- Sensorrhodopsin (1)
- Septische Granulomatose (1)
- Sequenzierung durch Synthese (1)
- Shapecomparison (1)
- Signal Transduction (1)
- Signaling (1)
- Signalpeptide (1)
- Signalverarbeitung (1)
- Similarity (1)
- Simulation (1)
- Sklerochronologie (1)
- Somatochart (1)
- Somatologie (1)
- Soziobiologie (1)
- Sp1 (1)
- Spatial navigation (1)
- Species distribution modelling (1)
- Sphecodini (1)
- Sphingolipide (1)
- Sphingosin (1)
- Sphingosin-1-Phosphat (1)
- Sphingosinkinase 2 (1)
- Spinach (1)
- Spine (1)
- Spinlabel (1)
- Spironolacton (1)
- Sprung (1)
- Stadtökologie (1)
- Stammzellen (1)
- Stammzelltransplantation (1)
- Stat1 (1)
- Stat3 Gliom Curcumin (1)
- Stechmücken (1)
- Stehendes Gewässer (1)
- Stickstoffmonoxid (1)
- Stofftransport <Biologie> (1)
- Stoffwechsel (1)
- Streptomyces coelicolor (1)
- Stress response (1)
- Stressreaktion (1)
- Structure-based Mutagenesis Study (1)
- Structured Illumination Microscopy (1)
- Struktur (1)
- Struktur-Aktivitäts-Beziehung (1)
- Strukturanalyse (1)
- Strukturbiologie (1)
- Sudden cardiac death (1)
- Sumoylation (1)
- Sumoylierung (1)
- Super resolution (1)
- Super resolution fluorescence microscopy (1)
- SuperSAGE (1)
- Survivin (1)
- Svetamycin (1)
- Symbiont evolution (1)
- Symbiose (1)
- Symbiosis (1)
- Synapse (1)
- Synovial Fibroblast (1)
- Systematics (1)
- Säugetiere ; Melatonin ; Biosynthese ; Regulation (1)
- Südostasien; Macaranga; Bestäubung; Blasenfüße; Mutualismus; Crematogaster; Südostasien; Macaranga; Fortpflanzung; Bestäubung; Blasenfüße; Kastration; Ameisen (1)
- Süßwasser (1)
- T-Lymphozyt (1)
- T-Zell-Leukämie (1)
- T-Zellen (1)
- TAP (1)
- TIGAR (1)
- TKTL1 (1)
- TRAIL (1)
- TRPV1 (1)
- Tabanidae (1)
- Talent (1)
- Talentsuche (1)
- Taphonomie (1)
- Targeted drug delivery (1)
- Taschenoberfläche (1)
- Tasmanian devil (1)
- Tau-Protein (1)
- Taube (1)
- Taunus (1)
- Taxonomie (1)
- Taxonomy (1)
- Technologieakzeptanz (1)
- Telomerase (1)
- Temperatur (1)
- Temperaturabhängigkeit (1)
- Temporäres Gewässer (1)
- Tentakel <Zoologie> (1)
- Terbutryn (1)
- Termiten (1)
- Terpenes (1)
- Terpenoid (1)
- Testosteronreductase <Testosteron-5-alpha-Reductase> (1)
- TetR (1)
- Tetrablemmidae (1)
- Tetramerisation (1)
- Tetrazyklinrepressor (1)
- Thermophile (1)
- Thermophile Bakterien (1)
- Thermoregulation (1)
- Thiosulfat Sulfurtransferase (1)
- Thrombotic thrombocytopenic purpura (1)
- Thrombozyten (1)
- Time-averaging (1)
- Tissue Engineering (1)
- Tocochromanol (1)
- Todesrezeptor (1)
- Tomate (1)
- Tomate ; Hitzestress ; Transkriptionsfaktor (1)
- Tonhöhe (1)
- Torini (1)
- Toxizität (1)
- Transcription (1)
- Transcriptional activity (1)
- Transcriptome (1)
- Transcriptomics (1)
- Transduktion B Zellen (1)
- Transformation (1)
- Transient absorption (1)
- Transkription (1)
- Transkription <Genetik> (1)
- Transkriptionsfaktoren (1)
- Transkriptomanalyse (1)
- Translation <Genetik> (1)
- Translational Psychiatry (1)
- Translocation (1)
- Transplantation (1)
- Transponierbares Element (1)
- Transport (1)
- Transporter associated with antigen processing (TAP) (1)
- Transporter assoziiert mit Antigen-Prozessierung (1)
- Transposon systems (1)
- Triatominae (1)
- Trichoptera (1)
- Trichostatin A (1)
- Tripterospermum (1)
- Trockenstress (1)
- Tropical montane forest (1)
- Truffle (1)
- Trypanosoma cruzi (1)
- Tubastrin (1)
- Tumor (1)
- Tumor necrosis factor alpha (1)
- Tumor-Nekrose-Faktor <alpha> (1)
- Tumorsuppressor-Gen (1)
- Tumorwachstum (1)
- Typ 4 Pilus (1)
- Typ I Interferon Rezeptor (1)
- Tyrosin (1)
- UDP-Glucose-Dehydrogenase (1)
- UDP-glucose dehydrogenase (1)
- UL49.5 (1)
- UV-VIS-Spektroskopie (1)
- UVB (1)
- Ubichinonbindetasche (1)
- Ubiquinon-Cytochrome c-Reductase (1)
- Ubiquinone Binding Pocket (1)
- Ubiquitin Ligase (1)
- Ubiquitin chains (1)
- Ubiquitination (1)
- Uhrengene (1)
- Umweltchemikalie (1)
- Umweltdaten (1)
- Umweltgefährdung (1)
- Umweltgeochemie (1)
- Umweltrisikoabschätzung (1)
- Umwelttoxikologie (1)
- Umweltwahrnehmung (1)
- Unterart; Pollen; Sammeln; Verhalten (1)
- Untranslated Region (1)
- Urban Ecology (1)
- Ustilaginomycotina (1)
- V1 (1)
- VEGF (1)
- VSV (1)
- Vaccinieae (1)
- Vaccinium (1)
- Varicellovirus (1)
- Varizellen-Virus (1)
- Vaskularisation (1)
- Vaskulogenese (1)
- Vegetationsgeschichte (1)
- Verbreitungsökologie (1)
- Verzögerte Fluoreszenz (1)
- Vesikel (1)
- Viral Infection (1)
- Viral entry (1)
- Virologie (1)
- Virtual screening (1)
- Virusinfektion (1)
- Viskoelastizität (1)
- Vitality monitoring (1)
- Vogelzug (1)
- Voltage Clamp (1)
- Voltage Imaging (1)
- Volumenverschiebungen (1)
- Von Willebrand Faktor (1)
- Von Willebrand factor (1)
- Vorhofflimmern (1)
- Voronoi-Diagramm (1)
- Vögel (1)
- W National Park (1)
- WSINE1 (1)
- Wasserflöhe (1)
- Wasserpflanzen (1)
- Wasserstoffionenkonzentration (1)
- Wasserstoffperoxid (1)
- Wechselwirkung (1)
- West Indies (1)
- Western Kenya (1)
- Whole Effluent Assessment (1)
- Wilson Disease Protein (1)
- Wirbellose (1)
- Wirtspflanzen (1)
- X-ray Crystallography (1)
- X-ray crystallography (1)
- Xylose (1)
- Yeast (1)
- YidC (1)
- ZIKV (1)
- ZYMV (1)
- Zahn-Wellens test (1)
- Zahn-Wellens-Test (1)
- Zahnwale (1)
- Zeaxanthin (1)
- Zebrafish (1)
- Zeit-Frequenz-Analyse (1)
- Zeitauflösung (1)
- Zeitverarbeitung (1)
- Zell-basierte Assaysysteme (1)
- Zellaufnahme (1)
- Zelldifferenzierung (1)
- Zelltod (1)
- Zellulares neuronales Netz (1)
- Zellwand (1)
- Zentralnervensystem (1)
- Zirbeldrüse (1)
- Zoologie (1)
- Zugvögel (1)
- Zuwachs (1)
- Zweiphotonen-Anregung (1)
- Zyklisierung (1)
- Zytokinrezeptor (1)
- accessory subunit (1)
- actin (1)
- acyl carrier protein, polyketide synthases, Curacin cluster (1)
- adult neurogenesis (1)
- aggregopathy (1)
- aktuelles Interesse (1)
- akute Toxizität (1)
- aldosterone (1)
- allosterischer Modulator (1)
- alternative splicing (1)
- ant-plants (1)
- anthracology (1)
- anti-inflammatory (1)
- antimicrobial resistance (1)
- aptamer (1)
- arabinose (1)
- archaeobotany (1)
- aroma (1)
- atrial fibrillation (1)
- atrophy (1)
- auditory Midbrain (1)
- autoproteolysis (1)
- bacillary angiomatosis (1)
- bacteria-host interaction (1)
- bacterial infection (1)
- bacterial two hybrid system (1)
- bakterielles Two Hybrid System (1)
- bats (1)
- bc1-complex (1)
- benthic (1)
- benthisch (1)
- bioassay (1)
- biodiversity (1)
- bioenergetics (1)
- bioinformatic (1)
- biomechanics (1)
- birds (1)
- bivalve assemblage (1)
- black lipid membrane (1)
- blood (1)
- boswellic acids (1)
- brain waves (1)
- cAMP (1)
- calcium store (1)
- carotenoid biosynthesis (1)
- caspase-8 (1)
- cell biology (1)
- cell death (1)
- cell migration (1)
- cell targeting (1)
- cell uptake (1)
- cell wall precursor (1)
- cell-based assay-systems (1)
- cell-free (1)
- chemical shifts (1)
- chemical synthesis (1)
- chemistry education (1)
- chronische Toxizität (1)
- cisternal organelle (1)
- climate change (1)
- climate reconstruction (1)
- coactivators (1)
- coagulation factor VIII (1)
- cobra (1)
- cochlear amplifier (1)
- cochleärer Verstärker (1)
- coevolution (1)
- color (1)
- complex of closely related species (1)
- computational chemistry (1)
- conformation (1)
- consortia (1)
- cooperation (1)
- cophylogeny (1)
- cospeciation (1)
- crosslinking-mass spectrometry (1)
- cryo-EM (1)
- cryo-eletron crystallography (1)
- cryptochrome (1)
- cultivation (1)
- cultural landscape (1)
- cyclic nucleotide-gated ion channel (1)
- cyclooxygenase (1)
- cyclooxygenase-2 (1)
- cytochrome c oxidase (1)
- cytokine (1)
- cytokine receptor (1)
- dMM (1)
- de novo design (1)
- depolymersation (1)
- detergent (1)
- development (1)
- diabetes type 1 (1)
- diatom (1)
- differentiation (1)
- display Bibliotek (1)
- display library (1)
- distribution (1)
- diurnal (1)
- diversity (1)
- domatia (1)
- drug design (1)
- drug discovery (1)
- dryland (1)
- dynamics (1)
- ecological genetics (1)
- ecosystem services (1)
- elapid snake (1)
- electrical remodeling (1)
- electron microscopy (1)
- electron transfer (1)
- electrophysiologie (1)
- electrophysiology (1)
- elektrochemisches Protonenpotential (1)
- elephant (1)
- enantioselektive Synthese (1)
- endothelin receptor (1)
- endothial precursor cells (1)
- entry inhibitor (1)
- envenoming (1)
- environmental DNA (1)
- environmental attitudes (1)
- environmental behavior (1)
- environmental education (1)
- environmental knowledge (1)
- environmental perception (1)
- environmental stressors (1)
- enzymatically cleavable Linker (1)
- enzymatisch spaltbarer Linker (1)
- enzyme assay (1)
- enzyme inhibitor (1)
- epigenetic regulation (1)
- ethnobotany (1)
- ethnoecology (1)
- export (1)
- failure to diverge (1)
- feeding habit (1)
- fitness (1)
- flora (1)
- fluorescence (1)
- follicular dendritic cells (1)
- food allergy (1)
- food quality (1)
- frequency-time analysis (1)
- freshwater (1)
- freshwater crayfish (1)
- fucoxanthin-chlorophyll-protein (1)
- full-thickness skin model (1)
- functional (1)
- functional coupling (1)
- fungal phylogeny (1)
- fusion inhibitor (1)
- gamma oscillations (1)
- gen expression (1)
- generation probability (1)
- genetical engineering (1)
- genetransfer (1)
- genotype (1)
- geoecology (1)
- geographic information system (GIS) (1)
- geophytes (1)
- gephyrin (1)
- gerbil (1)
- gerontology (1)
- glatte Gefäßmuskelzellen (1)
- glioma (1)
- glucocorticoid (1)
- glutamate transporter (1)
- glycerophospholipid (1)
- glycine rezeptor (1)
- gp41 (1)
- granule cells (1)
- hGPR63 (1)
- hS1P5-Rezeptor (1)
- habitat heterogeneity (1)
- hair cell (1)
- hearing loss (1)
- heart development (1)
- heat stress (1)
- hematopoietic stem cell (1)
- hemicellulose (1)
- hen egg white lysozyme (1)
- hepatische Ketogenese (1)
- herbivores (1)
- herpesvirus (1)
- heterosynaptic plasticity (1)
- high-content screening (1)
- high-frequency stimulation (1)
- hippo (1)
- hippocampus (1)
- histone modifications (1)
- homeobox (1)
- homeobox A9 (1)
- homeodomain proteins (1)
- host-switch (1)
- human pancreatic organoids (hPOs) (1)
- human-wildlife conflict (1)
- hyperalgesia (1)
- immortalization (1)
- import (1)
- in vivo screen (1)
- indirect discharger (1)
- industrial effluents (1)
- information literacy (1)
- infra-slow oscillation (1)
- inhibition (1)
- integral membrane proteins (1)
- intensity (1)
- intermediate state (1)
- intracellular transport (1)
- intramolecular protein interaction (1)
- intramolekulare Proteininteraktion (1)
- katalytischer Zyklus (1)
- kern-basiertes Lernen (1)
- kernel learning (1)
- kinetics (1)
- konstitutive Aktivität (1)
- krait (1)
- lange Signalpeptide (1)
- lateral line (1)
- left ventricular hypertrophy (1)
- lentiviral vector (1)
- lentiviral vectors (1)
- lentivirale Vektoren (1)
- lentivirale siRNA Transduktion (1)
- lentiviraler Vektor (1)
- leukocyte adhesion (1)
- lichtaktivierbare Nukleinsäure (1)
- life cycle effects (1)
- life habit (1)
- light dependent magnetic compass (1)
- light-harvesting complexes (1)
- lightactivatable nucleic acids (1)
- lipid metabolism (1)
- livelihood (1)
- long non-coding RNA (1)
- long signal peptide (1)
- long-term depression (1)
- long-term potentiation (1)
- mPFC (1)
- mPGES-1 (1)
- mRNA-Abbau (1)
- mRNA-Speicherung (1)
- mTOR (1)
- macrohabitat (1)
- macroremains (1)
- magnetic compass orientation (1)
- magnetic exchange coupling constants (1)
- magnetoreception (1)
- mammary gland tissue (1)
- mapping (1)
- mechanics (1)
- medically relevant (1)
- membrane anchor; substrate-binding protein dependent secondary transport; TRAP-associated extracytoplasmic immunogenic (TAXI); tripartite ATP-independent periplasmic (TRAP) (1)
- membrane fluidity (1)
- membrane fusion (1)
- membrane protein (1)
- metabolism (1)
- metabotroper Glutamatrezeptor (1)
- metabotropic (1)
- metastasis (1)
- miRNA (1)
- miRNS (1)
- microRNA-17-92 cluster (1)
- microRNAs (1)
- microbiome (1)
- microsatellites (1)
- migratory birds (1)
- mitochondrial dysfunction (1)
- mitosis (1)
- mitotic spindle (1)
- modeling (1)
- molecualr phylogeny (1)
- molecular beacons (1)
- molecular phylogenetics (1)
- molecular structure (1)
- monocyclase (1)
- monocytes (1)
- morphological features (1)
- motor protein (1)
- mounting (1)
- mouse (1)
- movement (1)
- mtDNA (1)
- multidimensional nmr spectroscopy (1)
- multielectrode array (1)
- mutants (1)
- mutualism (1)
- myeloid angiogenic cells (1)
- myrmecophytes (1)
- neuromodulation (1)
- neuronal plasticity (1)
- niche evolution (1)
- nicht kodierende RNA (1)
- nicht-native Proteine (1)
- nitric oxide (1)
- nociception (1)
- nomadic (1)
- non coding RNA (1)
- non-native proteins (1)
- non-timber forest products (NTFPs) (1)
- npas4l (1)
- nucleotid-sugars (1)
- olivo-cochlear efferents (1)
- olivo-cochleäre Efferenzen (1)
- ontogenesis (1)
- organische Verbindungen (1)
- organotin compound (1)
- outdoor education (1)
- overtaking innovation (1)
- oxygen radical (1)
- p38 MAPK (1)
- p53 (1)
- p63 (1)
- pH-indicator dye (1)
- parathyroid hormone 2 (1)
- patch-clamp technique (1)
- pearl millet (1)
- peroxisom proliferator aktivierter Rezeptor (1)
- peroxisome proliferator-activated receptor (1)
- pesticide (1)
- photlabile protecting group (1)
- photolabile Schutzgruppen (1)
- photooxidativer Stress (1)
- photoschalbare (1)
- photospaltbare Linker (1)
- pitch (1)
- plant diversification (1)
- plant species diversity (1)
- plant-ants (1)
- platelets (1)
- pocket surface (1)
- polyketide synthase (1)
- potassium channel (1)
- potyvirus (1)
- pre-steady state (1)
- preparative cell-free expression (1)
- problem-based learning (1)
- promoter (1)
- pronephric duct (1)
- propagating waves (1)
- prostaglandin synthases (1)
- proteasomeinhibitors (1)
- protein expression (1)
- protein flexibilty (1)
- protein folding (1)
- protein sorting (1)
- protein-ligand docking (1)
- protein-protein interaction (1)
- proteome (1)
- proteome analysis (1)
- proton transfer (1)
- pseudoreceptors (1)
- pseudotyping (1)
- pulmonary hypertension (1)
- purification (1)
- quantenpunkte (1)
- quantitative proteomics (1)
- radical-pair process (1)
- radioligand (1)
- rat (1)
- rationale Stammentwicklung (1)
- repetitive Tonpulse (1)
- repetitive tone pips (1)
- reptiles (1)
- residual dipolar couplings (1)
- respiratory chain (1)
- retina (1)
- retrotransposition (1)
- retroviral vectors (1)
- retrovirale Vektoren (1)
- retrovirus (1)
- reversible Terminatoren (1)
- reversible terminator (1)
- ribosomes, Arabiodpsis thaliana, pre-rRNA processing, snoRNA, (1)
- rna interference (1)
- sRNA-Bindung (1)
- sRNA-binding (1)
- sage downy mildew (1)
- scFv (1)
- sclerochronology (1)
- scoring function (1)
- secretion (1)
- selbst-anordnende (1)
- sequencing by synthesis (1)
- serine/arginine-rich proteins (1)
- shallow lakes (1)
- shroom (1)
- siRNA (1)
- siderophore-dependent iron uptake (1)
- signal transduction (1)
- simulation (1)
- single particle electron microscopy (1)
- skin equivalent (1)
- sleep (1)
- small RNA (1)
- smooth muscle cell (1)
- smut fungi (1)
- snake bite (1)
- social isolation (1)
- socio-economics (1)
- soluble guanylyl cyclase (1)
- species delimitation (1)
- species distribution modelling (1)
- spheroid (1)
- sphingolipids (1)
- sphingosine (1)
- spinal cord (1)
- spine apparatus (1)
- splicing (1)
- stabile Isotope (1)
- stable isotopes (1)
- stem cells (1)
- stimulus repetition (1)
- stream macroinvertebrates (1)
- structure determination (1)
- structure modeling (1)
- sub-Saharan Africa (1)
- subgenera (1)
- subzelluläre Fraktionierung (1)
- succulents (1)
- sugar uptake (1)
- surround suppression (1)
- survivin (1)
- symbiont association patterns (1)
- synapse (1)
- synaptic plasticity (1)
- synaptic transmission (1)
- synaptic vesicle recycling (1)
- t cell leukemia (1)
- t(4;11) (1)
- targeted cell entry (1)
- tau protein (1)
- taxonomy (1)
- temperature (1)
- termitaria (1)
- time-averaging (1)
- time-processing (1)
- time-resolved absorption spectroscopy (1)
- time-resolved fluorescence (1)
- transcriptome (1)
- transduction B cells (1)
- transglutaminase 2 (1)
- transient absorption (1)
- transiente Absorption (1)
- transkription factor (1)
- transmembran (1)
- tree crops (1)
- trimeric autotransporter adhesin (1)
- trnL-Intron (1)
- trnL-trnF & trnT-trnL Intergenischer Spacer (1)
- tsetse fly (1)
- type I interferon receptor (1)
- tyrosine radical (1)
- unfolded proteins (1)
- unterrichtliche Vor- und Nachbereitung (1)
- varicellovirus (1)
- vegetation (1)
- vegetation history (1)
- venomous snakes (1)
- verwilderte Hauskatzen (1)
- virtuelles Mikroskop (1)
- virtuelles Screening (1)
- woody vegetation (1)
- wwtr1 (1)
- xCGD (1)
- xylose (1)
- yap1 (1)
- zeitaufgelöste Fluoreszenz (1)
- zellfrei (1)
- zellfreie Expression (1)
- zielgerichteter Zelleintritt (1)
- zisternale Organelle (1)
- zonation (1)
- zoogeography (1)
- zyklisch Nukleotid-gesteuerter Ionenkanal (1)
- Ähnlichkeit (1)
- Übertragbarkeit (1)
- ökologische Genetik (1)
Institut
- Biowissenschaften (547)
- Biochemie und Chemie (169)
- Biochemie, Chemie und Pharmazie (78)
- Pharmazie (32)
- Institut für Ökologie, Evolution und Diversität (20)
- Georg-Speyer-Haus (6)
- Medizin (5)
- Geowissenschaften (4)
- Biodiversität und Klima Forschungszentrum (BiK-F) (3)
- Frankfurt Institute for Advanced Studies (FIAS) (3)
Durch Längenmessungen an Exuvien wurden die Größenverhältnisse von Beinlängen, Drehachsenlängen der Beingelenke und der Fläche des Carapax bei C. salei ermittelt. Für die hydraulisch gestreckten Femoro- Patellar- und Tibio-Metatarsalgelenke wurden die Volumen-Winkel-Kennlinien bestimmt. Das Sprungverhalten wurde durch Hochgeschwindigkeits-Videoaufnahmen (Bildfrequenz 500 Hz) mit drei Kameras dokumentiert. Aus den volumetrischen, kinematischen und morphometrischen Daten wurden die Volumenverschiebungen berechnet, die bei Sprungbewegungen auftreten. Aus der prosomalen Volumenverschiebung konnte der korrespondierende Carapaxhub berechnet werden. Mit einer Miniatur- Kraftmeßplattform und einem mit Schrittmotoren getriebenen "x-y-z-Tisch" wurden Steifigkeiten des Prosomas von Perania nasuta Schwendinger, 1989 und ausgewählten anderen Taxa bestimmt. Bei Cupiennius salei gibt es zwei unterschiedliche Sprungtypen: Unvorbereitete Sprünge als Reaktion auf sehr plötzliche Störungen zeichnen sich durch eine große Vielfalt der Bewegungsmuster aus. Vorbereitete Sprünge zeigen charakteristische Beinstellungen und Kontaktphasenmuster: Zunächst erfolgt eine etwa 20 ms dauernde Ausholbewegung, anschließend beginnt die 22 - 42 ms dauernde Beschleunigungsphase. Die Körperlängsachse vollzieht während der Beschleunigungsphase eine Vorwärtsrotation um etwa 50°, die nach dem Verlust des Bodenkontaktes der Beine gestoppt und umgekehrt wird. Dies erfolgt wohl durch ein kontrolliertes Bremsen des Ausstoßes des Sicherheitsfadens. Bei vorbereiteten Sprüngen konnten Sprungweiten bis zu 0.43 m beobachtet werden, die maximalen vertikalen Geschwindigkeiten betrugen 0.07 - 0.82 ms-1, maximale horizontale Geschwindigkeiten lagen bei 0.65 - 1.25 ms-1. Bei vorbereiteten Sprüngen wurden vertikale Beschleunigungen von 0.74 – 33.70 ms-2 und horizontale Beschleunigungen von 20.5 – 68.4 ms-2 erreicht. Die Kontaktphasen der Beine enden in einer charakteristischen Reihenfolge: Die Vorderbeine haben meist keinen Bodenkontakt, die dritten Beine heben nach durchschnittlich 37 % und die vierten Beine nach durchschnittlich 69 % der Dauer der Beschleunigungsphase ab. Zuletzt verlieren die zweiten Beine den Bodenkontakt. Zu Beginn der Beschleunigungsphasen richten sich innerhalb von durchschnittlich 4.6 ms Stacheln auf der Oberfläche der Beine auf. Die Stachelaufrichtung erfolgt bei Drucken von etwa 35 bis etwa 65 kPa. Dies zeigt einen Druckanstieg in den Beinen auf Werte von ³ 65 kPa während der Beschleunigungsphase an. Der Hauptanteil der Volumenverschiebungen in den Beinen wird durch Bewegungen der Femoro-Patellargelenke verursacht. Die Bewegungen der Tibio-Metatarsalgelenke bewirken nur geringe Volumenverschiebungen. Aufgrund der anatomischen Struktur der Trochantero- Femoralgelenke sind die bei Bewegung dieser Gelenke verschobenen Volumina vernachlässigbar klein. Die Abschätzung der zur Beinstreckung bei Sprüngen erforderlichen Carapaxverschiebungen ergab sehr geringe Werte, es sind nur Verschiebungen um wenige 1/100 bis 1/10 mm erforderlich. Für die vollständige Streckung aller Beine muß der Carapax nur um 10% der aufgrund der anatomischen Gegebenheiten maximal möglichen Strecke verschoben werden. Bei den Untersuchungen an Perania nasuta wurden prosomale Steifigkeiten von mehr als 3500 Nm-1 für Weibchen und mehr als 6500 Nm-1 für Männchen ermittelt. Das Prosoma von Perania nasuta ist sehr viel rigider als bei anderen Spinnen (Pholcus: 131 Nm-1, Zelotes: 79 Nm-1, Pardosa: 72 Nm-1, Dysdera: 1900 Nm-1). Die Carapaxverschiebung, die den zur vollständigen Beinstreckung erforderlichen Volumentransport bewirkte, würde bei Perania eine Verformungsarbeit von bis zu 27.56 myJ erfordern, bei den anderen Spinnen nur maximal 1.67 myJ (Dysdera). Das Sprungverhalten von Cupiennius salei läßt sich keinem der bislang beschriebenen Sprungtypen zuordnen. Hinsichtlich der Sprungweite und Geschwindigkeiten sind die Sprungleistungen von Cupiennius mit denjenigen von Salticiden vergleichbar. Die geringen Carapaxverschiebungen beim Sprung lassen sich im Sinne einer Optimierung der Arbeit extrinsischer coxaler Muskeln interpretieren. Eine Minimierung von Carapaxverschiebungen sollte die Koordinierbarkeit der Bewegungen der Coxae erhöhen, weil ein stärker formkonstanter Bezugsrahmen gegeben ist. Dementsprechend lassen sich Bein- und Carapaxdimensionen bei verschiedenen Spinnentaxa im Hinblick auf die jeweiligen Lokomotionsstrategien interpretieren. Die Untersuchungen an Perania nasuta bestätigen die von Kropf (in Vorb.) aufgestellte Hypothese einer starken Versteifung des Prosoma. Die Druckpumpe scheint hier im Opisthosoma lokalisiert zu sein. Hinsichtlich der möglichen Vorteile einer solchen Entwicklung lassen sich einerseits die besseren Bedingungen der Arbeit extrinsischer coxaler Muskeln im vollständig steifen "Gestell" des Prosoma nennen, andererseits könnte aufgrund entsprechender Lokomotionsmodi bei Perania keine Notwendigkeit zur schnellen Verschiebung großer Haemolymphvolumina aus dem Prosoma bestehen, so daß eine leistungsfähige prosomale Druckpumpe wegfallen konnte.
Bei Nicht-Säugern, speziell beim Vogel, kommt es nach einem durch Schall oder ototoxische Substanzen verursachten Innenohrtrauma, zu einer spontanen Regeneration der Haarzellen und weitreichender funktioneller Erholung des Hörvermögens. In bisherigen Untersuchungen konnte gezeigt werden, daß beim Vogel die funktionelle Erholung des Hörvermögens nach Innenohrtrauma, trotz spontaner Regeneration der Haarzellen, nicht vollständig ist. Ziel dieser Studie war es herauszufinden, ob die nach Haarzellschädigung und Regeneration beobachtete unvollständige Restitution des Hörvermögens nach alleiniger Nervenfaserschädigung ausbleibt. In einem ersten Schritt wurde mit immunhistochemischen Methoden untersucht, ob AMPA-Rezeptoruntereinheiten im Innenohr der Taube exprimiert werden. Durch die Verwendung von polyklonalen Antikörpern gegen GluR1, GluR2, GluR3 und GluR4 konnte gezeigt werden, daß diese AMPA-Rezeptoruntereinheiten im Innenohr des Vogels exprimiert werden. Eine punktförmige immunreaktive Färbung konnte sowohl auf den Ganglienzellen als auch unterhalb der Haarzellen, in der Region der Synapsen, für GluR2/3 und GluR4, nicht aber für GluR1 festgestellt werden. Auf den Haarzellen selbst konnte eine immunreaktive Färbung für GuR4 nachgewiesen werden. Die Immunoblotanalyse zeigte für die Antikörper gegen GluR1, GluR2/3 und GluR4 Banden bei dem Molekulargewicht der Proteine von 100 kDa. In einem zweiten Schritt wurden die Auswirkungen von AMPA auf die afferenten Hörnervenfaserendigungen morphologisch und physiologisch untersucht. Es zeigte sich, daß die afferenten Hörnervenfaserendigungen durch Applikation von AMPA in den Recessus scalae tympani (30µl/15 min.) geschädigt wurden. Der Verlauf der CAP (Compound action potential)-Hörschwellenkurven wurde sowohl über einen Zeitraum von 8 Stunden, als auch über einen Zeitraum von mehreren Monaten ermittelt. In ebenfalls durchgeführten Kontrollversuchen, bei denen künstliche Perilymphe ohne AMPA infundiert wurde, traten keine Hörverluste auf. Somit konnte eine Schädigung des Innenohres bzw. Hörverluste durch den operativen Eingriff oder durch die Infusion ausgeschlossen werden. Die beobachteten Hörverluste sind also spezifisch auf die Wirkung von AMPA zurückzuführen. Bei der Applikation von 1 mM AMPA-Lösung konnte eine Erhöhung der Hörschwellen um bis zu 80 dB im hochfrequenten Bereich und bis zu 30 - 40 dB im tieffrequenten Bereich über den Zeitraum von mehreren Stunden beobachtet werden. Am dritten Tag nach der AMPA-Applikation zeigten alle untersuchten Tiere eine Verbesserung der Hörschwellen um 20 - 40 dB. Weitere Messungen über den Zeitraum von zwei bis drei Monate zeigten, daß bei einigen Tieren innerhalb von 7 - 21 Tagen die Hörschwellenkurven die Ausgangswerte des unbehandelten Ohres erreichten, daß aber bei der Mehrheit der Tiere eine Anhebung der Hörschwellen von ca. 20 - 30 dB im hochfrequenten Bereich bestehen blieb. Die mittlere bleibende Schwellenanhebung, gemittelt für alle Frequenzen, betrug 8 dB + 5 dB. Bei den Tieren, bei denen ein hochfrequenter Verlust bestehen blieb, erreichten auch die ermittelten CAP-Amplituden bei den hohen Frequenzen ihre Ausgangswerte nicht mehr. Zusätzlich zu den CAP-Schwellenkurven wurden 13 - 15 Wochen nach AMPA-Instillation die Antworteigenschaften einzelner Hörnervenfasern erhoben. Fasern, deren charakteristische Frequenz (CF) über 0,3 kHz lag, zeigten signifikant erhöhte CF-Schwellen. Für Fasern mit CF-Werten über 0,4 kHz wurden verminderte Q10dB-Werte gefunden, während die Spontanentladungsrate für Fasern mit CF-Werten über 0,18 kHz erhöht war. Die maximale Entladungsrate war bei allen Fasern, für die dieser Wert ermittelt wurde (n = 20), ebenfalls erhöht. Neurone, deren CF über einem Wert von 1,5 kHz lag, konnten, methodisch bedingt, nicht untersucht werden. Diese beobachteten funktionellen Veränderungen in der Aktivität und Sensitivität der auditorischen Neurone weisen darauf hin, daß es bei der Wiederherstellung der Verbindung zwischen Haarzelle und neuraler Synapse zu dauerhaften Schäden kommt. Mittels elektronenmikroskopischer Darstellung konnten bei den Tieren, die direkt nach der Infusion (nach 10 min.) der AMPA-Lösung dekapitiert wurden, große vakuolisierte afferente Terminalien unterhalb der Haarzellen gefunden werden. Die efferenten Nervenendigungen waren nicht beschädigt. Während im apikalen Bereich der Papilla basilaris sehr viele Vakuolen bzw. zerstörte afferente Nervenfaserendigungen zu sehen waren, konnten deutlich weniger Vakuolen im medialen Teil und nur sehr wenige Vakuolen im basalen Teil gefunden werden. Dieser Befund korreliert mit der Verteilung der afferenten Nervenfasern entlang der Papilla basilaris. Bei Tieren, die zwei Wochen nach der AMPA-Applikation dekapitiert wurden, konnten keine morphologischen Veränderungen mehr gefunden werden. Die untersuchten Papillen waren von den Kontrollohren nicht mehr zu unterscheiden. Dies zeigt, daß auf struktureller Ebene scheinbar eine vollständige Rekonstitution der Verbindung zwischen Haarzelle und Synapse stattfindet. Dieser Befund steht im Widerspruch zu den elektrophysiologisch erhobenen Daten. Festzuhalten bleibt, daß auch bei ausschließlicher Schädigung der afferenten Nervenendigungen und trotz deren Neubildung ein residualer Hörverlust bestehen bleibt. Als Ursache für die mangelhafte funktionelle Erholung des Hörvermögens könnten durch die längere Abwesenheit der Nervenfaserendigungen hervorgerufene Veränderungen der Eigenschaften der Haarzellen oder eine veränderte Expression und Funktion der Glutamatrezeptoren in Frage kommen.
Die Grundlage dieser Arbeit bilden Befunde über den Kupfer-Metabolismus des Ascomyceten Podospora anserina. In der Kupfermangel-Mutante grisea ist der Transkriptionsfaktor GRISEA inaktiv, welcher die Aktivität der hochaffinen Kupfer(I)-Permease PaCTR3 kontrolliert. Der Kupfer-Mangel aller Zellkompartimente führt zu pleiotropen Effekten und zu einer moderaten Verlängerung der mittleren Lebensspanne (60%). Um Effekte des Kupfermangels, die positiven bzw. negativen Einfluß auf die Lebensspanne zeigen, voneinander zu trennen, erschien es vielversprechend, den Kupfermangel auf ein Kompartiment der Zelle zu beschränken. In Hefe komplexiert COX17 Kupfer und gibt es im mitochondrialen Intermembranraum an SCO1 und COX11 (Assemblierungsfaktoren der Cytochrom-c-Oxidase) weiter. Zur Aufschlüsselung Kupfer-abhängiger Stoffwechsel-Wege wurde in dieser Arbeit eine PaCox17-Nullmutante konstruiert und charakterisiert. Die PaCox17::ble-Deletionsmutante ist durch AOX-Respiration, hohe Aktivität der Cu/Zn-SOD und ein stabilisiertes Chondriom charakterisiert. Eine vergleichende Analyse von Mutante und Wild-Stamm führte zu folgenden Ergebnissen: 1. Die Disruption des PaCOX17-Weges verhindert die Assemblierung der COX beinahe völlig. COX-Respiration kann nur in sehr geringem Umfang nachgewiesen werden. 2. Der Ausfall der COX induziert die alternative Oxidase und führt zu AOX-Respiration. 3. Die Atmungsrate der Mutante PaCOX17::ble ist, aufgrund der AOX-Respiration, gegenüber dem Wild-Stamm annähernd verdreifacht. 4. Weiterhin zeigen PaCox17::ble-Stämme ein stabilisiertes mitochondriales Genom, normalerweise wird weder plDNA amplifiziert noch wird beta-senDNA gebildet. 5. Der Kupfer-Spiegel des Zytoplasmas ist gegenüber Wild-Stämmen stark erhöht. 6. PaCox17::ble-Stämme sind durch konstant starke Expression der Cu/Zn-SOD charakterisiert. Die Mn-SOD spielt eine untergeordnete Rolle. 7. Die beschriebenen Effekte führen zu einer enormen Verlängerung der mittleren Lebensspanne (1250% des Wild-Stammes). Neben der Isolation und Charakterisierung der Mutante PaCox17::ble wurde PaSco1 isoliert und initial charakterisiert. PaSco1 liegt in P. anserina wahrscheinlich in einer Kopie vor. Es kodiert das Kupferbindeprotein PaSCO1, welches Kupfer vermutlich von PaCOX17 übernimmt und an die Untereinheit 2 der COX weitergibt. In dieser Arbeit wurden Teilaspekte des Kupfermetabolismus von P. anserina untersucht. Von besonderem Interesse waren Zusammenhänge zwischen Kupfer-Metabolismus und mitochondrialen Funktionen. Einen weiteren Schwerpunkt bildeten entwicklungsbiologische Prozesse, der Alterungsprozess war von übergeordneter Bedeutung. Es konnte gezeigt werden, daß Störungen der Kupfer-Homöostase die Respiration, den zellulären oxidativen Stress, die Stabilität des Chondrioms und diverse Entwicklungsprozesse, wie beispielsweise Fortpflanzung und Alterung des Hyphenpilzes beeinflussen.
Das Gerät: Es wurde eine neue Methodik entwickelt zum Messen und Speichern der Flugwege von Brieftauben, die viele Nachteile vorher verwendeter Flugwegeaufzeichnungssysteme vermeidet. Diese Nachteile sind hauptsächlich die begrenzten Reichweite, der hohe Arbeitsaufwand beim Messen, die geringe zeitliche und räumliche Auflösung und die Unmöglichkeit viele vollständige Flugwege zu erhalten. Die gängigen Navigationssysteme wurden auf ihre Eignung zum Messen von Flugwegen bei Brieftauben geprüft. Die Wahl fiel auf das Satellitennavigationssystem GPS, Global Positioning System wegen seiner weltweiten Verfügbarkeit, der unter freiem Himmel unbegrenzten Reichweite, der Meßrate von 1 Position / Sekunde und der räumlichen Genauigkeit von 10-30 m in der horizontalen Position. Die Hauptaufgabe bei der Entwicklung bestand in der Miniaturisierung von GPS, damit die Tauben mit dem Gerät fliegen konnten. Es gelang, ein kleines, funktionsfähiges Gerät von 8,5*4*1.5 cm Größe mit einem Gewicht von 33g zu bauen, das aus einer Hybrid-GPS-Empfängerplatine mit Positionsspeicherung, einer Patchantenne, einer Stromversorgung, einem DC-DC-Konverter und einer Hülle besteht. Die Betriebszeit beträgt 3 - 3,5 Stunden, begrenzt durch die Batteriekapazität. Es können bis zu 90.000 Positionen, jede mit sekundengenauer Zeitangabe und Geschwindigkeit, gespeichert werden. Bei Stromausfall bleiben die Daten erhalten. Das Gerät hat ein Restmagnetfeld von 1500 nT. Nach Flug und Wiederfang der Tiere werden die Daten vom Flugschreiber auf einen Rechner übertragen. Das Tragegeschirr einer anderen Arbeitsgruppe wurde für Tauben abgewandelt, weiterentwickelt und getestet. Die theoretische Genauigkeit der GPS-Positionsbestimmungen konnte in eigenen Tests bei Autofahrten und mit Tauben bestätigt werden. Auswertung: Zur Beschreibung der Flugwege wird ein Satz von Auswerteparametern theoretisch beschrieben. Zu den Parametern werden Berechnungsverfahren angegeben. Es wurde eine Datenkonvertierungs- und eine Auswertesoftware entwickelt, die die Original-NMEA-Nachrichten verwendet. Die Auswertesoftware berechnet die Länge der Flugwege mit unterschiedlicher räumlicher und zeitlicher Schrittweite, die mittlere Geschwindigkeit, Anzahl und Länge der Nichtflugphasen, Verschwinderichtungen und Landeanflugsrichtungen, Abstände von definierten Punkten des Flugwegs zur Luftlinie, Flugwegpunkte in der Nähe der Luftlinie und der Punkt im Flugweg, an dem der Release Site Bias kompensiert ist. Versuchsergebnisse Der Flugschreiber wurde am Boden und auf alten, erfahrenen Brieftauben getestet. Es wurden 125 Flugwege von Brieftauben mit 12 Flugschreibern an 2 Auflaßorten aufgezeichnet und ausgewertet. In den Tests funktionierten die Flugschreiber zuverlässig und erwiesen sich in der Handhabung als robust. Der personelle Aufwand beim Flugwegeaufzeichnen ist klein gegenüber anderen Verfahren. Es wurde ein hoher Anteil von über 90% von vollständigen Flugwegen aufgezeichnet. Die erzielten Flugwege haben eine sehr gute räumliche und zeitliche Auflösung und liefern eine Fülle von Details. Die Menge und Qualität der erzielten Daten ist deutlich besser als die von bisher verwendeten Verfahren. Die Brieftauben konnten das Gerät tragen und mit ihm heimkehren. Die Leistungen der Tauben, die den GPS-Flugschreiber trugen, wurden mit den Leistungen von Kontrolltieren, die entweder nichts oder ein Plastikgewicht trugen, verglichen. Obwohl die Heimkehrzeiten der GPS-Tauben im Bereich der Werte der Kontrolltiere lagen, gab es Beeinträchtigungen bei der Heimkehrleistung und der Heimkehrzeit. Die Heimkehrzeit war zum Teil bei den GPS-Tauben und den Tauben mit Gewicht signifikant länger, wesentlich verursacht durch das Gewicht. Die mittleren Geschwindigkeiten in Flugphasen lagen zwischen 50-70 km/h und und damit im Schnitt unter den von anderen Autoren beobachteten Geschwindigkeiten über Grund für Brieftauben. An einem von zwei Auflaßorten zeigten sich kleine, aber statistisch signifikante Richtungsunterschiede in den Verschwinderichtungen zwischen den GPS-Tauben und Kontrolltauben und zwischen den Tauben mit Gewicht und den Kontrolltauben. Ein Einfluß des Restmagnetfeldes des Gerätes auf die Tauben kann nicht ausgeschlossen werden. Die Flugwege wiesen eine hohe Variabilität auf; aber es gab von beiden Auflaßorten bevorzugte Routen der Tauben. Der in den Vorjahren beobachtete Auflaßort Bias wurde an beiden Orten erneut in den Verschwinderichtungen beobachtet. In den Flugwegen gab es deutliche Entsprechungen zum Auflaßort Bias. In den Landeanflugsrichtungen in Obermörlen gab es ein Landeanflug Bias spiegelbildlich zum Bias am Auflaßort, das es bei den Landeanflugsrichtungen aus Büdesheim nicht gab. Im Verlauf beider Versuchsserien konnte eine Optimierung der Flugwege festgestellt werden, die durch eine Verkürzung der Flugweglängen erzielt wurde. Dies bedeutet, daß auch bei alten, erfahrenen, ortskundigen Tauben eine zunehmende Ortskenntnis und Erfahrung zu immer weiteren Anpassungen beim Heimflug führt. Die Ursache sehr langer Heimkehrzeiten sind längere Pausen. Mittellange Heimkehrzeiten kommen eher durch Schleifenflug und Umwege zustande. Viele Tauben flogen ausgedehnte Schleifen in den Anfangsabschnitten der Flugwege über dem nächsten Dorf oder nahe dem Auflaßort ein Stück in Richtung heim. Spiralige Schleifen um den Auflaßort gab es dagegen fast nie, die Anzahl der geflogenen Schleifen zu Beginn der Flugwege nahm im Verlauf der Versuchsserien nicht ab. Daraus läßt sich schließen, daß der Schleifenflug bei alten, erfahrenen Tauben nicht der Orientierung dient. Vielleicht dient er sozialen Bedürfnissen. Die Anfangsabschnitte der Flugwege in Obermörlen wurden durch die Topografie am Auflaßort beeinflußt. Die Tauben vermieden den Überflug eines bewaldeten Hügels. Es hat den Anschein, daß die Tauben den Überflug von Ortschaften bevorzugten.
Einige Vogelarten verstecken im Herbst Samen, um die Samenverstecke im darauffolgenden Winter wieder auszubeuten. In der vorliegenden Arbeit wurde untersucht, wie sich der Kiefernhäher (Nucifraga columbiana), der Eichelhäher (Garrulus glandarius) und die Sumpfmeise (Parus palustris) beim Schaffen und Ausbeuten ihrer Wintervorräte orientieren. Bei den beiden Häherarten sollte herausgefunden werden, ob der Sonnenkompaß eine Rolle bei der Orientierung spielt, wie schon bei dem Buschblauhäher (WILTSCHKO & BALDA 1989) gezeigt werden konnte. Bei den Sumpfmeisen wurde zum einen untersucht, ob eine experimentelle Veränderung des Erdmagnetfeldes eine Rolle bei der Orientierung spielt. Weiterhin wurde untersucht, ob eine Veränderung der Position von zwei starken Scheinwerfern eine Rolle bei der Orientierung der Meisen spielt. Die Versuche mit Kiefernhähern wurden in Flagstaff (Arizona), die mit Eichelhähern und Sumpfmeisen in Frankfurt am Main durchgeführt. Die Versuche mit Kiefernhähern und Eichelhähern fanden in gleichartigen Volieren unter der natürlichen Sonne statt. Die Vögel durchliefen eine Serie von klassischen Zeitumstellungsversuchen. Die Kiefernhäher wurden darüber hinaus unter verschiedenen Licht- und Schattenverhältnissen getestet. Die Sumpfmeisen wurden in einem Versuchskäfig in einer Holzhütte unter Kunstlichtbedingungen getestet. In einer Versuchsserie wurde die Horizontalkomponete des den Versuchskäfig umgebenden Erdmagnetfeldes um 120° gedreht. In einer weiteren Versuchsserie wurde mit zwei Halogenscheinwerfern gearbeitet, deren Position während der Versuche verändert wurde. Es konnte gezeigt werden, daß sowohl beim Kiefernhäher als auch beim Eichelhäher die Sonne eine entscheidende Rolle bei der Orientierung beim Samenverstecken und der Samensuche spielt. Bei beiden Corvidenarten ist die Sonne hier in einem redundanten, multifaktoriellen System eingebunden wie es auch schon für Zugvögel und Brieftauben nachgewiesen werden konnte. Es gibt Anzeichen dafür, daß Kiefernhäher, die den Tageslauf der Sonne länger nicht mehr mitverfolgen konnten, den Sonnenkompaß erst wieder erlernen müssen. Es konnte gezeigt werden, daß die Genauigkeit, mit der die Kiefernhäher ihre versteckten Samen finden, in mehreren, aufeinander folgenden Versuchen abnimmt. Kiefernhäher besitzen ein komplizierteres Orientierungssystem als der in der Vorstudie (WILTSCHKO & BALDA 1989) untersuchte Buschblauhäher, da sie auch ökologisch mehr auf die versteckten Samen angewiesen sind, als die Buschblauhäher. Desweiteren konnte gezeigt werden, daß Eichelhäher in der Lage sind, die Position von Orten, die ihnen in einer Trainigsphase antrainiert wurde, auch nach einer versuchsfreien Phase von drei Monaten fehlerfrei wiederzufinden. Bei Sumpfmeisen konnte gezeigt werden, daß sie in der Lage sind, sich nichtvisuell zu orientieren. Ob das Erdmagnetfeld hierbei eine Rolle spielt, konnte weder bestätigt noch ausgeschlossen werden. Es konnte gezeigt werden, daß die Position der Halogenscheinwerfer bei der Orientierung der Sumpfmeisen während der Samensuche eine Rolle spielt. Es gelang in dieser Arbeit, die Hypothese zu bestätigen, daß Vögel Kompaßmechanismen nicht nur zur Orientierung während des Vogelzuges oder dem Rückflug zum Nest sondern auch in ihrem unmittelbaren Umgebungsbereich benutzen.
Tunikaten produzieren eine Vielzahl an cytotoxischen und antimikrobiellen Verbindungen, die ihnen in ihrem Ökosystem zu überlebenswichtigen Vorteilen verhelfen. Wegen ihrer strukturellen Diversität und ihrer spezifischen Eigenschaften haben bislang einige dieser Sekundärstoffe Eingang in die pharmazeutische Industrie gefunden. Ziel der vorliegenden Arbeit war eine umfassende Untersuchung des chemischen Potentials benthischer Ascidien der Nordsee. Die Eigenschaften der organischen Ascidienextrakte wurden anhand von vier Bioassays beschrieben. Die Assays fungierten gleichzeitig als Wegweiser zur Isolierung der aktiven Sekundärmetaboliten, der sich eine Strukturaufklärung mit spektroskopischen Methoden (NMR, MS, IR) anschloss. Es wurden Tests auf bewuchshemmende, antimikrobielle, cytotoxische und enzymhemmende Eigenschaften durchgeführt. Eingesetzt wurden organische Extrakte von 13 solitären und koloniebildenden Ascidienarten der nördlichen und südlichen Nordsee. In allen vier Assays zeigten mehrere oder alle Ascidienarten Aktivität. Es ließen sich keine Hinweise auf eine mit der Wuchsform der Arten korrelierte biologische Aktivität sammeln. In einem Freilandversuch zur Untersuchung der besiedlungshemmenden Wirkung der Extrakte konnte gezeigt werden, dass einige Ascidien eine chemische Abwehr von Algensporen oder Epibionten aufweisen, die artspezifisch unterschiedlich stark ausgeprägt ist. Alle Ascidienarten bewiesen antimikrobielle Aktivität, es ergaben sich aber sowohl in der Hemmhofbreite als auch in der Anzahl der gehemmten Bakterienstämme große artspezifische Unterschiede. Auffallend war, dass deutlich mehr Gram-positive sowie marine Bakterienstämme als Gram-negative bzw. nicht-marine Bakterienstämme inhibiert wurden. Im Gegensatz zur antimikrobiellen Aktivität wurden in den Assays zur Cytotoxizität und zur spezifischen Enzymhemmung lediglich bei jeweils vier Ascidienarten positive Effekte festgestellt. Durch die spezifische Anfärbung von Zellorganellen konnten morphologische Veränderungen, die durch die Ascidienmetaboliten in den Mausfibroblasten induziert wurden, sichtbar gemacht und der Einfluß der Extrakte auf das Cytoskelett und spezifische Zellfunktionen dokumentiert werden. Im Protein-Tyrosin-Kinase-Assay führte eine Bioassay-guided Fractionation von Extrakten der Ascidie Dendrodoa grossularia zur Isolierung der aktiven Substanz. Über spektroskopische Methoden sowie den Vergleich mit Literaturdaten konnte der enzymhemmende Metabolit als das Guanidinostyren Tubastrin identifiziert werden. Tubastrin wurde im Rahmen dieser Arbeit erstmals in Tunikaten nachgewiesen. Der Metabolit zeigte als Reinsubstanz nur geringe cytotoxische Effekte und keine antimikrobiellen Eigenschaften. Als weitere Metaboliten der Ascidien Dendrodoa grossularia und Ascidiella aspersa wurden Homarin, Betain, Adenosin und Inosin identifiziert. Keiner dieser Substanzen konnte in der vorliegenden Arbeit eine biologische Aktivität zugeordnet werden. Während Betain, Adenosin und Inosin Funktionen innerhalb des Primärmetabolismus besitzen oder als Zwischenprodukte in Synthesewege eingebunden sein können, stellt Homarin einen Sekundärmetaboliten dar, der in einer Vielzahl von marinen Organismen unterschiedliche Funktionen erfüllt. Seine Aufgabe in Tunikaten muss durch weitere Untersuchungen geklärt werden. Dass antimikrobielle Aktivität bei allen Ascidienarten gefunden wird, lässt auf eine grundlegende Bedeutung prokaryontischer Abwehr schließen. Die Unterschiede in der Stärke der Effekte aller Bioassays legen nahe, dass jede Ascidienart eine eigene Gesamtstrategie zur Verteidigung gegen Bewuchs und Fraßfeinde ausgebildet hat. Die aus den Laborversuchen erhaltenen Daten verdeutlichen eine weitreichende biologisch-chemische Aktivität von Aplidium punctum, Dendrodoa grossularia und Didemnum candidum, die neben der antimikrobiellen auch starke cytotoxische und/oder enzymhemmende Wirkung gezeigt haben. Die Lokalisation der aktiven Substanzen im Tier sowie eingehendere Versuche zur molekularen Wirkungsweise sind notwendig, die beobachteten Aktivitäten umfassend zu deuten und ihre Nutzbarkeit unter pharmakologischen Gesichtspunkten zu evaluieren.
Die mittelamerikanische Jagdspinne Cupiennius salei Keys. zeigt nach Reizung ventraler Tasthaare auf den proximalen Beingliedern in freier Natur und auch im Labor das relativ einfache, reflektorische Verhalten des „Körperanhebens“. Ziel der vorliegenden Arbeit war, den am Körperanheben maßgeblich beteiligten Coxamuskel c2 hinsichtlich seiner Anatomie, seiner funktionellen Faserzusammensetzung und Innervation sowie seiner Aktivität beim „Körperanheben“ und bei weiteren Bewegungsweisen der Spinne zu untersuchen. (1) Der c2-Muskel liegt im Prosoma der Spinne und setzt für jedes Bein am anterioren Coxarand an. In den 1. - 3. Beinpaaren liegt c2 zweigeteilt (apodemaler und tergaler Anteil), im Hinterbeinpaar dagegen einteilig (nur tergaler Anteil) vor. (2) Histochemische Nachweisreaktionen (Glykogengehalt, relative Succinatdehydrogenase- und relative myofibrilläre Adenosintriphosphatase-Aktivität) ergeben eine heterogene Faserzusammensetzung des c2-Muskels aus 4 Muskelfasertypen (A, B, C, D). Der apodemale c2-Anteil besteht homogen aus A-Fasern. (3) Messungen mit Laserdiffraktometrie zeigen für die A- und B-Fasern signifikant kürzere Sarkomerlängen als für die C- und D-Fasern. (4) Sodium-Dodecylsulfat-Polyacrylamid-Gelelektrophorese weist als Besonderheit für die A- und B-Fasern eine Paramyosin-Isoform P1 (107 kDa), eine Isoform der leichten Ketten des Myosins LC2 (22 kDa) und vermehrt eine Troponin-Isoform T4 (46 kDa) nach. In den Cund D-Fasern kommt allein eine 43-kDa-Bande und vermehrt eine Troponin-Isoform T2 (50 kDa) vor. (5) Der c2-Muskel der Vorder- und Hinterbeine wird durch einen eigenen Nerv innerviert. Retrograde Anfüllungen („Backfills“) des Nervs mit neuronalen Tracern legen eine polyneurale Innervation des c2-Muskels aller Beine dar, höchstwahrscheinlich jeweils durch 6 Motoneurone. Zwei davon sind jeweils positiv GABA (Gamma-Amino-Buttersäure) -immunreaktiv; dies ist ein Hinweis auf eine mögliche inhibitorische Innervation des c2-Muskels. (6) Wie Elektromyogramme freilaufender Spinnen zeigen, besteht das Körperanhebeverhalten aus zwei aufeinanderfolgenden Reaktionen: einer lokalen c2-Kontraktion im taktil gereizten Bein, die eine Bewegung im zugehörigen Prosoma-Coxa-Gelenk verursacht, und einer durch diese aktive Bewegung hervorgerufenen plurisegmentalen Reaktion im c2 der übrigen 7 Beine. Wird eine Coxa passiv bewegt, kann auch in festgelegten Spinnen eine plurisegmentale Reaktion aller 8 Beine ausgelöst werden. (7) Sowohl bei der lokalen als auch bei der plurisegmentalen Reaktion des „Körperanhebens“ rekrutiert c2 die gleichen neuromuskulären Einheiten. Dies deutet auf die gleiche zentalnervöse Endstrecke beider Reaktionen hin. Die Anzahl der elektrophysiologisch unterscheidbaren neuromuskulären Einheiten stimmt mit der der anatomisch nachgewiesenen Motoneuronen und Fasertypen überein. (8) Der tergale c2-Anteil ist immer, der apodemale Anteil nur bei schnellem Körperanheben, schnellen Laufstarts und bei Schreckreaktionen (Flucht) der Spinne aktiv. Hierbei rekrutiert der apodemale Teil nur zu Beginn der Verhaltensweise schnelle phasische Einheiten. (9) Ich diskutiere bei welchen Bewegungsweisen der Spinne die 4 Fasertypen vermeindlich zum Einsatz kommen, wie sie höchstwahrscheinlich innerviert werden und welche Konsequenzen die c2-Zweiteilung in den vorderen Beinpaaren (1 - 3) auf die Beinbewegung im Verhalten haben könnte. Am wahrscheinlichsten ist eine verstärkte Druckerhöhung zur Beinextension durch schnelle anfängliche Kontraktionen des „apodemalen Hebels“ und eine vektorielle Kräfteaddition der zwei Muskelteile. (10) Anhang II behandelt den internen Gelenkrezeptor R0 im Prosoma-Coxa-Gelenk. Ausschaltversuche weisen R0 als unentbehrlich für das Zustandekommen der plurisegmentalen Reaktion aus. Lage und Anordnung der R0-Sinneszellen sind in den Beinpaaren 1 - 3 und den Hinterbeinen verschieden.
Extrazelluläre Nukleotide fungieren als auto- und parakrine Signalstoffe aus. Im peripheren und zentralen Nervensystem dienen Nukleotide als Neurotransmitter und Neuromodulatoren. Die nahezu ubiquitäre Expression von Purin-Rezeptoren läßt auf umfassende physiologische Funktionen schließen. Nukleotide konnen über ionotrope P2X-Rezeptoren oder metabotrobe P2Y-Rezeptoren ihre Signalwirkung vermitteln. Via P1-Rezeptoren kann Adenosin, ein Baustein bzw. Abbauprodukt von ATP, seine neuromodulatorische und neuroprotektive Wirkung entfalten. Alkalische Phosphatasen, die Ekto-Nukleotid-Pyrophosphatase/Phosphodiesterase Familie (NPP-Familie) und die Ekto-Nukleosid-Triphosphat-Diphosphohydrolase-Familie (E-NTPDasen) können Nukleosiddiphosphate und Nukleosidtriphosphate hydrolysieren. Die E-NTPDasen sind die wahrscheinlichsten Kandidaten für die Moduluation purinerger Signale im Nervensystem. In dieser Arbeit wurde die Klonierung und Charakterisierung der NTPDase3 der Ratte beschrieben. Ein vollständiger cDNA-Klon der NTPDase3 wurde aus einer Rattenhirnbank isoliert, sequenziert und anhand der familientypischen Sequenzmuster (ACRŽs) als E-NTPDase identifiziert. Die Sequenz enthielt einen offenen Leserahmen der für ein 529 Aminosäuren großes Protein kodierte. Sequenzvergleiche zeigten eine große Ähnlichkeit des Proteins mit den NTPDasen 1, 2 und 8, welche plasmamembranständige Ekto-Enzyme sind. Eine plasmamembranständige Lokalisation konnte in NTPDase3-transfizierten CHO-Zellen und in PC12-Zellen mit endogener NTPDase3-Expression nachgewiesen werden. Anhand von Computeranalysen und Sequenzvergleichen wurden Überlegungen zur Sekundär- und Tertiärstruktur angestellt und Ähnlichkeiten zur Zuckerkinase/ Hitzeschock-Protein 70/Aktin-Superfamilie aufgezeigt. Das Protein war entsprechend der in silico-Analyse glykosiliert und ließ sich über das Lektin ConcavalinA anreichern. Messungen an Membranfraktionen heterelog transfizierter CHO-Zellen zeigten die Hydrolyse verschiedener Nukleosidtriphosphate und Nukleosiddiphosphate mit einer Präferenz für Nukleosidtriphosphate. Das Enzym ist primär Kalziumabhängig und a rbeitet optimal im physiologischen pH-Bereich von pH 7,5 bis pH 8,0. Mit einem ATPase:ADPase-Verhältnis von 5:1 liegt die NTPDase3 zwischen der NTPDase1 und der NTPDase2. Seine biochemischen Eigenschaften machen das Ekto-Enzym zu einem Kandidaten für die Modulation purinerger Signale. Nukleotid-vermittelte Signale können via Hydrolyse durch die NTPDase3, möglicherweise in Kombination mit anderen E-NTPDasen, beendet werden. Als Bestandteil einer Enzymkette mit der Ekto-5Ž-Nukleotidase kann das Enzym zur Produktion des neuromodulatorisch und neuroprotektiv wirkenden Adenosins beitragen. Mögliche Rollen bei der Regulation autokriner, parakriner und synaptischer Signale in nichtneuronalen wie neuronalen Geweben wurden für die Gewebe diskutiert, in denen die NTPDase3 per Westernblot nachgewiesen werden konnte. Neben Dünndarm, Prostata, Pancreas, Nebenhoden und Samenleiter wurde ein NTPDase3-Band vor allem im zentralen Nervensystem gefunden. In allen geprüften Hirnteilen (Bulbus olfactorius, Cerebellum, Cortex, Mesencephalon, Diencephalon, Hippocampus, Striatum, Medulla oblongata), dem Rückenmark und der Hypophyse wurde die NTPDase3 im Westernblot detektiert. Das Enzym könnte an der Regulation exokriner Drüsenfunktionen im Pancreas und am epithelialem Ionentransport involviert sein oder auch bei endokrinen Funktionen des Pankreas und der Hypophyse mitwirken. Möglicherweise hat die NTPDase3 funktionelle Bedeutung bei der Termination und Modulation purinerger Neurotransmission im enterischen Nervensystem, im Rückenmark und in verschiedenen Hirnregionen. An verschiedenen zentralnervösen Funktionen, wie Schmerzwahrnehmung, Atmungs- und Kreislauf-Regulation sowie Gedächtnis- und Lernprozessen sind purinerge Signale maßgeblich beteiligt und es ist wahrscheinlich, daß E-NTPDasen an der Modulation dieser Signale mitwirken. Die in dieser Arbeit beschriebene NTPDase3 ist ein viel versprechender Kandidat für die Regulation purinerger Signale im peripheren und zentralen Nervensystem.
Ein gentherapeutischer Ansatz für die Behandlung der HIV-Infektion ist die "intrazelluläre Immunisierung" von CD4+-Zellen die den Hauptangriffspunkt des HI-Virus darstellen. Potentiell therapeutische Gene zur Hemmung der HIV-Replikation sind in großer Zahl und für praktisch jeden schritt des Replikationszyklus des Virus publiziert. Ein Problem war allerdings bisher das Fehlen eines einheitlichen und reproduzierbaren Vergleichssystems zur Identifizierung erfolgversprechender Gene für Studien im Tiermodell und in der Klinik. In dieser Arbeit wurde ein solches auf die Gentherapie abgestimmtes Zellkultursystem entwickelt, das auf stabilem Transfer von HIV-inhibitorischen Genen durch retrovirale Transduktion von T-Zellen und Belastungsversuchen mit replikationsfähigen Viren beruht. Dazu wurden auf Basis der humanen T-Zellinie PM1 Zellinien etabliert, die das Markergen egfp sowie ein therapeutisches Gen stabil exprimieren. Für den Gentransfer wurden [MLV(GaLV)]-Vektoren verwendet, die sich für die Transduktion von hämatopoetischen Zellen besonders eignen. Mit Hilfe der etablierten HIV-inhibitorischen Gene RevM10 und STHM (membrangebundenes T20) wurden Methoden zur Generierung dieser stabilen Zellinien optimiert. Um eine höchstmögliche Vergleichbarkeit zu erreichen, müssen die Voraussetzungen für eine HIV-Replikation in allen Zellinien in gleicher Weise gegeben sein. Deshalb wurden Zellinien bei mit praktisch gleicher Zellteilungsrate und HIV-Rezeptorexpression etabliert. Die untrschiedliche Hemmwirkung der Kontrollgene konnte so in Belastungsexperimenten mit drei verschiedenen, repräsentativen HIV-1-Laborstämmen reproduzierbar gezeigt werden. Das erarbeitete Zellkultursystem wurde dann zur Evaluierung verschiedener Gene eingesetzt. Zunächst wurden zwei neue Ansätze für die HIV-Gentherapie getestet. Die hohe Wirksamkeit von APOBEC3Gagm gegen HIV-1, die zuvor in einem "single-round"-Infektionssystem gezeigt worden war, konnte bestätigt werden. Der Versuch, das als natürlicher HIV-Inhibitor in humanem Hämofiltrat gefundene Peptild VIRIP auf der Zelloberfläche zu exprimieren, bewirkte hingegen keine HIV-Hemmung. Zusätzlich wurden mehrere potentiell therapeutische Gene getestet, die von Kooperationspartnern im Rahmen eines HIV-Netzwerkes entwickelt worden waren. Für die humanisierte transdominant-negative Gag-Mutante TDsg Delta 2 konnte eine HIV-Hemmwirkung nachgewiesen werden, während weder die Wildtyp-Mutante TDwt Delta 2 noch das minimale GAG-Fragment L2GAL2-V3 eine signifikante Wirkung zeigten. Für die beiden HIV-1 p6-Konstrukte L4 und L6 war eine HIV-Hemmung ebensowenig wie für die gp41 c-tail-Konstrukte 9/1 und 9/2 feststellbar. In weiteren Versuchen konnte gezeigt werden, daß sich die Hemmwirkung der unterschiedlichen Gene gegen HIV-1-Primärisolate im wesentlichen der gegen die Laborstämme entspricht. Nach Infektion der Zellinien mit HIV-2 wurde wie erwartet die Virusreplikation nur durch STHM und TDsg Delta 2 gehemmt. Schließlich wurde getestet, ob sich die Hemmeffekte auch in primären humanen Lymphozyten nachvollziehen lassen. Obwohl aufgrund der in diesen Zellen niedrigen erreichbaren Transduktionseffizienzen und einer starken Donorabhängigkeit keine Standardisierung möglich war, konnte gezeigt werden, daß es prinzipiell möglich ist, Hemmeffekte sichtbar zu machen.
Humanpharmaka stellen eine permanente Belastung von Gewässern dar. Im Rahmen der vorliegenden Arbeit wurde erstmals gemäß dem von der Europäischen Arzneimittelagentur EMEA entwickelten Konzept zur Durchführung von Umweltrisikobewertungen von Humanpharmaka mit mehreren ausgewählten Substanzen Umweltrisikobewertungen durchgeführt. Die hierfür ausgewählten Pharmaka sind das Antiepileptikum Carbamazepin (CBZ), das Antibiotikum Sulfamethoxazol (SMX) und das synthetische Östrogen 17a-Ethinylöstradiol (EE2). Als Vertreter der Inhaltsstoffe von Körperpflegeprodukten wurde der polyzyklische Moschusduftstoff Tonalid (AHTN) in die Untersuchungen mit einbezogen. Mit Hilfe von Literaturrecherchen wurde die Datengrundlage für Expositions- und Wirkungsabschätzungen bereitgestellt. Der vorhandene recherchierte Datensatz wurde mit entsprechenden Kurz- und Langzeitstudien ergänzt. Die mit den Ergebnissen der Expositions- und Wirkungsabschätzungen vorgenommenen Umweltrisikobewertungen ergaben im ersten Schritt basierend auf Kurzzeitstudien unter den ausgewählten Substanzen lediglich für den Moschusduftstoff AHTN ein erhöhtes Umweltrisiko für Oberflächengewässer. Basierend auf weiterführenden Langzeitstudien konnte das zunächst erkannte, durch AHTN indizierte Umweltrisiko entkräftet werden, jedoch ergaben die Risikocharakterisierungen für EE2 und SMX ein erhöhtes Risiko für das aquatische Kompartiment. Auf Grund der erhöhten Adsorptionspotenziale von CBZ, EE2 und AHTN wurden für diese Substanzen kompartimentspezifische Umweltrisikocharakterisierungen durchgeführt. Dabei wurde ein erhöhtes Umweltrisiko durch CBZ für das Kompartiment Sediment angezeigt. Basierend auf den Ergebnissen einer Sediment-Bioakkumulationsstudie mit dem endobenthischen Oligochaeten Lumbriculus variegatus, welche in einen unerwartet hohen Akkumulationsfaktor resultierte, und aus der Literatur verfügbaren Fisch-Biokonzentrationsfaktoren wurde anhand der Nahrungskette Wasser-Sediment-Wurm-Fisch die Möglichkeit des ‚secondary poisonings’ durch EE2 bei wurmfressenden Fischen unter natürlichen Bedingungen aufgezeigt. Zur Verwendung dieses Ergebnisses in einer Umweltrisikobewertung zum Zwecke der Zulassung von Pharmaka sollten weitergehende Untersuchungen zur Bestätigung durchgeführt werden. Bezugnehmend auf die Resultate der eigenen Studien und auf die besonderen Eigenschaften von Humanpharmaka wurde der EMEA-Richtlinienentwurf diskutiert und Verbesserungsvorschläge erarbeitet. Bis auf wenige Anpassungen geht das EMEA-Bewertungsschema nicht auf die Besonderheiten und spezifischen Eigenschaften von Humanpharmaka ein. Hauptkritikpunkte bezogen sich auf (1) die Anwendung eines konzentrationsabhängigen Schwellenwertes als Entscheidungsgrundlage zur Durchführung einer Risikocharakterisierung, (2) das stufenweise Vorgehen bei der Wirkungsabschätzung mit zuerst ausschließlich auf Kurzzeitstudien basierenden Effektdaten, und (3) unzureichende Angaben zu Vorgehensweisen in der höheren Stufe des Bewertungsschemas, vor allem bei Substanzen mit außergewöhnlichem ökotoxikologischen Potenzial. Trotz der zur Zeit intensiven internationalen Diskussion über mögliche Auswirkungen durch endokrine Disruptoren auf Mensch und Umwelt sieht der EMEA-Richtlinienentwurf nicht ausdrücklich vor, die Umweltgefährdung durch potenziell endokrin wirksame Substanzen mit spezifischen Testmethoden festzustellen und zu bewerten. Die Erkenntnis, dass spezifische Wirkmechanismen bei Chemikalien, speziell bei Arzneimitteln und Bioziden, auch in sehr niedrigen Konzentrationen zu Wirkungen in der Umwelt führen können, bleibt im EMEA-Richtlinienentwurf auf Grund der Einführung eines expositionsbezogenen Schwellenwertes und der Wirkungsabschätzung mittels Akutstudien nur unzureichend berücksichtigt. Zur Schließung dieser Lücke, die durch Untersuchungen zu endokrinen Wirkungen in der Umwelt offensichtlich wurde, müssen neue und bessere ökotoxikologische Instrumente entwickelt werden und das Umweltrisikobewertungsschema entsprechend erweitert und angepasst werden.
The mammalian retina contains around 30 morphological varieties of amacrine cell types. These interneurons receive excitatory glutamatergic input from bipolar cells and provide GABA- and glycinergic inhibition to other cells in the retina. Amacrine cells exhibit widely varying light evoked responses, in large part defined by their presynaptic partners. We wondered whether amacrine functional diversity is based on a differential expression of glutamate receptors among cell populations and types. In whole cell patch-clamp experiments on mouse retinal slices, we used selective agonists and antagonists to discriminate responses mediated by NMDA/ non-NMDA (NBQX) and AMPA/ KA receptors (cyclothiazide, GYKI 52466, GYKI 53655, SYM 2081). We sampled a large variety of individual cell types, which were classified by their dendritic field size into either narrow-field or wide-field cells after filling with Lucifer yellow or neurobiotin. In addition, we used transgenic GlyT2-EGFP mice, whose glycinergic neurons express EGFP. This allowed us to classify amacrines on basis of their neurotransmitter into either glycinergic or GABAergic cells. All cells (n = 300) had good responses to non-NMDA agonists. Specific AMPA receptor responses could be obtained from almost all cells recorded: 94% of the AII (n = 17), 87% of the narrow-field (n = 45), 81% of the wide-field (n = 21), 85% of the glycinergic (n = 20) and 78% of the GABAergic cells (n = 9). KA receptor selective drugs were also effective on the majority of the AII (79%, n = 14), narrow-field (93%, n = 43), wide-field (85%, n = 26), glycinergic (94%, n = 16) and GABAergic amacrine cells (100%, n = 6). Among the cells tested for the two receptors (n = 65), we encountered both exclusive expression of AMPA or KA receptors and co-expression of the two types. Most narrow-field (70%, n = 27), glycinergic (81%, n = 16) and GABAergic cells (67%, n = 6) were found to have both AMPA and KA receptors. In contrast, only less than half of the wide-field cells (43%, n = 14) were found to co-express AMPA and KA receptors, most of them expressing exclusively AMPA (36%) or KA receptors (21%). We could elicit small NMDA responses from most of the wide-field (75%, n = 13) and GABAergic cells (67%, n = 3), whereas only 47% of the narrow-field (n = 15), 14% of the AII (n = 22) and no glycinergic cell (n = 2) reacted to NMDA. Abstract 83 Our data suggest that AMPA, KA and NMDA receptors are differentially expressed among different types of amacrine cells rather than among populations with different neurotransmitters or different dendritic coverage of the retina. Selective expression of kinetically different glutamate receptors among amacrine types may be involved in generating transient and sustained inhibitory pathways in the retina. Since AMPA and KA receptors are not generally clustered at the same postsynaptic sites, a single amacrine cell expressing both AMPA and KA receptors may provide inhibition with different temporal characteristics to individual synaptic partners.
Life of Varroa destructor, Anderson and Trueman, an ectoparasitic mite of honeybees, is divided into a reproductive phase in the bee brood and a phoretic phase during which the mite is attached to the adult bee. Phoretic mites leave the colony with workers involved in foraging tasks. Little information is available on the mortality of mites outside the colony. Mites may or not return to the colony as a result of death of the infested foragers, host change by drifting of foragers, or removal of mites outside the colony. That mites do not return to the colony was indicated by substantially higher infestation of outflying workers compared to the infestation of returning workers (Kutschker, 1999). The main objective of the study was to provide information whether V. destructor influences flight behaviour of foragers and consequently returning frequency of foragers to the colony. I first repeated the experiment of Kutschker (1999) examining the infestation of outflying and returning workers. Further, I registered flight duration of foragers using a video method. In this experiment I compared also the infestation and flight duration of bees of different genetic origin, Carnica from Oberursel and bees from Primorsky region. I investigated returning time of workers, returning frequency until evening, drifting to other colonies and orientation toward the nest entrance in the experiments in which workers were released in close vicinity of the colony. At last, I measured the loss of foragers in relation to colony infestation using a Bee Scan. Results from this study, listed below, showed considerable influence of V. destructor on flight behavior of foragers translating into loss of mites. Loss of mites with foragers add substantial component to mite mortality and was underestimated in previous studies. Such loss might be viewed as a mechanism of resistance against V. destructor. a) The mean infestation of outflying workers (0.019±0.018) was twice as the mean infestation of returning workers (0.009±0.018). The difference in the infestation between outflying and returning workers was more marked in highly infested colonies. b) Investigation of individually tagged workers by use of a two camera video recording device showed significantly higher infestation of outflying workers compared to returning workers. Mites were lost by the non returning of infested foragers (22%) and by loss of mites from foragers that returned to the colony without the mite (20%). A small portion of mites (1.8%) was gained. Loss of mites significantly exceeded mite gain. c) The flight duration of infested workers determined by using the same two camera video system was significantly higher in infested compared to uninfested workers of the same age that flew closest at time. The median flight duration of infested workers was 1.7 higher (214s) than the median duration of unifested workers (128s). d) Infested workers took 2.3 times longer to return to the colony than uninfested workers of the same age when released from the same locations, closest at time. The returning time increased with the distance of release. In a group of bees released simultaneously the infestation was higher in bees returning later and in those that did not return in the observation period of 15 min. e) Released workers did not return to the colony 1.5 more frequently than uninfested workers in evening. The difference in returning was significant for locations of 20 and 50m from the colony. No difference in returning between infested and uninfested workers were observed for the most distant location of 400m. f) No significant difference was found in returning time and/or in the returning frequency until evening between workers artificially infested overnight and naturally infested workers. Artificially infested workers returned later and less frequently than a control group indicating rapid influence of V. destructor on flight behavior of foragers. g) The orientation ability of infested workers toward the nest entrance was impaired. Infested workers compared to uninfested workers twice as often approached a dummy entrance before finding the nest entrance. h) No significant differences were found in drifting between infested and uninfested workers. Drifting in the neighboring nucleus colony occurred in about 1% occasions after release of marked workers. Similarly, more infested, but not significantly more infested workers (2.6%) entered a different colored hive than the same colored hive (1.9%). However, the number of drifting bees were to low to make results conclusive. i) The comparison between Carnica and Primorsky workers revealed higher infestation in Carnica compared to Primorsky. Further, Primorsky workers lost more mites during foraging due to mite loss from foragers and non returning of infested workers. No significant differences in flight duration were observed between the two bee stocks. j) Loss of foragers, as determined by the Bee Scan counts of outflying and returning foragers, and the infestation of outflying bees increased significantly over a period of 70 days. A colony with 7.7. higher infestation of outflying foragers lost 2.2. time more bees per flight per day compared to a low infested colony. k) The estimates of mite loss with foragers from mite population per day up to 3.1% exceeds approximately mite mortality of 1% within the colony as represented by counting dead mites on bottom board inserts.
In contrast to the class A heat stress transcription factors (Hsfs) of plants, a considerable number of Hsfs assigned to classes B and C have no evident function as transcription activators on their own. In the course of my PhD work I showed that tomato HsfB1, a heat stress induced member of class B Hsf family, is a novel type of transcriptional coactivator in plants. Together with class A Hsfs, e.g. tomato HsfA1, it plays an important role in efficient transcrition initiation during heat stress by forming a type of enhanceosome on fragments of Hsp promoter. Characterization of promoter architecture of hsp promoters led to the identification of novel, complex heat stress element (HSE) clusters, which are required for optimal synergistic interactions of HsfA1 and HsfB1. In addition, HsfB1 showed synergistic activation of the expression of a subset of viral and house keeping promoters. CaMV35S promoter, the most widely expressed constitutive promoter turned out to be the the most interesting candidate to study this effect in detail. Because, for most house-keeping promoters tested during this study, the activators responsible for constitutive expression are not known, but in case of CaMV35S promoter they are quite well known (the bZip proteins, TGA1/2). These proteins belong to the acidic activators, similar to class A Hsfs. Actually, on heat stress inducible promoters HsfA1 or other class A Hsfs are the synergistic partners of HsfB1, whereas on house-keeping or viral promoters, HsfB1 shows synergistic transcriptional activation in cooperation with the promoter specific acidic activators, e.g. with TGA proteins on 35S promoter. In agreement with this the binding sites for HsfB1 were identified in both house-keeping and 35S promoter. It has been suggested during this study that HsfB1 acts in the maintenance of transcription of a sub-set of house-keeping and viral genes during heat stress. The coactivator function of HsfB1 depends on a single lysine residue in the GRGK motif in its CTD. Since, this motif is highly conserved among histones as the acetylation motif, especially in histones H2A and H4,. It was suggested that the GRGK motif acts as a recruitment motif, and together with the other acidic activator is responsible for corecruitment of a histone acetyl transferase (HAT). So, the effect of mammalian CBP (a well known HAT) and its plant orthologs (HAC1) was tested on the stimulation of synergistic reporter gene activation obtained with HsfA1 and HsfB1. Both in plant and mammalian cells, CBP/HAC1 further stimulated the HsfA1/B1 synergistic effect. Corecruitment of HAC1 was proven by in vitro pull down assays, where the NTD of HAC1 interacted specifically both with HsfA1 and HsfB1. Formation of a ternary complex between HsfA1, HsfB1 and CBP/HAC1 was shown via coimmunoprecipitation and electrophoretic mobility shift assays (EMSA). In conclusion, the work presented in my thesis presents a new model for transcriptional regulation during an ongoing heat stress.
In an attempt to search for potential candidate molecules involved in the pathogenesis of endometriosis, a novel 2910 bp cDNA encoding a putative 411 amino acid protein, shrew-1 was discovered. By computational analysis it was predicted to be an integral membrane protein with an outside-in transmembrane domain but no homology with any known protein or domain could be identified. Antibodies raised against the putative open-reading frame peptide of shrew-1 labelled a protein of ca. 48 kDa in extracts of shrew-1 mRNA positive tissues and also detected ectopically expressed shrew-1. In the course of my PhD work, I confirmed the prediction that shrew-1 is indeed a transmembrane protein, by expressing epitope-tagged shrew-1 in epithelial cells and analysing the transfected cells by surface biotinylation and immunoblots. Additionally, I could show that shrew-1 is able to target to E-cadherin-mediated adherens junctions and interacts with the E-cadherin-catenin complex in polarised MCF7 and MDCK cells, but not with the N-cadherin-catenin complex in non-polarised epithelial cells. A direct interaction of shrew-1 with beta-catenin could be shown in an in vitro pull-down assay. From this data, it could be assumed that shrew-1 might play a role in the function and/or regulation of the dynamics of E-cadherin-mediated junctional complexes. In the next part of my thesis, I showed that stable overexpression of shrew-1 in normal MDCK cells. causes changes in morphology of the cells and turns them invasive. Furthermore, transcription by ²-catenin was activated in these MDCK cells stably overexpressing shrew-1. It was probably the imbalance of shrew-1 protein at the adherens junctions that led to the misregulation of adherens junctions associated proteins, i.e. E-cadherin and beta-catenin. Caveolin-1 is another integral membrane protein that forms complexes with Ecadherin- beta-catenin complexes and also plays a role in the endocytosis of E-cadherin during junctional disruption. By immunofluorescence and biochemical studies, caveolin-1 was identified as another interacting partner of shrew-1. However, the functional relevance of this interaction is still not clear. In conclusion, it can be said that shrew-1 interacts with the key players of invasion and metastasis, E-cadherin and caveolin-1, suggesting its possible role in these processes and making it an interesting candidate to unravel other unknown mechanisms involved in the complex process of invasion.
Die frühe Entwicklung und Differenzierung der sympathischen Ganglien wird durch ein Netzwerk von proneuralen (Mash1/Cash1) und autonomen (Phox2a/b, dHand) Transkriptionsfaktoren kontrolliert. Diese Transkriptionsfaktoren induzieren direkt oder indirekt die Expression neuronaler (SCG10) und subtypspezifischer noradrenerger (TH, DBH) oder cholinerger (ChAT, VAChT) Gene. Die Analyse der frühen Genexpression im Ciliarganglion zeigte ein bemerkenswert ähnliches zeitliches Expressionsschema. Zwei bedeutende Unterschiede sind einerseits die nur transiente Expression noradrenerger Gene und andererseits die Abwesenheit des bHLH-Transkriptionsfaktors dHand, der selektiv in den sympathischen Ganglien exprimiert ist. Das Netzwerk der Transkriptionsfaktoren in den sympathischen Ganglien ist abhängig von einem BMP-Signal aus der dorsalen Aorta. BMPs sind notwendig und ausreichend für die Expression der genannten Transkriptionsfaktoren und damit für die Bildung der sympathischen Ganglien. Diese Arbeit zeigt, daß BMPs auch für die Entwicklung des Ciliarganglions notwendig und ausreichend sind. Fehlen BMPs, differenzieren die Vorläuferzellen nicht, wird BMP4 überexprimiert, differenzieren sie, anders als sympathische Vorläuferzellen im Brachialnerv, zu Zellen mit parasympathischem Phänotyp. Die vorliegenden Ergebnisse weisen auf eine Präspezifizierung von Ciliarvorläuferzellen und sympathischen Vorläuferzellen hin. Der bHLH-Transkriptionsfaktor dHand ist differentiell in sympathischen Vorläuferzellen exprimiert. Seine Expression ist notwendig für die noradrenerge Differenzierung, und die Überexpression im Ciliarganglion reicht aus, um in den Ciliarneuronen die Expression von TH/DBH zu erhalten. Verschiedene Arbeiten schlagen als möglichen Wirkmechanismus eine synergistische Interaktion von dHand und Phox2-Transkriptionsfaktoren vor. Ektopische BMP4-Expression induziert in einem Teil der generierten Neuronen die Expression von dHand. Interessanterweise reicht diese, durch BMP4 induzierte, dHand-Expression nicht aus, den relativen Anteil noradrenerger Neuronen innerhalb der ektopischen und der Ciliarneuronen zu erhöhen. Diese scheinbare Diskrepanz kann erklärt werden, wenn man annimmt, daß ein bestimmter Schwellenwert in der dHand-Funktion erreicht werden muß. Dieser Schwellenwert könnte durch unterschiedliche dHand-Expression, induziert durch BMPs, durch posttranskriptionelle Kontrolle der dHand-Funktion, oder durch unterschiedliche Expression von Cofaktoren in unterschiedlich präspezifizierten Vorläuferzellen reguliert werden. In Zellen, in denen die Konzentration an aktivem dHand einen gewissen Schwellenwert übersteigt, würde dann gemeinsam mit Phox2a/b die noradrenerge Genexpression induziert oder erhalten werden.
Inhibition des Stat3-Signalweges durch Peptid-Aptamere : ein neuer Ansatzpunkt für die Tumortherapie
(2004)
In der vorliegenden Arbeit konnten durch den Einsatz modifizierter Hefe-zwei-Hybrid-Screens erstmals Peptid-Aptamere isoliert werden, die spezifisch mit verschiedenen funktionellen Domänen von Stat3 interagieren und dadurch den Stat3-Signalweg auf unterschiedlichen Ebenen inhibieren. Als Zieldomänen im Hefe-zwei-Hybrid-System wurden die Dimerisierungs- bzw. die DNA-Bindedomäne von Stat3 verwendet. Nach der erfolgreichen Identifikation von Peptid-Aptameren im modifizierten Hefe-zwei-Hybrid-System war es zunächst notwendig, die spezifische Interaktion der isolierten Peptid-Aptamere mit Stat3 zu demonstrieren. Die in vitro Interaktion der isolierten Peptid-Aptamere mit dem gesamten Stat3-Molekül wurde in Ko-Immunopräzipitationsexperimenten gezeigt. Im Folgenden bestätigte sich die spezifische Interaktion der isolierten Peptid-Aptamere mit ihren jeweiligen funktionellen Domänen von Stat3 in Hefen mittels Mating-Experimenten. In den nächsten Schritten sollte die Bioaktivität der isolierten Peptid-Aptamere bei der Inhibition des Stat3-Signalweges in verschiedenen Zellsystemen validiert werden. Zunächst konnten in Herc-Zellen, die den Stat3-Signalweg nach exogenem Stimulus (EGF) aktivieren, die molekularen Wirkungs-mechanismen, die der Inhibition des Stat3-Signalweges durch die Peptid-Aptamere zugrunde liegen, aufgeklärt werden. Durch den Einsatz eines biochemisch-molekularbiologischen Methodenrepertoires (Western Blot Analysen, Reportergen-Analysen, und Gelretardierungsexperimente) zeigte sich, dass die verschiedenen selektionierten Peptid-Aptamere mit dem Aktivierungsszenario des Stat3-Signalweges auf zwei unterschiedlichen Ebenen, der Phosphorylierung bzw. der DNA-Bindung von Stat3, interferieren. Um die mögliche Anwendung der isolierten Peptid-Aptamere als potentielle Stat3-Inhibitoren in Tumorerkrankungen zu analysieren, wurden die Untersuchungen auf Tumorzelllinien mit konstitutiv-aktivem Stat3 (murine Melanomazelllinie B16 und humane Myelomazelllinie U266) ausgeweitet. Durch die zelluläre Applikation der für die isolierten Peptid-Aptamere codierenden DNA mittels Transfektion ergaben sich erste Einblicke über den Einfluss der isolierten Peptid-Aptamere auf die transkriptionelle Aktivität von Stat3. In weiteren Untersuchungen konnte eindrucksvoll gezeigt werden, dass durch die transiente Expression eines Peptid-Aptamers (DBD-1) Apoptose in murinen Melanomazellen induziert wird. Die biologische Aktivität des DBD-1 Peptid-Aptamers wurde dann mit Hilfe einer innovativen Methode zur zellulären Applikation von potentiell wirksamen Bio-Molekülen in eukaryotische Zellen studiert. Dabei konnte im Rahmen der vorliegenden Arbeit die Methode der Proteintransduktion für die Applikation von Peptid-Aptameren etabliert werden. Durch den Einsatz der Proteintransduktion ließ sich die Funktionalität des isolierten DBD-Peptid-Aptamers nicht nur in murinen, sondern auch in humanen Stat3-abhängigen Tumorzellen verifizieren. Dabei konnte auch eine Dosis-Wirkungsbeziehung zwischen der Überlebensrate von Stat3-abhängigen Tumorzellen und der Menge an applizierten Peptid-Aptamer hergestellt werden. Darüber hinaus demonstrieren weitere Ergebnisse, dass das DBD-1 Peptid-Aptamer keinen Einfluss auf die Überlebensrate von nicht-Stat3-abhängigen Tumorzellen hat, wodurch die hohe Spezifität des DBD-1 Peptid-Aptamers bestätigt wird. Zusätzlich zu diesen funktionellen Analysen konnte der durch das Peptid-Aptamer induzierte Signalweg, der die Einleitung des programmierten Selbstmordes der Stat3-abhängigen Tumorzellen auslöst, charakterisiert werden. Die vorliegenden Daten zeigen zudem die Funktionalität der rekombinant exprimierten Peptid-Aptamere fusioniert mit einer Proteintransduktionsdomäne in einem in vivo Tumormodell in der Maus. Für diesen tierexperimentellen Ansatz fanden B16-Tumorzellen Verwendung, die nach subkutaner Injektion in Mäusen lokale Tumore bilden. In diesem Tumormodell wurde mittels intratumorale Injektion des transduzierbaren DBD-Peptid-Aptamers ein viel versprechender, wachstumshemmender Effekt auf Tumorzellen erzielt. Die Ergebnisse der vorliegenden Arbeit belegen, dass Stat3 ein ideales Zielprotein für die Entwicklung neuer Tumortherapeutika ist. Dabei stellt nicht nur die Dimerisierungsdomäne, sondern auch die DNA-Bindungsdomäne ein attraktives Ziel für die Inhibition des Transkriptionsfaktors Stat3 dar. Die viel versprechenden Daten sowohl an Tumorzellen als auch im Gesamtorganismus des Maustumormodells, verbunden mit der hier herausgearbeiteten innovativen Applikationstechnik, lassen auf einen Einsatz der isolierten Peptid-Aptamere in der Tumortherapie hoffen. Zudem eröffnen die Daten zur Protein-transduktion von Peptid-Aptameren neue Perspektiven für die Applikation von Bio-Molekülen mittels „Protein-Therapie“ in der molekularen Bio-Medizin.
Das peroxsimale Enzym Katalase wird durch Blaulichtabsorption der prosthetischen Häm- Gruppe im sichtbaren Licht und in Anwesenheit von Sauerstoff in vitro und in vivo inaktiviert. Unter physiologischen Bedingungen wird das inaktivierte Enzym in vivo durch Neusynthese ersetzt. Ist der Proteinbiosyntheseapparat jedoch durch zusätzliche Stressoren wie z. B. Kälte gehemmt, kommt es zu einem Verlust von Katalaseaktivität im Blatt. Alpenpflanzen sind an ihrem natürlichen Standort sowohl hohen Lichtintensitäten, als auch niedrigen Temperaturen ausgesetzt. Streb et al. (1997) identifizierten in Blättern der Alpenpflanze Homogyne alpina eine lichtstabile Katalase. Nach Isolierung von Katalase-cDNAs der Alpenpflanzen Soldanella alpina und Homogyne alpina, sowie der Flachlandpflanze Secale cereale (durchgeführt und zu Verfügung gestellt von M. Schmidt, Universität Frankfurt) sollten diese heterolog exprimiert und auf Lichtstabilität untersucht werden. In Hefen gelang es jedoch nicht, pflanzliche Katalasen funktionell zu exprimieren. Daher wurde die heterologe Katalase-Expression im Baculovirussystem durchgeführt. Nach Infektion von Spodoptera frugiperda Insektenzellen mit rekombinantem Baculovirus, der die jeweilige Katalase-cDNA-Sequenz enthielt, gelang es, aktive pflanzliche Katalasen zu extrahieren. Die rekombinanten Katalasen von Soldanella alpina und Secale cereale waren, ebenso wie die aus Blättern gereinigten Enzyme, lichtsensibel. Die rekombinante Katalase der Alpenpflanze Homogyne alpina war dagegen lichtstabil. Die Ermittlung der Michaelis- Menten-Kinetiken, der peroxidatischen Aktivitäten und der Empfindlichkeit gegen Inhibitoren der lichtsensiblen und lichtstabilen Katalasen ergaben, dass sich die Katalasen in ihren katalytischen Eigenschaften nicht wesentlich voneinander unterschieden. Lediglich die spezifische Aktivität der rekombinanten lichtstabilen Katalase von Homogyne alpina war signifikant herabgesetzt. Ein Vergleich der abgeleiteten Aminosäuresequenz der Katalase von Homogyne alpina mit Katalasesequenzen anderer mono- und dikotyler Pflanzen und Rinderleberkatalase zeigte sechs auffällige Aminosäuresubstitutionen in stark konservierten Bereichen: Val124Thr, Leu135Ile, Leu189Trp, Gly206Ser, His225Thr und Lys291Met. An einer computergestützten Darstellung des Modells einer 3dimensionalen Katalaseuntereinheit der lichtstabilen Katalaseuntereinheit von Homogyne alpina ist zu sehen, dass die auffälligen Aminosäuresubstitutionen in einer Region am Eingang eines seitlichen Kanals, der zum Reaktionszentrum führt, lokalisiert sind. Diese Region repräsentiert bei tierischen Katalasen eine NADPH-Bindungsstelle. NADPH schützt Rinderleberkatalase, im Gegensatz zu den rekombinanten pflanzlichen Katalasen von Secale cereale und Homogyne alpina, komplett vor der Inaktivierung durch Superoxid und partiell vor Starklichtinaktivierung. Der NADPH-vermittelte Schutz der Rinderleberkatalase ist auf eine spezifische NADPH-Bindung zurückzuführen. Die in dieser Arbeit untersuchten Katalasen von Secale cereale und Homogyne alpina binden NADPH nicht. Die aus Blättern isolierte lichtsensible Katalase von Secale cereale wird durch Superoxid nicht inaktiviert, die rekombinante lichtstabile Katalase von Homogyne alpina dagegen schon. Daher liegt der oxidativen Photoinaktivierung ein anderer Mechanismus zu Grunde, als der Superoxid-vermittelten Katalaseinaktivierung. Die Aminosäuresequenz von CATA3 von Helianthus annuus zeigte die gleichen auffälligen Aminosäuresubstitutionen wie CAT-1 von Homogyne alpina. Heterologe Expression von CATA3 mit anschließender Lichtinkubation ergab, dass CATA3, ebenso wie CAT-1 von Homogyne alpina, lichtstabil ist. In Blättern von Helianthus annuus sind Katalasen mit erhöhter Lichtstabilität als semikristalline Einschlüsse, sogenannten Cores, organisiert. Transmissionselektronenmikroskopische Aufnahmen zeigten, dass in den Peroxisomen von Homogyne alpina-Blättern ebenfalls Cores vorhanden sind. Während der Lichtinaktivierung von Katalasen soll die Oxidation von Histidinresten ausgelöst werden. Daher ist die bei den lichtstabilen Katalasen vorkommende Aminosäuresubstitution von His zu Thr (Pos. 225) in einer bei eukaryotischen Katalasen konservierten Region besonders auffällig. Deshalb wurde bei der lichtsensiblen Katalase von Soldanella alpina durch in vitro Mutagenese das His225 durch ein Thr ersetzt. Die mutagenisierte Katalase von Soldanella alpina war noch lichtempfindlicher, als das nichtmutagenisierte rekombinante Emzym. Dieses Ergebnis zeigt, dass die Region um das His225 eine wichtige Rolle für die Lichtstabilität bzw. –empfindlichkeit von pflanzlichen Katalasen einzunehmen scheint; die His225Thr Substitution ist allerdings nicht alleine für die Lichtstabilität ausreichend.
Anthropogene Landnutzung in ariden Savannen verändert die strukturelle Diversität der Vegetation und bedroht damit die Artenvielfalt der Flora und Fauna von etwa 20% der Landoberfläche der Erde. Ziel meiner Dissertation war es, den Einfluss von Landnutzung auf die Abundanz und Diversität von Kleinkarnivoren und ihrer Beutetiere zu untersuchen. Dabei sollten Bioindikatoren identifiziert werden, die eine Einschätzung der Diversität im Farmmosaik der südlichen Kalahari ermöglichen. Entlang eines Weideintensitätsgradienten analysierte ich mit Hilfe freilandökologischer Methoden die komplexen Zusammenhänge zwischen Beweidungsintensität, struktureller Diversität der Vegetation, Beuteverfügbarkeit und Diversität von Kleinkarnivoren. Nach den Ergebnissen dieser Studie in der südlichen Kalahari kann ich folgende Aussagen über die anthropogene Störung der Integrität von ariden Savannensystemen durch Beweidung treffen: 1. Eine Steigerung der Bestockungsdichten von Weidetieren führte zu drastischen Veränderungen der Zusammensetzung und strukturellen Diversität der Vegetation. Dabei sank mit zunehmendem Beweidungsdruck der Anteil an Gräsern an der Vegetationsbedeckung bei gleichzeitigem Anstieg der Strauchvegetation. Die Heterogenität des Habitats, gemessen in Anzahl von Strauchpatches (ø>4m) pro Hektar, zeigte einen unimodalen Verlauf bei steigender Strauchbedeckung und damit bei steigender Weideintensität. Maximale Habitatheterogenität wurde bei einer Strauchbedeckung von ca. 20% festgestellt. 2. Die beobachteten Veränderungen der Vegetation wirkten sich sowohl auf Tierarten aus, die sich direkt von pflanzlicher Kost ernähren als auch auf solche am Ende einer Nahrungskette: Die Effekte zunehmender Strauchbedeckung (und damit steigender Beweidungsintensität) auf die relative Häufigkeit der wichtigsten Beutetiere von Kleinkarnivoren unterschieden sich zwischen den einzelnen Gruppen. Es bestand eine lineare negative Korrelation für Orthopteren, während unimodale Antwortmuster für Käfer mit maximaler Abundanz bei einer Strauchbedeckung von ca. 15% und für Nagetiere bei ca. 12,5% festgestellt wurden, wohingegen keine Korrelation für Termiten ermittelt werden konnte. 3. Am Beispiel der Nagetiergemeinschaft konnte die wesentliche Bedeutung der räumlichen Skala für das Auflösungsvermögen von Abundanz- und Diversitätsmuster gezeigt werden. Ihre Muster und damit die Auswirkungen von Beweidung wurden ausschließlich auf einer großen räumlichen Skala (250ha) identifiziert, nicht jedoch auf der Skala des mittleren Aktionsraums (1ha). Ein wichtiges Fazit dieser Ergebnisse ist, dass zuerst diejenige räumliche Skala identifiziert werden muss, auf der ein Organismus mit Habitatstrukturen (Z.B. geeigneten Nahrungsplätzen) interagiert, um die Effekte von Veränderungen der strukturellen Zusammensetzung von Habitaten verstehen zu können. Dabei führte steigende Grasbedeckung zu einer exponentiellen Sättigung der Gesamtabundanz sowie der Diversität der Nagetiere. Dagegen wurde bei Zunahme der Strauchbedeckung ein unimodales Muster für Gesamtabundanz und Diversität festgestellt. 4. Obwohl ein hoher Strauchanteil sich durchgehend negativ auf die Beuteverfügbarkeit auswirkte, haben Sträucher eine besondere Bedeutung für die Artenvielfalt in diesem Lebensraum, da sie als Schutz- und Nistplatz wichtige Funktionen erfüllen. Am Beispiel von Fuchsmangusten (Cynictis penicillata) konnte ich exemplarisch die zentralen Funktionen von Sträuchern und ihren Einfluss auf den Reproduktionserfolg dieser Art zeigen. Interessanterweise waren die Auswirkungen von Sträuchern inkonsistent für unterschiedliche räumliche Skalen. Im Mikrohabitat haben Strauchstrukturen positive Eigenschaften (Schutzfunktionen). Fuchsmangusten legten ihre Bauten meistens unter Sträuchern an, um ein Einstürzen durch Huftrampeln zu verhindern und ihr Prädationsrisiko durch Greifvögel zu reduzieren. Für die Anlage ihrer Reproduktionsbauten wählten sie Strauchstrukturen mit einem Durchmesser von mindestens sechs Metern (bevorzugt der Art Acacia hebeclada) und außerdem, wenn sich im Umkreis von 10 Metern kein weiterer Strauchpatch befand. Auf einer größeren räumlichen Skala (im Umfeld von einem Hektar um Reproduktionsbauten) wurden Flächen mit einer Strauchbedeckung präferiert, die geringer war, als zufällige Flächen im Habitat. Dabei wirkte sich zunehmende Strauchbedeckung auch negativ auf die Gruppengröße und den Reproduktionserfolg dieser Art aus. Für eine erfolgreiche Reproduktion bei Fuchsmangusten scheint die Strauchbedeckung im Umfeld von einem Hektar um die Reproduktionsbauten einen Schwellenwert zwischen 10 und 15% nicht überschreiten zu dürfen. Dies ist mit der sinkenden Beuteverfügbarkeit (Nagetiere und Arthropoden) bei zunehmender Strauchbedeckung zu begründen. 5. Aufgrund der dramatischen Auswirkungen von Verbuschung auf die Beuteverfügbarkeit von Kleinkarnivoren unterschieden sich die Abundanzen der einzelnen Kleinkarnivoren deutlich zwischen diesen Farmen. Die Abundanz der jeweiligen Einzelarten konnte über Regressionsmodelle mit Vegetationsparameter oder Beutetierverfügbarkeit erklärt werden. Im Gegensatz dazu war die Strauchbedeckung die beste erklärende Variable für Gesamtabundanz und Diversität der Gilde. Sie integriert habitatspezifische Eigenschaften, wie die Verfügbarkeit von vier Beutetiergruppen, die Konnektivität von Nahrungspatches mit hoher Qualität, das Prädationsrisiko durch Greifvögel sowie das Nistplatzangebot. Dabei sank mit zunehmender Strauchbedeckung die Gesamtabundanz, während für die Diversität ein unimodales Muster mit maximaler Diversität bei einer Strauchbedeckung von ca. 12,5% festgestellt wurde. Für eine Einschätzung der Diversität von Kleinkarnivoren eignet sich die Ginsterkatze (Genetta genetta) als Indikatorart. Interessanterweise war die Strauchbedeckung ein noch besserer Bioindikator für die Einschätzung der Diversität von Kleinkarnivoren. 6. Die Schlussfolgerung meiner Ergebnisse ist, dass die Diversität der Kleinkarnivoren einen Großteil der Biodiversität der Untersuchungsflächen in der südlichen Kalahari widerspiegelt. Dabei integriert die Kleinkarnivorengilde als Indikatorvariable neben der zoologischen Diversität (i) auch die strukturelle Diversität der Vegetation (ii) sowie die strukturelle Organisation im Nahrungsnetz (iii). Kleinkarnivoren erhalten dadurch einen Status einer Indikatorgilde und eignen sich damit sehr gut zur Beurteilung der südlichen Kalahari oder einer anderen Weidelandschaft arider Savannen. 7. Das für den Naturschutz wichtigste Ergebnis meiner Arbeit ist, dass höchste Diversität aller Untersuchungsorganismen bei einer Strauchbedeckung zwischen 10 und 15%, also einer mittleren Beweidungsintensität von ca. 3,5 LSU/ l00ha, festgestellt wurde. Daher wirken sich mäßige Bestockungsdichten durchaus positiv auf die Diversität aus, während eine Überbeweidung einen dramatischen Rückgang der Artenvielfalt in diesem Lebensraum verursacht.
Die thrombotisch thrombozytopenische Purpura (TTP) ist ein schweres, heterogenes Syndrom, bei welchem es zu einer lebensbedrohlichen, disseminierten Mikrothrombosierung in den arteriellen Kapillaren kommt. Bei Patienten mit TTP wurde 1997 erstmalig ein Mangel an der Von Willebrand Faktor (VWF)-spaltenden Protease entdeckt. Diese Protease wurde 2001 als ein neues Mitglied der "a disintegrin and metalloprotease with thrombospondin motifs"-Familie identifiziert und als ADAMTS-13 bezeichnet. Der ADAMTS-13-Mangel soll eine Anreicherung großer VWF-Multimere verursachen, welche für die pathologische Thrombenbildung bei Patienten mit TTP verantwortlich gemacht wird. Im Rahmen der vorliegenden Arbeit wurde zunächst ein neuartiges Verfahren zur Bestimmung der ADAMTS-13-Aktivität entwickelt. Mittels des neuen Verfahrens wurde die Bedeutung von ADAMTS-13 in der Pathophysiologie der erworbenen TTP und in der Genese anderer Erkrankungen untersucht. Bei der hier entwickelten Methode wird eine beliebige Testprobe mit einem ADAMTS-13-freien VWF-Substrat versetzt und nach entsprechender Inkubation die ADAMTS-13-Aktivität ermittelt, indem der Abfall der VWF-vermittelten Aggregation von Thrombozyten gemessen wird. Das neuartige Verfahren zeigt eine gute Reproduzierbarkeit und wurde durch extensiven Vergleich mit der herkömmlichen Immunoblotting-Methode validiert. Zudem wurde die Richtigkeit der Methode durch erfolgreiche Teilnahme an einer internationalen Multicenterstudie bestätigt. Die neue Methode ist im Gegensatz zu den herkömmlichen Verfahren im klinisch-diagnostischen Routinelabor anwendbar, da das Verfahren auf der Verwendung eines routineerprobten, automatisierten Testes zur Bestimmung der VWF:Ristocetin-Kofaktor-Aktivität beruht. Der Test ist bei hohem Probendurchsatz schnell und einfach durchführbar und benötigt keine spezielle Laborausrüstung oder besondere Expertise. In den untersuchten Patientenkollektiven war der schwere ADAMTS-13-Mangel mit einer Spezifität von 100% und einer Sensitivität von 89% mit einer akuten TTP korreliert. Bei 85% der Plasmaproben mit hochgradig erniedrigter ADAMTS-13-Aktivität konnte in vitro eine inhibitorische Aktivität gegen ADAMTS-13 detektiert werden. Die Plasmapherese-Therapie (PP-Therapie) führte in 75% der untersuchten TTP-Episoden zu einer letztendlichen Eliminierung des Inhibitors mit einer korrespondierenden Erhöhung der ADAMTS-13-Aktivität. Der Anstieg der ADAMTS-13-Aktivität war in diesen Fällen eng mit dem Anstieg der Thrombozyten assoziert. In 15% der untersuchten Episoden führte die PP-Therapie zu einer Erniedrigung des Inhibitortiters ohne messbare Rekonstitution der ADAMTS-13-Aktivität. Bei 10% der untersuchten Episoden kam es unter PP-Therapie zu einem permanenten Anstieg des Inhibitortiters. Trotz fehlender Rekonstitution der ADAMTS-13-Aktivität in den letztgenannten Fällen induzierte die PP-Therapie eine klinische Remission. Zwei Patienten zeigten nach Splenektomie bzw. Rituximab-Gabe ohne nachweisbare Rekonstitution der ADAMTS-13-Aktivität ebenfalls eine konsistente, klinische Remission. Die Ergebnisse zeigen, dass die in vitro gemessene ADAMTS-13-Aktivität die pathophysiologisch wirksamen Prozesse der akuten TTP nicht immer eindeutig erklären. Dies weist auf bislang unentdeckte pathogene Mechanismen hin. Zudem könnten die derzeit gängigen Methoden zur Bestimmung der ADAMTS-13-Aktivität (einschließlich des hier entwickelten Verfahrens) die tatsächliche in vivo VWF-Proteolyse durch ADAMTS-13 nicht ausreichend widerspiegeln. Die Ergebnisse dieser Arbeit zeigen, dass ein ADAMTS-13-Mangel als ein Risikofaktor, und nicht als der alleinige Auslöser, für die akute TTP betrachtet werden sollte. Die Bestimmung der ADAMTS-13-Aktivität bei den unterschiedlichsten hämatologischen Erkrankungen offenbarte eine moderat erniedrigte ADAMTS-13-Aktivität in einer Vielzahl von schweren, zumeist intensivpflichtigen Erkrankungen. Bei einigen Patienten konnte nachgewiesen werden, dass sich die ADAMTS-13-Aktivität in Remission normalisiert. Daraus lässt sich möglicherweise vermuten, dass sich die ADAMTS-13-Aktivität generell bei einer Akut-Phasen-Reaktion erniedrigt. Die Untersuchungen der ADAMTS-13-Aktivität bei Patienten mit malignen Erkrankungen zeigte bei 21% der getesteten Patienten einen milden ADAMTS-13 Mangel. Bei den untersuchten Patienten mit Hirn- und Prostatatumoren konnte, im Gegensatz zu vorhergehenden Studien mit anderen Tumortypen, keine Korrelation zwischen erniedrigter ADAMTS-13-Aktivität und dem Grad der Malignität bzw. der Dissemination des Tumors gefunden werden. Die Bestimmung der ADAMTS-13-Aktivität bei einem umfangreichen Patientenkollektiv mit thromboembolischen Erkrankungen zeigte, dass der ADAMTS-13 Mangel kein häufig vorkommender Risikofaktor für das Auftreten von arteriellen oder venösen Thrombosen darstellt. In der vorliegenden Studie wurde jedoch der weltweit erste Fall eines milden, congenitalen ADAMTS-13 Mangels bei einer Patientin mit familiären, rezidivierenden, ischämischen Schlaganfällen gefunden. Zusammenfassend wurde in der vorliegenden Arbeit ein neuartiges Verfahren zur Bestimmung der VWF-spaltenden Proteaseaktivität von ADAMTS-13 entwickelt, welchem durch seine klinische Anwendbarkeit in Zukunft eine weitreichende Bedeutung zufallen könnte. Die klinischen Studien dieser Arbeit belegen zum einen den Zusammenhang zwischen ADAMTS-13 und TTP und weisen zum anderen auf andere bislang nicht identifizierte Mechanismen hin, welche das klinische Bild der TTP determinieren. Des weiteren konnte im Rahmen dieser Arbeit gezeigt werden, dass ADAMTS-13 neben einer Beteiligung an der Akut-Phasen-Reaktion, eine möglicherweise sehr bedeutsame Rolle bei malignen und thromboembolischen Erkrankungen spielt. Dies sollte in zukünftigen Studien, insbesondere im Hinblick auf neuartige therapeutische Möglichkeiten durch die Gabe von ADAMTS-13, näher untersucht werden.
Die vorliegende Arbeit wurde partiell als Bestandteil eines von der EU geförderten TME-Projektes angefertigt. Das vorrangige Ziel war die Weiterentwicklung der Methodik, die Ring-Testung und die Freiland-Validierung eines offenen und ungestörten terrestrischen Modellökosystems (TMEs). Hierzu wurden die Auswirkungen der Modellchemikalie Carbendazim (fungizider Wirkstoff der Formulierung Derosal®) auf die Enchytraeidenzönose mit TMEs im Labor und in Freiland- Validierungsstudien untersucht. Die Familie Enchytraeidae (Annelida, Oligochaeta) unterlag auf Grund ihrer hohen ökologischen Wertigkeit und einer bekannten Sensitivität gegenüber Carbendazim, im Rahmen dieser Arbeit einer weitergehenden und vertiefenden Auswertung. Im Detail wurde analysiert, welcher der mittels TMEs für die Enchytraeen erhobenen Parameter gegenüber der Exposition von Carbendazim am sensitivsten reagiert und bei der statistischen Auswertung den niedrigsten NOEC- bzw. EC50-Wert liefert. Darüber hinaus wurde die Frage geklärt, welche der in einer TME-Studie generierten ökotoxikologischen Kenngrößen, NOEC oder EC50, am sinnvollsten in der Risikobeurteilung eingesetzt werden sollte. Die Versuche wurden in Amsterdam (Niederland), Bangor (Wales, England), Coimbra (Portugal) und Flörsheim (Deutschland) durchgeführt. An allen Standorten wurde mit dem gleichen Equipment gearbeitet. Die TMEs bestanden aus intakten Bodensäulen (Ø = 17.5 cm, Länge = 40 cm) mit ungestörter Schichtung, indigener Bodenfauna und natürlichem Pflanzenbewuchs. Die Entnahme der TMEs erfolgte auf den Flächen, auf denen auch die entsprechenden Freiland-Validierungsstudien durchgeführt wurden. Es handelte sich dabei um Grünland bzw. in einem Fall (Coimbra) um eine landwirtschaftliche Nutzfläche. Unabhängig von den jeweiligen Bodeneigenschaften konnten an allen Standorten mit den angewandten Methoden intakte Bodensäulen im Freiland entnommen und über eine dreimonatige Versuchsdauer als TMEs im Labor oder im Gewächshaus installiert werden. Zumindest für diesen Versuchszeitraum war die Aufrechterhaltung einer natürlichen Zönose der Enchytraeen in den TMEs unter den beschriebenen Versuchsbedingungen möglich. Untersucht wurden die Parameter Gesamtabundanz, Artenanzahl, Shannon-Wiener Index, Dominanzspektrum, Abundanz der Gattungen Fridericia und Enchytraeus, Anteil der Juvenilen an der Gesamtabundanz sowie die Vertikalverteilung der Enchytraeidae. Mittels einer multivariaten Statistik (PRC, Principal Response Curve) wurden die Auswirkungen auf den Endpunkt Enchytraeidae-Artengemeinschaft bestimmt. An allen Standorten kam es im TME-Vortest, im TME-Ringtest und in der Freiland-Validierungsstudie bei allen Probennahmezeitpunkten zu einer hohen Variabilität der Messwerte, die durch die heterogene räumliche Verteilung der Enchytraeidae bedingt ist. Traten Unterschiede zwischen den Kontrollen der verschiedenen Probennahmezeitpunkte im TME-Vortest und im TME-Ringtest auf, waren sie meist auf eine hohe Variabilität des jeweiligen Endpunktes zurückzuführen. Nur in wenigen Ausnahmefällen kam es zu einer kontinuierlichen Zunahme während der Versuchsdurchführung. In der Freiland-Validierungsstudie nahmen die jeweiligen Messwerte in den Kontrollen während der Versuchsdauer ab. Dies war die Folge der hohen Sommertemperaturen und der dadurch bedingten Austrocknung des Bodens, die in der Freiland-Validierungsstudie, wie alle Umweltbedingungen, nicht zu kontrollieren war. Beim Vergleich TME-Ringtest versus Freiland-Validierungsstudie lagen die Kontrollwerte der einzelnen Parameter in den beiden Studien in vergleichbaren Größenordnungen. Zwischen den Standorten konnten im TME-Vortest, im TME-Ringtest und in der Freiland- Validierungsstudie für alle Parameter keine prinzipiellen Differenzen bezüglich der Entwicklung der Kontrollen über die Probennahmezeitpunkte beobachtetet werden. An allen Standorten zeigten die untersuchten Parameter im TME-Vortest, im TME-Ringtest und in der Freiland-Validierungsstudie eine gute Übereinstimmung mit in der Literatur veröffentlichten Ergebnissen. Insgesamt lässt sich für die Entwicklung der Kontrollen über die Zeit ableiten, dass sich die Enchytraeenzönosen in den TMEs sowie am entsprechenden Freilandstandort hinsichtlich der untersuchten Parameter und ihrer räumlichen Heterogenität unabhängig von den Bodeneigenschaften nicht unterschieden. Aufgrund dieser Tatsache können systembedingte methodische Fehler bei der Erfassung von Chemikalienwirkungen auf die Enchytraeenzönosen unterschiedlicher Standorte mittels TMEs ausgeschlossen werden. Die grundlegenden Voraussetzungen für den Einsatz von TMEs als ökotoxikologisches Testsystem und Instrument in der Ökotoxikologie sind somit gegeben. An den unterschiedlichen Standorten waren die Auswirkungen von Carbendazim auf die untersuchten Parameter an den unterschiedlichen Probennahmezeitpunkten im TME-Ringtest ähnlich wie in der Freiland-Validierungsstudie. Zum Probennahmezeitpunkt w+16 waren die Effekte im TME-Ringtest und in der Freiland-Validierungsstudie vergleichbar denen im TME-Vortest. Die zwischen den Standorten festgestellten Unterschiede hinsichtlich des zeitlichen Verlaufs der Effekte sind auf die unterschiedlichen Bodeneigenschaften und die speziellen Substanzeigenschaften von Carbendazim zurückzuführen. Daher sollten bei der Planung einer TME-Studie neben den Charakteristika der zu testenden Substanz auch die standortspezifischen pedologischen Gegebenheiten berücksichtigt werden. Dabei sollten die Versuchdauer und das Raster der Probennahmen so angelegt sein, dass die maximalen Auswirkungen einer Testsubstanz sowie eine eventuelle Regeneration festgestellt werden können. Zwischen dem TME-Vortest, dem TME-Ringtest und der Freiland-Validierungsstudie sowie zwischen den verschiedenen Standorten konnten bezüglich der Sensitivität der untersuchten Endpunkte keine Unterschiede beobachtet werden. Die niedrigsten NOEC-Werte wurden im TME-Vortest, im TME-Ringtest und in der Freiland-Validierungsstudie am häufigsten mit den Parametern Dominanzspektrum und Enchytraeidae-Artengemeinschaft bestimmt. Die niedrigsten EC50-Werte (inklusive enger 95 % Vertrauensbereiche) wurden für die mit Hilfe der PRC ermittelten sensitivsten Taxa berechnet. In dieser Arbeit konnte gezeigt werden, dass multivariate statistische Verfahren wie die PRC am besten geeignet sind, um Multispezies-Testsysteme wie die TMEs auszuwerten. Darüber hinaus lassen sich mittels PRC die jeweils empfindlichsten Taxa ermitteln, für welche dann wiederum EC50-Werte mit sehr engen 95 % Vertrauensbereichen berechnet werden können. Eine einfachere Alternative ist die Auswertung des Parameters Dominanzspektrum. Mit diesem Endpunkt lassen sich sowohl NOEC-Werte bestimmen als auch sensitive Taxa ermitteln für die anschließend EC50-Werte zu berechnet werden können. EC50-Werte waren an allen Standorten sowohl im TME-Vortest und im TME-Ringtest als auch in der Freiland-Validierungsstudie häufiger bestimmbar als NOEC-Werte. Die EC50- Werte lagen meist unter den entsprechenden NOEC-Werten. Der Faktor zwischen den an den einzelnen Standorten ermittelten Minimum- bzw. Maximumwerten war für die EC50-Werte niedriger als für die NOEC-Werte. Die im TME-Ringtest ermittelten NOEC- und EC50-Werte entsprachen denen der Freiland-Validierungsstudie. Beim Vergleich der Standorte zeigten die EC50-Werte eine geringere Streuung als die NOEC-Werte. Der Variationskoeffizient der für den TME-Vortest und den TME-Ringtest berechneten EC50- Werte sowie der Faktor zwischen Minimum- und Maximumwert der unterschiedlichen Institute war denen anderer Ringtests, die mit Labormethoden durchgeführt wurden, vergleichbar, obwohl hier unterschiedliche Böden mit unterschiedlichen Enchytraeenzönosen verwendet wurden. Die im TME-Vortest und im TME-Ringtest festgestellten EC50-Werte sind mit den in der Literatur für Enchytraeen und Lumbriciden angegebenen LC/EC50-Werten sehr gut vergleichbar und liegen im unteren Bereich dieser Angaben. Damit konnte im Rahmen dieser Arbeit nachgewiesen werden, dass die mittels TME generierten Ergebnisse replizierbar und reproduzierbar sind, was eine wichtige Bedingung für die Verwendung als Testsystem in der Ökotoxikologie darstellt. Gleichzeitig wurde mittels der Freiland-Validierungsstudie die ökologische Relevanz der TME-Resultate belegt. TMEs können als sinnvolles Instrument zur Verbesserung der Risikobewertung für das Kompartiment Boden für neue/existierende Chemikalien, Biozide und Pflanzenschutzmittel betrachtet werden. Strukturelle Parameter wie z.B. die Enchytraeidae-Artengemeinschaft oder das Dominanzspektrum sollten in die Auswertung mit einbezogen und multivariate Verfahren wie die PRC verwendet werden. Damit ist es möglich, die sensitivsten Taxa zu identifizieren, Zusammenfasssung 178 für welche EC50-Werte berechnet werden können. Anstelle von NOEC-Werten sollten bei der Auswertung von TME-Studien bevorzugt EC50-Werte als ökotoxikologische Kenngröße in die Risikobewertung eingehen (z.B. zur Berechnung von TER-Werten). Die dabei zu verwendenden Sicherheitsfaktoren sind entsprechend anzupassen. Mit der Kombination Enchytraeidae und TME ist neben der Untersuchung von ökotoxikologischen Effekten zudem eine gute Möglichkeit gegeben, das Bioakkumulationspotential von Chemikalien zu bestimmen. Damit stehen für ökotoxikologische Untersuchungen auf den unterschiedlichsten Ebenen (Labor, Modellökosystem, Freiland, Bioakkumulation) standardisierte Testsysteme mit Enchytraeen zur Bestimmung der Wirkungen und des Verhaltens von Chemikalien zur Verfügung.